7月5日总结的实验材料方法.doc

氨氮的测定（纳氏试剂分光光度法）UV9200分光光度仪1.药品：a：纳氏试剂：取16g NaOH，溶于50ml水中，冷却至室温。另取7g KI和10g HgI2 然后将此倒入NaOH溶液中，稀释至100ml，贮藏于聚乙烯瓶中，密封保存。b：酒石酸钠：称50g酒石酸钠溶于100ml水中，加热去氨，冷却定容至100ml。c：氨贮备液：取3.819g 经1000C 干燥的NH4Cl溶于水中，稀释至1000ml。d：氨使用液：取1ml氨贮液定容至100ml，每毫升含0.01mg氨氮。2.测定a：绘制标线：取0、0.5、1、3、5、7、10氨使用液于50ml比色管中，加水至标线，加入1.0ml酒石酸钾钠，1.5ml纳氏试剂。放10min后于420nm处，以蒸馏水为参比测其吸光度。b：水样测定：吸取1ml水样，按于标线同样的步骤测定。硝酸盐氮的测定（酚二磺酸分光光度法）1 药品a：酚二磺酸：称取25g苯酚于500ml锥形瓶中加入225ml浓硫酸，贮藏于棕色瓶中，密封保存。b：氨水c： 硝酸盐标贮：称取07218g烘干2h的KNO3,溶于水中定容至1000ml加2mlCH3Cl3，可保存6个月。d：硝酸盐使用液：取50ml贮备液于蒸发皿，加入0.1mol/L NaOH调PH至8，水浴蒸干，加2ml酚二磺酸，研磨片刻，再研磨，加少量水，定容至500ml贮于棕色瓶中，每毫升含0.01mg硝酸盐氮。2. 测定a：标线绘制：取0、0.5、0.7、1、3、5、7、10ml放入50ml比色管中加入40ml蒸馏水加入3ml氨水定容，在410nm处以蒸馏水为参比测定。b：水样的测定：取20ml水样于蒸发皿中蒸干，加1ml酚二磺酸，研磨片刻再研磨，放10min加10ml水，加3ml氨水移入比色管中稀释至50ml在410nm处以蒸馏水为参比测定。总氮的测定（过硫酸钾氧化分光光度计法）1 药品a：1+9盐酸b： 碱性过硫酸钾：取10g过硫酸钾3.75g NaOH溶于水中稀释至250ml贮于聚乙烯瓶，可保存一周。c：硝酸钾标贮：称0.77218g烘干4h的KNO3稀释至1000ml，加2mlCH3Cl3,。d：硝酸钾使用液:取10ml贮备液，定容至100ml。2 测定a：标线:取 0、0.5、1、2、3、5 标使于25ml比色管中，稀释至10ml加5ml碱性过硫酸钾，用纱布系好，消煮，冷却后加入1ml 1+9的盐酸，定容至25ml测定。b：水样的测定：取2ml水样，按于与标线的相同步骤测。3 计算：A=A220-2A275总氮的测定（碱性过硫酸钾消解，紫外分光光度法）在常压、145条件下，以CuO与TiO2的混合物（1：1）作为催化剂，用碱性K2S2O8（氧化剂，30克K2S2O8 配成1升溶液）将有机氮和低氧化态氮定量氧化成硝酸盐，以比色法测定总氮。具体操作为：吸取适量水样于50ml比色管中，加入氧化剂8.0ml，2molNaOH 4.0ml，催化剂0.20.3g，稀释至25ml。加塞，并用胶布贴紧管塞，摇匀。在145下烘45min。用1mol H2SO4调至Ph=24,加1.0ml 4%盐酸羟胺，定容至50ml。在220nm处，以试剂空白为参比进行比色分析。比较CuSO4、CuO、TiO2等几种催化剂的催化效果。结果表明，在实验条件下，以CuO与TiO2的混合物的催化效果为最好。用量在0.150.35g时，可使吸光度达到最大。实验还表明，氧化反应在140以上，反应40min，并加入2mol NaOH 35ml时，反应进行得最完全。在本实验条件下，2.5mg Fe3+、300ug Cr6+、碳酸盐及有机物的干扰均可被消除。本法与高压氧化法所得到的工作曲线基本重合。从工作曲线可知。当水样含氮量在0150mg/l时，浓度与吸光度呈线性关系。由此计算得方法的检出限为0.04mg/l。分别用本法和高压氧化法对江水、工业废水等6种水样进行对比试验。所得结果基本一致。本法的变异系数为0.07%0.86%，平均为0.41%。总磷的测定（钼锑抗分光光度法）1 药品：1+1硫酸2磷标贮：取0.217g 烘干2h的磷酸二氢钾，移入1000ml容量瓶，加（1+1）硫酸5ml用水稀释至刻度线。c 磷标使用液：取4ml稀释至100ml每毫升含2ug磷，现配现用。e 钼酸盐指示剂：称0.5g酒石酸锑钾于100ml水中另取10g钼酸铵，冷却后，把酒石酸锑钾加入到钼酸铵溶液中稀释至1L，贮藏于棕色瓶中。1.5-100ml的比例，称抗坏血酸，溶于上面的贮备液中制成指示剂。2 测定 ：取0 0.5 1 3 5 10于50ml比色管中稀释至25ml加入4ml过硫酸钾消煮，冷却后加入3ml指示剂，稀释至刻度线，于700nm处，以蒸馏水为参比测定。b：水样：取5ml水样按标线方法测定。