低聚木糖企业标准09年版.doc

Q/CLL 0001S-2009 Q/CLL山东龙力生物科技股份有限公司企业标准山东龙力生物科技股份有限公司 发布09-11-16实施09-11-06发布低聚木糖 Q/CLL 0001S-2009 10前 言本标准全文强制。根据中华人民共和国食品安全法、食品安全企业标准备案办法制定本标准。本标准严格按照GB/T 1.1标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则的要求进行编写。本标准由山东龙力生物科技股份有限公司提出。本标准起草单位：山东龙力生物科技股份有限公司。本标准主要起草人：白庆林、肖林。本标准自发布之日起有效期3年，到期应复审。低聚木糖1 范围本标准规定了低聚木糖（木寡糖）的术语和定义、技术要求、生产加工过程的卫生要求、检验方法检验规则、标志、包装、运输和贮存。本标准适用于以玉米芯粉为原料，经木聚糖酶酶解精制而成的低聚木糖（木寡糖）。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 191 包装储运图示标志GB 1897 食品添加剂 盐酸GB/T 4456 包装聚乙烯吹塑薄膜GB/T 4789.2 食品卫生微生物学检验 菌落总数测定GB/T 4789.3 食品卫生微生物学检验 大肠菌群测定GB/T 4789.4 食品卫生微生物学检验 沙门氏菌测定GB/T 4789.5 食品卫生微生物学检验 志贺氏菌群测定GB/T 4789.10 食品卫生微生物学检验 金黄色葡萄球菌测定GB/T 4789.11 食品卫生微生物学检验 溶血性链球菌检验GB/T 4789.15 食品卫生微生物学检验 霉菌和酵母计数GB/T 5009.4 食品中灰分的测定GB/T 5009.11 食品中总砷及无机砷的测定GB/T 5009.12 食品中总铅的测定GB/T 5009.13 食品中铜的测定GB 5175 食品添加剂氢氧化钠GB 5749 生活饮用水卫生标准GB 7718 预包装食品标签通则GB 9683 复合食品包装袋卫生标准GB 13508 聚乙烯吹塑桶标准GB/T 13803.3 糖用活性炭GB 14881 食品企业通用卫生规范GB 15203 淀粉糖卫生标准GB/T 20884 麦芽糊精GB/T 20885 葡萄糖浆QB/T 2984 低聚木糖JJF 1070 定量包装商品净含量计量检验规则Q/12KF3569.158 木聚糖酶BZ-YFL-10/02 玉米芯粉国家质量监督检验检疫总局第75号令定量包装商品计量监督管理办法3 术语和定义3.1下列术语和定义适用于本标准。低聚木糖（xylo-oligosaccharide,XOS）由27个木糖分子以-1,4-糖苷键连接，并以木二糖、木三糖、木四糖等为主要成分的混合物。 3.2符号下列符号适用于本标准 符号 代表物名称 XOS 低聚木糖 XOS2-7 低聚木二糖-低聚木七糖 XOS2-4 低聚木二糖-低聚木四糖 XOS2 低聚木二糖 XOS3 低聚木三糖 XOS4 低聚木四糖 XOS5 低聚木五糖 XOS6 低聚木六糖 XOS7 低聚木七糖3.3 产品分类3.3.1按形态分为：糖浆(L型)和糖粉(P型)。3.3.2 按XOS含量分：XOS-70型：XOS2-770%(以干基计)；XOS2-450%(以干基计)。XOS-95型：XOS2-795%(以干基计)；XOS2-465%(以干基计)。XOS-35型：XOS2-735%(以干基计)。XOS-20型：XOS2-720%(以干基计)。