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课后限时练(四十一)微生物的培养与应用(计时:45分钟满分:100分)一、选择题(本大题共12小题,每小题4分,共48分) 1(2014广东珠海一模)下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是()a植物组织培养常用的是固体培养基b可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型c利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌d在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌解析在只以尿素作为氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。答案d2(2014浙江金华模拟)下列对灭菌和消毒的理解不正确的是()a灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子b消毒和灭菌实质上是完全相同的c接种环用灼烧法灭菌d常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法解析消毒是使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子),灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。答案b3(2014浙江宁波模拟)下列关于测定亚硝酸盐含量的操作,错误的是()a质量浓度为4 mg/ml的对氨基苯磺酸溶液呈酸性b对氨基苯磺酸溶液和n1萘基乙二胺盐酸盐溶液,应避光保存c质量浓度为5 g/ml的亚硝酸钠溶液应保持弱碱性环境d制备样品处理液,加入氢氧化铝的目的是中和氢氧化钠解析从实验原理、操作步骤及注意事项上进行分析。对氨基苯磺酸溶液和n1萘基乙二胺盐酸盐溶液都呈酸性,为保证其稳定性,应低温密闭保存;亚硝酸钠标准液配制过程中应加入nh4cl缓冲液,保持弱碱性环境以免形成亚硝酸挥发;制备样品处理液,加入氢氧化铝的目的是使滤液中色素脱色,使滤液变得无色透明。答案d4(2014安徽淮南期末)用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时()可以用相同的培养基都需要使用接种针进行接种都需要在火焰旁进行接种都可以用来计数活菌a bc d解析平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基,故正确;平板划线法采用接种环进行操作,而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作,故错误;纯化时,要进行无菌操作,需要在火焰旁接种,避免空气中的微生物混入培养基,故正确;平板划线法一般用于分离而不是计数,故项错误。答案c5(2014浙江台州一模)用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是()a未接种的选择培养基b未接种的牛肉膏蛋白胨培养基c接种了的牛肉膏蛋白胨培养基d接种了的选择培养基解析将菌液稀释相同的倍数,在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目,因此,用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。对照实验遵循的原则之一是单一变量,所以与选择培养基一样接种、培养。答案c6(2014广东广州模拟)下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是()a利用稀释涂布平板法既能分离微生物也能对微生物进行计数b接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单个菌落c以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌d用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先减少后增加解析稀释涂布平板法可以用于分离微生物以及对微生物计数;接种时要连续划线,这样可以获得单个菌落;大白菜腌制过程中开始时细菌大量繁殖,亚硝酸盐含量增加,一般腌制10 d后亚硝酸盐含量下降。答案d7下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是()a用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板b取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 ml,分别涂布于各组平板上c将实验组和对照组平板倒置,37 恒温培养2448小时d确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数解析确定对照组无菌后,选择菌落数在30300的平板进行计数,d项错;a项是培养基的灭菌方法,b项设置了一系列对照实验,c项是细菌的培养方法,a、b、c三个选项均正确。