现代分离技术天然活性成分的层析纯化策略ppt课件

天然活性成分的层析纯化策略 1 层析方法 正相硅胶优点 经济 可常压操作 加压可提高效率局限性 不可逆吸附 使用大量有害有机溶剂 国产硅胶验证文件不健全 2 层析方法 反相硅胶优点 常用于检测 少量制备 有硅胶基架的C4 C8 C18以及聚苯乙烯基架的SOURCE介质多种选择 分辨率高 局限性 成本高 介质昂贵 放大生产困难 3 层析方法 大孔树脂优点 常用于组分粗提 流速快 经济 吸附少局限性 选择性少 验证文件不健全 合成原料及溶剂残留问题 缺乏公认统一的药用标准 条件的规范化 重现性 4 层析方法 聚酰胺优点 多用于提纯黄酮 内酯类成分局限性 流速慢 验证文件不健全 5 层析方法 超临界萃取优点 快速 回收率高 CO2成本低 无需处理有机溶剂局限性 设备成本高 强极性物质提取受限制 6 层析方法 葡聚糖凝胶优点 适合含羟基 氨基 羧基 芳香环的苷类 黄酮 多酚 丹宁等 可多次使用局限性 流速慢 比硅胶更适合亲水性物质 可与硅胶为互补技术 7 层析方法 离子交换优点 适合生物碱 有机酸等的分离 有些阴离子交换介质也适合苷类 皂苷 黄酮纯化 可多次使用局限性 受制于带电荷物质 8 纯化平台 生物碱平台技术 PH3的酸水提取 阳离子交换SPSepharoseHP 中 高压硅胶反相生物碱带碱性 在传统的硅胶或氧化铝层析上效果往往不理想 SPSepharoseHP载量高 易于直接放大 对生物碱有特殊的选择性 可从酸水粗提物中分离结构近似的十几种生物碱 一步纯化可达60 80 的纯度 9 纯化平台 生物碱中 高压反相层析如Source15RPC或C18硅胶可将纯度提高到90 以上 Source是以聚苯乙烯为基架的反相介质 可耐受1M强酸强碱 比传统的如反相介质使用范围更宽广 寿命更长 10 纯化平台 有机酸平台技术 PH11的碱水提取 阴离子交换QSepharoseHP或SephadexLH20 中 高压硅胶反相有机酸多成盐 亲水性强 带负电荷 经QSepharoseHP一步纯化可达50 纯度 然后再上SephadexLH20可至90 以上 11 纯化平台 皂苷类平台技术 PH11的碱水提取 阴离子交换QSepharoseHP 中 高压硅胶反相皂苷同时具有强极性的糖基和弱极性的母核 皂苷含羧基 12 纯化平台 黄酮苷类平台技术 水和醇提取 阴离子交换QSepharoseFF去色素 SephadexLH20 中 高压硅胶反相QSepharoseFF是去处植物色素的有效方法 可对提取物进行第一步纯化 SephadexLH20适合精细纯化 13 纯化平台 黄酮 醌 多酚类平台技术 水和醇提取 SephadexLH20 中 高压硅胶反相SephadexLH20 14 纯化平台 内酯 萜类平台技术 水和醇提取 中 高压硅胶反相管道化的加压硅胶层析可在密闭的环境下操作 大大提高生产速度 重复性 安全性 可控性 15 纯化平台 蛋白质 活性肽 动物毒素平台技术 Sepharose离子交换 Superdex Sephacryl分子筛层析 Source 反相层析蛋白类物质在纯化时需留意保持其空间结构 避免失活 所以一般采取温和的离子交换和分子筛层析 寡肽分子则可使用反相层析 16 纯化平台 多糖平台技术 水 醇提取 穿透式Sepharose离子交换脱蛋白 Superdex200 Sephacryl300 1000分子筛层析一种药材里可以含有多种类型的多糖 其结构 性质 功效不一 如香菇中含有水溶性 酸溶性 碱溶性多糖 综合利用分子