4 技术要求4.1辅料要求4.1.1玉米芯粉：应符合BZ-YFL-10/02的规定；4.1.2糖用活性炭：应符合GB/T 13803.3的规定；4.1.3盐酸：应符合GB 1897的规定；4.1.4 氢氧化钠：应符合GB 5175的规定；4.1.5木聚糖酶：应符合Q/12KF3569.158的规定；4.1.6麦芽糊精：应符合GB/T 20884的规定；4.1.7生活饮用水：应符合GB 5749的规定。4.2生产工艺 粉碎好的玉米芯粉调浆高压蒸煮糖化精制低聚木糖糖浆加一定量的赋形剂喷雾干燥低聚木糖糖粉包装检验入库。4.3感官指标 感官指标应符合表1的规定。表1 感官指标项 目糖 浆糖 粉外 观呈粘稠状透明液体，无肉眼可见杂质粉末，无肉眼可见杂质色 泽浅黄色白色或微黄色滋 味味甜，无异味 气 味具有本品特有的气味，无异味4.4理化指标理化指标应符合表2 的规定。表2 理化指标项 目XOS-95型XOS-70型XOS-35型XOS-20型糖粉糖浆糖粉糖浆糖粉糖粉干物质(固形物) % /7075/7075/水分，% 5.0/5.0/6.06.0灰分，% 0.30.30.30.30.30.3透射比，% /70/70/pH3.56.53.56.53.56.53.56.53.56.53.56.5XOS2-7含量（以干基计）g/100g， 95.095.070.070.035.020.0XOS2-4含量（以干基计）g/100g， 65.065.050.050.0砷（以As计），mg/kg 0.30.30.30.30.30.3铅（以Pb计），mg/kg 0.50.50.50.50.50.5铜(以Cu计)，mg/kg 5.05.05.05.05.05.04.5微生物指标微生物指标应符合表3规定。表3 微生物指标项 目指 标菌落总数（CFU/g或mL） 1000大肠菌群（MPN/100g或mL） 30酵母菌（cfu/g或mL） 25霉菌（cfu/g或mL） 25致病菌（沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌）不得检出4.6净含量按定量包装商品计量监督管理办法的要求执行。5 生产加工过程的卫生要求应符合GB 14881食品企业通用卫生规范的要求。6 检验方法6.1感观指标6.1.1外观 、色泽 取样品约100g或100mL于无色洁净的样品杯（或200mL烧杯）中，在自然光线下，用肉眼观察样品的颜色和形态、有无杂质，并做好记录。6.1.2 气味取样品20g或20mL，放入100mL磨口瓶中，加入80的水50mL,加盖，震摇30s，嗅其气味，并做好记录。6.1.3 滋味清水漱口后，取少量样品放入口中，仔细品尝，并做好记录。6.2 理化指标6.2.1 干物质(固形物)6.2.1.1第一法：阿贝折光仪法(仲裁法)6.2.1.1.1仪器-阿贝折射仪：精度0.0001-恒温水浴：精度0.1-玻璃棒：末端弯曲扁平6.2.1.1.2仪器校正在20时，以重蒸蒸馏水校正折射仪的折光率为1.3330，相当于干物质(固形物)含量为零。仪器使用当天至少校正一次。6.2.1.1.3分析步骤将折射仪放置在光线充足的位置，与恒温水浴连接，将折射仪棱镜的温度调节至20,分开两面棱镜，用玻璃棒加少量样品1-2滴于固定的棱镜面上（玻璃棒不应接触棱镜面，且涂样时间应少于2s），立即闭合棱镜停留几分钟，使样品达到棱镜的温度。调节棱镜的螺旋直至视场分为明暗两部分，转动补偿器旋钮，削除虹彩并使明暗分界线清晰，继续调节螺旋使明暗分界线对准在十字线上，从标尺上读取干物质的质量分数，洗净并擦干两个棱镜。将同一样品按上述方法进行第二次测定。取两次读数的算术平均值为测定值。结果表示至一位小数。