色层分离法课件.doc

呼和浩特职业学院教师教案2012-2013学年第一学期课程名称：化学分离法教师姓名：李静授课专业：11级工业分析与检验授课时间：2012年10月30号课题色层分离法教学目标基础知识色层分离法的分类及其概念，基本技能能够灵活熟练地运用纸层析操作技术教学重点纸层析法的具体操作教学难点纸层析法的基本原理教学过程层析技术(chromatography 色谱技术)发展史：层析分离技术在20世纪初就已得到应用： 1903年用于植物色素的分离； 1931年用氧化铝柱分离了胡萝卜素的两种同分异构体； 1944年出现了以滤纸作为支持物的纸层析； 20世纪六十年代末出现了高效液相色谱(HPLC) 层析技术， (chromatography 色谱技术)定义：是利用被分离的混合物中各组分的理化性质（分子的形状和大小、分子极性、吸附力、分子亲和力、分配系数等）的不同，使各组分以不同程度在流动相和固定相中进行分配，最终达到分离目的。层析技术的分类l 1、按流动相的状态分类： （1）液相层析（色谱） （2）气相层析（色谱）；l 2、按固定相的使用形式分类： （1）柱层析(CC)（2）纸层析(PC)（3）薄层层析(TLC)；l 3、按分离过程所主要依据的物理化学性质分类： （1）吸附层析 （2）分配层析 （3）离子交换层析 （4）凝胶层析 纸层析 纸上层析是利用混和物中各组分在固定相和流动相中的溶解度不同而达到分离目的。在纸色谱分离过程中，由于滤纸纤维素的毛细管现象，使得溶剂在纸上渗透展开 。操作要点1.样品处理l 试样的溶解 l 固体样 尽量避免用水。一般用乙醇、丙酮、氯仿等，最好采用与展开剂极性相似的溶剂。l 液体样 直接点样。2.点样a先用铅笔在距纸条一端2 3 cm处划一条直线（起始线）并在线上隔一定距离划一“x”号表示点样位置；b.点样工具：定性分析可用普通毛细管，定量分析需用微量注射器；每次点样的位置应完全重合，否则会出现斑点畸形现象。 C点样方法：用点样工具吸取试液轻轻与“x”号接触，使点样的斑点直径为0.2 0.5 cm, 每次点样后，以冷风吹干；d. 干后，将纸的两边用线缝好，以圆筒形式置于层析缸中展开。3.平衡 展开以前先将滤纸与层析缸用配好的溶液系统的蒸汽来饱和，这个过程称之为“平衡”。4.展层 平衡结束后，将滤纸靠样品点的一端浸入溶剂中，展开开始：溶剂液面距原线距离约1cm，展开结束：当溶剂前沿到达滤纸另一端0.5-1cm处时，取出滤纸，在溶剂前沿处做一标记，晾干或用冷风吹干。 （1）上行法 将滤纸点样的一端向下浸入溶剂中，溶剂因毛细管引力的作用从下向上流动。 优点：操作简单，重现性好，是最常用的展开方法， 缺点：展开时间较长。 (2) 下行法：在层析缸上部有一盛展开剂的液槽，将滤纸点样的一端朝上浸入槽中，溶剂主要靠重力作用自上而下流动。优点：展开速度快缺点：重现性较差，斑点易扩散。5.显色 a有色物：直接观察各个色斑b无色物：物理法显色：用紫外灯照，观察有无吸收或发出各种不同 颜的荧光斑点，用铅笔画下斑点的位置及大小。化学法显色：利用各种物质的特性反应，喷洒适当的显色剂。6.定性分析 Rf 原点到溶剂前沿的距离 原点到层析斑点中心的距离| 各种化合物的值Rf随结构、滤纸的种类、展开剂、温度等的不同而异。| 但上述条件