答案d8分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是()a经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上b富集培养这一步可省略,但培养的纤维素分解菌少c经稀释培养后,用刚果红染色d对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上解析经选择培养后,再经稀释,才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上;富集培养可省略;经稀释培养后,用刚果红染色;设置对照能证明经富集培养的确得到了欲分离的微生物。答案a9抗生素可由微生物产生,具有抑菌作用,能在琼脂培养基中扩散。在筛选产生抗生素的菌种时,先在琼脂培养基平板上划线接种一种从土壤中获得的甲菌,在27 下培养3天,形成菌落。然后接种乙、丙、丁三种致病菌(图a),继续在同样条件下培养3天,结果如图b。分析结果,得出的结论是()甲菌产生了抗生素丁菌的生长被丙菌产生的抗生素抑制乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制丙菌产生的抗生素抑制了乙菌的生长a bc d解析乙、丙、丁三种致病菌不会产生抗生素,否则靠近乙、丙、丁的甲菌落不能生长。从图b来看,乙菌的生长被抑制,最可能的原因是甲菌产生了抗生素,此种抗生素只能抑制乙菌的生长,而对丙、丁两种细菌没有影响。正确,答案为a。答案a10下表表示在不同培养基中细菌的生长繁殖情况。(a、b、c、h、i、j、k、m为培养基的成分,“”表示生长,“”表示不生长),请分析下列哪种物质细菌不能合成() ahbick dm解析培养基是按照微生物的生长需要,用人工方法配制而成的营养物,其中有些是各种微生物都必需的,大多数情况下按微生物特殊营养要求配制的培养基,称选择培养基。比较细菌能够生长的培养基的添加物,凡添加了物质k的培养基,细菌都能生长,反之则不能生长,说明物质k是细菌不能合成的。答案c11将细菌放在固体培养基上培养,它会繁殖并形成菌落(如图甲)。某实验小组想检验a、b两种抗生素的杀菌作用,下列实验方案最合适的是()解析本实验的目的是检验a、b两种抗生素的杀菌作用,应设置不加抗生素的对照组和分别加a、b两种抗生素的实验组。答案c12三个培养皿中分别加入10 ml不同的培养基,然后接种相同的大肠杆菌样液。培养36 h后,计算菌落数,结果如下表。下列选项正确的是()培养皿培养基成分菌落数琼脂、葡萄糖35琼脂、葡萄糖、生长因子250琼脂、生长因子0a.该实验采用的是液体培养基b该实验采用平板划线法接种c和对照,说明大肠杆菌的生长不需要生长因子d和对照,说明大肠杆菌的生长需要葡萄糖解析该培养基加入了琼脂,故为固体培养基,对微生物进行计数,宜采用稀释涂布平板法(而不是平板划线法)接种;稀释涂布平板法是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落,即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法,一个菌落代表一个单细胞;与对照,说明大肠杆菌生长需要葡萄糖,但不能证明是否需要生长因子;和对照,自变量是有无葡萄糖,说明大肠杆菌的生长需要碳源如葡萄糖。答案d二、非选择题(本大题共3小题,共52分)13(14分)(2014江西重点中学盟校联考)回答下列、小题。.传统发酵技术与现代生活依旧很贴近,下面是两则实例。(1)人类酿酒的历史已有5 000年,但是直到19世纪,法国的巴斯德才发现葡萄汁变酒是_(填微生物)的发酵作用。葡萄酒制作是否成功,发酵后需用_来鉴定,在_条件下,该物质与酒精反应呈现_色。(2)早在公元5世纪的北魏古籍中,就有关于腐乳生产工艺的记载。在腐乳制作过程中,有多种微生物参与了豆腐的发酵,其中起主要作用的是_。.生产实践中应用的菌种主要来自土壤,从土壤中分离微生物的实验流程如下:土壤取样选择培养梯度稀释鉴别培养。从土壤中分离纤维素分解菌,最好选择树林中多年落叶形成的腐殖土作为样品,使用的培养基应以_作为唯一碳源。在纤维素分解菌培养过程中,对培养基和接种环常采用的灭菌方法分别是_、_。解析.(1)酵母菌进行无氧呼吸产生酒精,酒精可使酸性条件下的重铬酸钾溶液变为灰绿色;(2)腐乳的制作过程中最重要的微生物是毛霉。.分离纤维素分解菌,应用选择培养基,培养基用纤维素为唯一碳源,微生物的培养过程中,培养基的灭菌通常用高压蒸汽灭菌,接种环进行灼烧灭菌。答案.(1)酵母菌重铬酸钾溶液酸性灰绿(2)毛霉.纤维素高压蒸汽灭菌灼烧灭菌14(18分)请回答下列有关微生物的一些问题。(1)微生物的分布:微生物主要分布在富含_的土壤表层;不同微生物对ph的要求不同,细菌常生活在酸碱度_的潮湿土壤中。