6.2.1.2第二法：手持式糖量计法6.2.1.2.1仪器-手持式糖量计，精度0.1；-玻璃棒：末端弯曲扁平6.2.1.2.2仪器校正将手持式糖量计放置在光线充足的位置，分开两面棱镜，用玻璃棒加少量重蒸蒸馏水13滴于固定的洁净干燥的棱镜面上(玻璃棒不要和棱镜接触，并避免形成气泡)，立即闭合棱镜，停留几秒钟，使样品达到棱镜温度，调节棱镜的螺旋至视野的明暗分界刻度线至零刻度。6.2.1.2.3分析步骤取13滴样品，同仪器校正的操作步骤一样，从标尺上读取干物质的质量分数，洗净并擦干两个棱镜。将同一样品按上述方法进行第二测定。取两次读数的算术平均值为测定值。结果表示至一位小数。6.2.2水分按GB/T 20884规定的方法测定。6.2.3灰分按GB/T 5009.4规定的方法测定。6.2.4透射比 按GB/T 20885规定的方法测定。测定时，除将波长改为420nm外，其他操作不变。6.2.5 pH糖粉样品：按20884规定的方法测定。糖浆样品：按GB/T 20885规定的方法测定。测定时，除将样品配制成含10%干物质的待测液外，其他操作不变。6.2.6 XOS含量（HPLC法）按附录A规定的方法测定。6.2.7砷按GB/T 5009.11规定的方法测定。6.2.8铅按GB/T 5009.12规定的方法测定。6.2.9 铜 按GB/T 5009.13规定的方法测定。6.3 微生物指标6.3.1菌落总数按GB/T 4789.2规定的方法测定。6.3.2大肠菌群按GB/T 4789.3规定的方法测定。6.3.3霉菌和酵母按GB/T 4789.15规定的方法测定。6.3.4致病菌按GB/T 4789.4、GB/T 4789.5、GB/T 4789.10、GB/T 4789.11规定的方法测定。6.4 净含量按JJF1070测定。7 检验规则7.1组批与抽样7.1.1组批：以最后一道工序能均匀混合一起而后包装的一批成品，为一个生产批号。7.1.2抽样：按每一个生产批号为基础进行抽取样品，以代表该批号的产品质量。每批按总包装量的10%进行抽样，取样总量不少于400g。分三份：一份理化检验，一份微生物检验，一份留样备查。7.2出厂检验7.2.1产品出厂前应由质量检验部门逐批检验，签发合格证后方可出厂。7.2.2糖浆产品出厂检验项目包括：感官要求，干物质（固形物）、透射比、pH、XOS2-7含量、XOS2-4含量、灰分、菌落总数、大肠菌群、霉菌、酵母菌每批必检；重金属指标至少每季度抽检一次，致病菌指标每年外检两次。7.2.3糖粉产品出厂检验项目：感官要求、水分、pH、XOS2-7含量、XOS2-4含量、灰分、菌落总数、大肠菌群、霉菌、酵母菌每批必检；重金属指标至少每季度抽检一次，致病菌指标每年外检两次。7.2.4 每批产品经厂质检部检验合格，并附有合格证后方可出厂。7.3型式检验7.3.1一般情况下, 型式检验每半年进行一次,有下列情况之一者,必须进行。a)更改主要原辅材料；b)更改关键工艺和设备；c)产品停产半年后，恢复生产时；d)国家质监机构和用户提出检验要求时。7.3.2型式检验为要求中全部项目。7.4判定规则感官指标、理化指标经检验，若有一项不符合标准要求，应重新加倍抽样进行复检，复检后该项仍不符合标准要求，则判该批为不合格品；微生物指标若有一项不符合标准要求，则判该批为不合格品,并不得复检，不合格品不许出厂。8标志、包装、运输和贮存8.1 标志8.1.1供直接食用的预包装产品标签应符合GB 7718的规定。8.1.2作为食品原辅料用的产品，包装容器外应标注：产品名称、生产厂名称、厂址、净含量、生产日期、批号、保质期、执行标准号编号。8.1.3包装储运图示标志应符合GB/T 191的规定。外销产品按合同执行。