高中生物 第一部分 实验2分离以尿素为氮源的微生物同步练测 浙科版选修1.doc

第一部分 实验2 分离以尿素为氮源的微生物 同步练测（浙科版选修1）建议用时实际用时满分实际得分45分钟100分4一、选择题(本题共10小题，每小题5分，共50分。)1.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基中大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出（ ）大肠杆菌 霉菌 放线菌 固氮菌a. b.c. d.2.下列能选择出分解尿素的微生物的培养基是（ ）a.nacl、k2hpo4、葡萄糖、尿素、琼脂糖、水、酚红b.nacl、k2hpo4、葡萄糖、琼脂糖、水、酚红c.nacl、k2hpo4、尿素、琼脂糖、水d.nacl、k2hpo4、牛肉膏、酵母提取物、琼脂糖、水3.用涂布分离法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，其中正确的是（ ）a.涂布了一个平板，统计的菌落数是230b.涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238c.涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163d.涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和256，取平均值2354.下列可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是（ ）a.向以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂b.向以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂c.向以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹试剂d.向以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂5.用来判断选择培养基是否起到了选择作用，需要设置的对照是（ ）a.未接种的选择培养基b.未接种的牛肉膏蛋白胨培养基c.接种了的牛肉膏蛋白胨培养基d.接种了的选择培养基6.在“分离以尿素为氮源的微生物的实验”中，土壤取样时最好选择以下哪种环境中的土壤做实验？（ ）a.街道旁b.有哺乳动物排泄物的地方c.建筑工地里d.菜园7.某同学在同一稀释浓度下做了四个平板进行实验，其中一个平板上的菌落数比其他三个平板上的菌落数明显增多，最可能的原因是（ ）a.此平板上营养物质比其他三个平板上营养物质丰富b.此平板被杂菌污染了c.此平板上的细菌发生了变异，生长快d.在涂布此平板时接种的菌体数多8.下列关于各种微生物及其培养、分离的叙述，错误的是（ ）a.大肠杆菌是原核生物，属革兰氏阳性菌，扩大培养时用lb液体培养基b.用划线分离法或涂布分离法分离细菌，其原理就是通过多次划线或均匀涂布，在培养基上产生由一个细菌繁殖而来的菌落c.细菌通常生长在偏碱性环境中，霉菌生长在偏酸性环境中，酵母菌的异化作用类型为兼性厌氧型d.nh3的存在使培养基的ph升高9.对表层土壤中自生固氮菌的分离主要采取的原理（方法）是（ ）a.依据自生固氮菌的生长繁殖不需要氮源b.依据不同微生物生长繁殖所需ph不同c.依据不同微生物生长繁殖所需温度不同d.依据不同微生物代谢类型不同10.（多选）在做分离分解尿素的细菌实验时，a同学从对应10-6的培养基中选择出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。下列有关叙述正确的是（ ）a.a同学出现这种结果的原因是土样不同b.可以将a同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染c.让其他同学用与a同学一样的土壤进行实验，如果结果与a同学一样，则可证明a同学无误d.b、c选项的实验思路都遵循了实验的对照原则二、非选择题（共2小题，共50分。）11.（25分）农业生产研究上，常需要进行微生物的培养和计数。请回答下列问题。（1）下图是利用 法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步 分散到培养基的表面，为达到这一目的，操作上应注意（至少答2项） 。（2）分析下面培养基的配方：nano3、kh2po4、na2hpo4、mgso47h2o、kcl、h2o。若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述 成分，并加入葡萄糖和 。（3）三位同学用涂布分离法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下统计结果：甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248。乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是210、240和250，取平均值233。丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163。