（过磷酸钾消解分光光度法）(1)消化称10-50mg的过100目筛孔充分风干的沉积物样于50而的比色管中，加入25ml消化剂溶液，再用蒸馏水稀释至50nil，加盖摇匀，用纱布扎紧盖子，放入高压蒸汽灭菌器中，在120下高压消化30分钟，冷却后取出。吸消化液分别进行NO-3-N和PO43- P测定。另分别吸取10林g/Inl的氮、磷混合标准液0、l、2、3、4、5、6ml于7个消化容器中，即每管中含氮、磷分别为0、10、20、30、40、50、60ug，以组成标准系列。然后按上法与样品同时消化。(2) NO-3-N的测定取消化液上清液在220nrn波长和275nm波长处，用1cm石英比色皿进行测定，其吸收之差(A220-A276)对应于工作曲线查出相应的含氮微克数（ug)，除以土重(mg)，得全氮含量（ug/mg)。(3) PO43- P的测定吸取消化液的上清液l0ml于25ml比色管中，准确加入2.5ml铝锑抗混合显色剂，加蒸馏水定容至25ml，摇匀，置于20-40温度下显色30分钟后，在660-700nm处，用3cm比色皿在751分光光度计上进行磷的测定。样品测定值A660对应于工作曲线查出相应的含磷量(ug)，除以土重(mg)，得全磷含量（ug/mg)。COD测定（重铬酸钾微波消解法 MS-型微波消解COD仪）a： K2Cr2O2标准溶液：称预先烘干2h的12.258g溶于水中，移入1000ml容量瓶中，稀释至刻度线。b：试亚铁灵指示剂：称取1.485g邻菲啰啉，0.695g硫酸亚铁溶于水中，稀释至100ml。贮于棕色瓶中。c：硫酸盐铁铵标使：称取39.5g硫酸亚铁铵溶于水中，加入20ml浓硫酸，冷却后，稀释至1000ml容量瓶，临用前用K2Cr2O7标定。标定方法：取10ml K2Cr2O7于500ml锥形瓶中，加入110ml水，30ml浓硫酸，混匀冷却，加3滴试亚铁灵，滴定颜色为黄色-蓝绿-红褐色 C=0.250*10/V V：硫酸亚铁铵用量。2 测定取10ml水样，加入水于回流锥形瓶中。加入10ml K2Cr2O7。连接冷凝管，加入30ml浓硫酸。摇匀加热回流1h(煮沸计时)冷却后加入90ml蒸馏水，拆冷凝管，加3滴试亚铁灵，用硫酸亚铁铵滴定，颜色由黄 蓝绿 红褐色。空白加20ml蒸馏水，其余同上。叶绿素a的测定1 药品a：50mg/L的MgCO3:取0.5g溶于100ml蒸馏水中，从中吸取1ml稀释至100ml2 测定：取300ml水样，离心（4000r/min），弃掉上清液，加入1ml50mg/L的MgCO3，用滤纸尽量吸掉多余的水分，再加入2ml90%的丙酮，研磨。研磨2min，再用5ml的丙酮把研磨皿中的液体洗入离心管中，离心，提取上清液，再离心，重复1-2次，再用丙酮定容到25ml，在750nm、663nm、645nm、630nm处测吸光度。以90%的丙酮做参比。3 计算叶绿素a=11.64（D663-D750）-2.16(D645-D750)+0.10(D630-D750)V1*V-1*L单位：（mg/L）V为藻类培养样品体积（ml）D为吸光度V1为定容体积（ml）L为比色皿厚度（cm）1 材料与方法实验器材与药品：DR /4000 型分光光度计 ( 美国 HACH 公司 );TL80-1 型医用离心机 ;TPA8002 型水浴锅; 真空泵 ;90 %(V %) 乙醇溶液 ;0.45 m 微孔滤膜。实验方法：热乙醇法简要实验步骤:(1) 抽滤一定量水样, 采用 0.45 m 微孔滤膜, 真空泵压力控制在 0.05MPa。(2) 将滤膜剪碎后放入加有 10ml 90 %乙醇溶液的刻度试管中。 (3) 将试管置于75水浴锅中提取5min。(4) 取其提取液进行测定。采用分光光度计读取其665nm和750nm 处的吸光度数值。向其中加入 1mol/ L 盐酸, 8min后再次读取其665nm和750nm 处的吸光度数值。 (5) 利用公式计算叶绿素含量: c (chla) = 27.3( E a - E b ) V e /V 式中, c (chla) 为水样中叶绿素 a 的含量, g /L; Ea 为提取液酸化前波长 665nm和750nm 处的光密度之差; Eb为提取液酸化后波长665nm和750nm处的光密度之差 ; Ve为提取液的总体积 ,10ml; V为抽滤的水样体积L。冷冻提取法简要实验步骤:(1)(4)(5) 同“热乙醇法”。 (2) 将滤膜剪碎后放入加有 6ml 90 %乙醇溶液的 10ml 离心管中 , 置于4冷藏12h。 (3) 冷藏12h后,离心15min(转速3500r/ min), 取其提取液加入 10ml试管;向离心管中补加4ml,90%乙醇溶液 ,再离心 5min( 转速 3500r/min),将其提取液也加入该10ml 试管,并补加90%乙醇,溶液至提取液总量为10ml。计算公式同“热乙醇法” 采用公式计算后