8.2 包装8.2.1糖浆产品：包装容器(瓶、桶)应符合GB 13508 聚乙烯吹塑桶标准的要求。8.2.2糖粉产品：内包装采用聚乙烯塑料袋应符合GB 4456要求；外包装可采用塑料编织袋或双层牛皮纸袋，应符合GB 9683的要求，产品的包装应袋质结实，标签清晰整洁，袋口密封，能保证在装卸、运输和贮存过程中无破露现象。8.3 运输8.3.1运输工具应清洁、无异味、运输装卸搬运过程中应注意轻装、轻卸、防雨、防晒。严禁摔、砸、磕、碰。8.3.2运输过程中避免和有毒、有害、有腐蚀性物质及其污染物质混放、混运。8.4 贮存 本品应于阴凉干燥处贮存。糖浆保质期12个月，糖粉保质期24个月（若原包装分次使用，用完及时密封，防止吸潮结块）。附录A （规范性附录）低聚木糖含量的测定A.1 范围本方法规定了低聚木糖产品中低聚木糖含量的测定方法。本方法适用于以玉米芯粉为原料，经木聚糖酶酶解精制而成的低聚木糖产品中低聚木糖含量的测定。A.2 原理同一时刻进入色谱柱的各组分，由于在流动相和固定相之间溶解、吸附、渗透或离子交换等作用的不同，随流动相在色谱柱两相之间进行反复多次的分配，由于各组分在色谱柱中的移动速度不同，经过一定长度的色谱柱后，彼此分离开，按顺序流出色谱柱，进入信号检测器，在记录仪上或数据装置上显示出各组分的谱峰数值，根据保留时间对照定性，依据峰面积以木糖为参考计算各种糖组分的含量。A.3 仪器设备-高效液相色谱仪：配有示差折光检测器和柱温箱；-色谱柱：SHodex sugar KS-802 内径8mm，柱长300mm，填料粒度6m的离子型凝胶柱，或其他具有同等分析效果的色谱柱；（7725i）进样阀（20ul定量管）；-流动相脱气装置：超声波清洗器；-过滤膜：0.45m；-分析天平：感量0.0001g；A.4试剂和溶液-超纯水：用0.45m 水相膜过滤，并脱气1520min；-木糖溶液：称取木糖标准品(含量99.5%)0.1g(精确至0.0001g)，用超纯水溶解并定容至50mL，此溶液浓度为2mg/mL；- XOS2、XOS3、XOS4、XOS5、XOS6、XOS7溶液：分别称取各标准品(含量95%)0.02g(精确至0.0001g)，用超纯水溶解并定容至10mL，此溶液浓度分别为2mg/mL；-葡萄糖、阿拉伯糖溶液：分别称取各标准品(含量95%)0.5g(精确至0.0001g)，用超纯水溶解并定容至50mL，此溶液浓度分别为10 mg/mL；-无水乙醇。A.5分析步骤A.5.1样液制备A.5.1.1 XOS-70L/95L/95P样品：称取样品约0.5g(精确至0.0001g)，用超纯水溶解并定容至50mL。A.5.1.2 XOS-70P样品：称取粉状样品0.51.0g(精确至0.0001g)于50mL小烧杯中，加入10.0mL水，分两次洗涤烧杯，均转入V（50.0mL）容量瓶中，最后用无水乙醇定容至刻度，摇匀。静置分离，取上层清液5.0mL于一小烧杯中80蒸干，最后加水5.0mL溶解样品，摇匀。A.5.2色谱条件流动相为超纯水。在测定的前一天接通示差折光检测器电源，预热稳定(45)，安上色谱柱，调柱温至80，以0.1mL/min的流速通入流动相平衡过夜。正式进样分析前，将所用流动相输入参比池20min以上，再恢复正常流路使流动相经过样品池，调节流速至0.6mL/min，走基线，待基线走稳后即可进样，进样量为20L。A.5.3样品测定 样液和标准溶液均用 0.45m水相膜过滤后上机测定。样品中各种糖组分的色谱峰根据对应的标准品出峰时间进行定性。A.5.4 结果计算结果计算依据样品中各组分的峰面积与木糖标准溶液的浓度及对应峰面积相比，再以对应的校正因子来计算样品中各组分的含量。