(2)微生物的消毒和灭菌:在菊花组织培养中,对外植体常用酒精和_进行消毒。在微生物培养中,对培养基常用_方法进行灭菌。对于空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能_。如果要检测灭菌是否彻底,可以采用的方法是:_。(3)微生物的应用:在葡萄酒的自然发酵过程中,运用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌发酵产生酒精,请写出该过程的化学反应式:_。在果醋制作时,运用醋酸菌在_和糖源充足时,将糖分解成醋酸。(4)微生物的接种:微生物接种的方法很多,最常用的是_和_。(5)微生物的计数:根据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出细菌数目往往比实际的数目低,原因是_。(6)微生物的鉴定:为检测尿素分解菌的存在与否,在以尿素为唯一氮源的_(选择、鉴别)培养基中加入_指示剂,如果存在尿素分解菌,则指示剂将变_色。解析(1)微生物主要分布在有机质丰富的土壤表层,细菌常生活在酸碱度接近中性的潮湿土壤中。(2)植物组织培养时,对外植体常用酒精和氯化汞消毒,对培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌;紫外线能使蛋白质变性,还能损伤dna的结构;可通过在适宜的温度下放置灭菌过的培养基看其是否有菌落产生来确定培养基灭菌是否彻底。(3)醋酸菌为需氧型生物。(4)最常用的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。(5)因一个菌落可由多个连在一起的细菌形成,所以计算得出的细菌数一般低于实际数目。(6)用选择培养基筛选目的菌,加入酚红指示剂检测尿素分解菌,若存在尿素分解菌,指示剂变红色。答案(1)有机质接近中性(2)氯化汞高压蒸汽灭菌损伤dna的结构将灭菌过的培养基在适宜的温度下放置一段时间,观察培养基上是否有菌落产生(3)c6h12o62c2h5oh2co2能量有氧(4)平板划线法稀释涂布平板法(5)当两个或多个细菌连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落(6)选择酚红红15(20分)(2014河南开封质检)一种广泛使用的除草剂(含氮有机物)在土壤中不易被降解,长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明)。(1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行稀释处理。现有一升土壤浸出液,用无菌吸管吸取1 ml液样至盛有9 ml无菌水的试管中,依次稀释到103倍稀释度。各取0.1 ml已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养,记录的菌落数分别为55、56、57,则每升原土壤浸出液样中菌体数为_。(2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,从用途方面来看,上述培养皿中培养基的特点是_。(3)接种技术的核心是_。在划线接种时,连续划线的目的是将聚集的菌种逐步_,培养时,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是_或有氧条件抑制了这些细菌的生长。(4)在培养基上形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源主要是_,有透明带菌落利用的氮源主要是_,据此可筛选出目的菌。实验结果如下图显示的ae五种菌株中,_是最理想菌株。(5)科研人员用放射线处理该细菌获得两个突变株a和b,然后对突变株a和b进行实验,结果如下表所示:接种的菌种一般培养基实验处理及结果a不生长添加营养物质甲,能生长b不生长添加营养物质乙,能生长ab能生长不添加营养物质甲、乙就能生长突变株a不能在一般培养基上生长的原因是_。突变株a和b混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是_。解析(1)0.1 ml已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养,记录的菌落数分别为55、56、57,则菌落数的平均值是56,所以每升原土壤浸出液样中菌体数560.11031035.6108。(2)因为该除草剂含氮,所用的培养基用除草剂为唯一氮源有利于筛选目的菌。(3)接种过程中要防止其他杂菌的污染,以保证培养的目的菌的纯度,划线接种时,连续划线的目的是使单个细菌分离,以获得单个菌落,由于该培养基是选择用除草剂作氮源的细菌,所以大多数细菌在此培养基上不能繁殖或是厌氧菌受氧的抑制。(4)培养基上形成的菌落有的有透明带,有的无透明带,有透明带的是因为细菌利用了培养基中的成分即除草剂,无透明带的细菌则利用的是

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