在三位同学的统计中，只有一位同学的统计是正确的，指出另两位同学的统计为什么不正确？12.（25分）实验原理：农田的表层土壤中自生固氮菌的含量比较多。将用表土制成的稀泥浆接种到无氮培养基上进行培养，在这种情况下，只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法可以将自生固氮菌与其他细菌分离开来。材料用具：农田的表层土壤、无氮培养基、lb液体培养基、盛9 ml无菌水的大试管若干、无菌移液管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90 ml无菌水的三角瓶、酒精灯、恒温箱。方法步骤：（1）倒平板。分别将无氮培养基、lb液体培养基倒平板，应在 操作。（2）制备土壤稀释液。取土样10 g加入盛有90 ml无菌水的三角瓶中，充分摇匀。用无菌移液管吸取上清液1 ml，转至盛9 ml无菌水的大试管中，依次稀释到107倍稀释液。为实现无菌操作，试管口和移液管应在离火焰 cm处。（3）涂布。按照103107倍稀释度的顺序分别吸取0.1 ml进行平板涂布，每个稀释度下，无氮培养基应至少涂布 个平板，lb培养基涂布 个平板。（4）培养。放入恒温箱内，在适宜温度条件下培养34 d。一般每隔 h统计一次，选取 时的记录作为结果，这样可以防止 。（5）细菌的计数。如果测试的平均值为50，则每克样品中的菌落数是 （稀释度为105倍）。（6）预期结果。相同稀释度下，lb培养基平板上的菌落数目 （填“多于”或“少于”）无氮培养基上的，理由是 。 参考答案1.b 解析：固氮微生物的生长不需要从培养基中获得氮源，可在缺乏氮源的培养基上正常生长；加入青霉素的培养基上不能生长细菌和放线菌，可分离出霉菌和酵母菌；加入酚的培养基使细菌和霉菌不能正常生长，而放线菌却能利用酚作原料合成自身产物。2.a 解析：能合成脲酶的微生物才能分解尿素，选择的原则是只有能够利用尿素的微生物才能够生长。该选择培养基应只含尿素一种氮源，同时还必须含有满足该类微生物生长需要的碳源（葡萄糖）。3.d 解析：在设计实验时，一定要涂布至少三个平板，作为重复组，才能增强实验结果的说服力与准确性，所以a、b两项不正确。c项虽涂布了三个平板，但是其中一个平板的计数结果与另两个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，因此，不能简单地用三个平板的计数值来求平均值。4.a 解析：向以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养某种细菌后，如果ph升高，指示剂将变红，我们就可以准确鉴定该种细菌能够分解尿素。5.c 解析：将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的菌落数目，因此，应选择牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。对照遵循的原则是单一变量原则。6.b 解析：哺乳动物的排泄物中含有大量尿素7.b 解析：此题的题眼在于“明显增多”和“最可能”。按正确的操作顺序在同一个稀释浓度下涂布4个平板时接种的菌体数不会相差很大，所以d项错误。按科学性的实验原则，接种四个平板时所用的培养基应该是一样的，不应该出现营养物质丰富程度不一样的情况，所以a项错误。另外生物变异的频率也很低，所以c项错误。由于细菌无处不在，最大的可能是由于操作不正确，此平板被杂菌污染，导致菌落数明显增多。8.a 解析：大肠杆菌属于革兰氏阴性菌。9.a 解析：本题考查培养基的选择性、微生物的生长发育特点和影响微生物正常生长的因素。影响微生物生长的因素有多种，除培养基的营养外还有温度、ph、氧等。在无氮培养基上只有自生固氮菌能正常生长繁殖。10.bc 解析：a同学出现这种结果的可能原因有两种：一是由于土样中微生物多或繁殖能力强；二是由于培养基受到杂菌污染或操作过程失误造成杂菌污染。若要验证培养基是否受污染，应将培养基在不加土样的情况下进行培养，如果出现菌落，说明培养基受到污染，反之，培养基没有受到污染。若要证明是由于土壤本身的因素造成的，就让其他同学用与a同学一样的土壤进行实验，如果结果与a同学一致，则可以证明a同学无误。b选项的实验思路遵循了实验的对照原则，则c选项的实验思路没有遵循实验的对照原则。11.（1）划线分离 稀释 每次划线前要灼烧接种环；接种环冷却后从上一区划线末端开始划；首尾区不重叠（写出2项即可） （2）nano3 尿素 （3）甲同学只涂布了两个平板，实验数据说服力不够；丙同学其中一个平板的计数结果与另两个相差太远，说明操作过程出现错误，数据缺乏正确性。解析：（1）图示平板接种为划线分离法，在划线时要注意保证每次划线后接种环要灼烧灭菌，保证冷却后再从上一区末端开始划线，保证划线的首尾不能重合。（2）分解尿素的细菌的培养，必须在含有尿素的培养基中进行，尿素是该培养基的唯一氮源，因此培养基成分中应去掉nano3，添加葡萄糖和尿素。（3）在微生物分离计数时，需要有适宜的稀释度、适量的菌落及适量的平板数，以求得每个平板上菌落数的平均值来计算培养液中的菌体数目。因此，甲同学只涂两个平板，数目过少，实验数据说服力差；丙同学的三个平板中，同一稀释度的培养物中，有一个平板的计数结果与其他平板相差太大，说明操作过程中有失误，使实验数据缺少科学性。12.（1）酒精灯火焰旁 （2）12 （3）3 1 （4）24 菌落数目稳定