样品中的XOS2-7含量以g/100g表示，按公式(1)计算: A2F1+( A3+A4+A5+A6+A7) F2 CV X2-7= 100 (1) A1m1000样品中的XOS2-4含量以g/100g表示，按公式(2)计算： A2F1+( A3+A4) F2 CV X2-4= 100 (2) A1m1000式中: X2-7样品中的低聚木糖(木二糖-木七糖)，g/100g；X2-4样品中的低聚木糖(木二糖-木四糖)，g/100g；A2样品色谱图中木二糖的峰面积；A3样品色谱图中木三糖的峰面积；A4样品色谱图中木四糖的峰面积；A5样品色谱图中木五糖的峰面积；A6样品色谱图中木六糖的峰面积；A7样品色谱图中木七糖的峰面积；A1木糖标准色谱图中木糖峰面积；C木糖标准溶液浓度，单位为mg/mL；F1将木糖作为1，XOS2二糖换算系数为0.93；F2将木糖作为1，XOS3以上换算系数为0.94；V溶解样品总体积，单位为毫升(mL)；m样品的质量(以干基计),单位为克(g)；计算结果表示至一位小数。A.5.5精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值应不超过算术平均值的1%。A.5.6 XOS-35P/20P测定原理本规格产品配方工艺中添加了较大比例的麦芽糊精为赋形剂，根据两种组成成分的分子结构特点，麦芽糊精的分子结构最小组成单元为葡萄糖，低聚木糖的分子结构单元为木糖，通过硫酸水解法处理样品可以避免凝胶柱直接进样方法出现的干扰物叠峰现象，利用HPLC定量测定处理前样品中的木糖含量和样品经硫酸水解处理后样品中的木糖含量，二者之差即得到样品中低聚木糖含量。 A.5.6.1 试剂和溶液 木糖，纯度应为99.5%以上。 硫酸（98%），分析纯。 氢氧化钠（固体），分析纯。 质量分数为12%稀硫酸溶液：称取14.0 g硫酸（精确至0.1g），加入到100 mL蒸馏水中，混匀。质量分数为10%氢氧化钠溶液：称取10.0 g氢氧化钠溶于90 mL蒸馏水中，混匀。 木糖标准溶液：准确称取0.40g木糖（精确到0.0001 g），用超纯水溶解，并定容至100ml，摇匀。然后分别吸取此溶液用超纯水配制成木糖浓度分别为0.10、0.50 、1.00 、2.00、4.00 g/L的系列标准溶液。A.5.6.2 仪器和设备 超声波水浴。 超纯水装置。 高效液相色谱仪（带示差折光检测器）。A.5.6.3 分析步骤A.5.6.3.1试样溶液1的制备准确称取绝干试样(1051下烘5h)2.0 g（精确至0.0002 g），在501 恒温水浴条件下以80 mL超纯水充分溶解后，转入100 mL容量瓶中，冷却至室温，用超纯水定容至刻度，混匀，于3000 r/min的条件下离心10 min后得试样溶液1。取少量试样溶液1于10000 r/min的条件下离心10min后得到上清液，用0.45 m滤膜过滤上清液，供高效液相色谱仪分析。A.5.6.3.2试样溶液2的制备准确吸取10 mL试样溶液1，置于100 mL三角瓶中，加入质量分数为12%硫酸溶液10 mL，加盖封口膜，于100下反应90min后冷却至室温，用质量分数为10%的氢氧化钠溶液中和水解液至pH 67，转入50 mL容量瓶，用超纯水定容至刻度，混匀后得试样溶液2。取少量试样溶液2于10000 r/min的条件下离心10 min得到上清液，用0.45 m滤膜过滤，供高效液相色谱仪分析。A.5.6.3.3 色谱条件色谱柱预柱：氢离子型阳离子交换树脂柱，聚苯乙烯二乙烯苯树脂填装，长30 mm，内径4.6 mm，粒度9m，交联度8%，pH 13；色谱柱：聚苯乙烯二乙烯苯树脂