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第四章 生物化学与分子生物学技术实践第一节 生物成分的分离与测定技术(时间:30分钟满分:50分)考查知识点及角度难度及题号基础中档稍难蛋白质的分离与提取1、2、35植物芳香油酶提取467分裂过程中染色体、dna变化537一、选择题(共4小题,每小题5分,共20分)1在分离蛋白质时,一定要加入缓冲溶液,其作用主要是 ()。a使酶的活性最高 b使蛋白质的活性最高c维持蛋白质所带的电荷 d使蛋白质带上电荷解析加缓冲溶液的目的是维持蛋白质所带电荷不发生改变,而不是使蛋白质带上电荷。答案c2蛋白质提取和分离纯化分的正确顺序是 ()。组织破碎抽提分离纯化对粗提取物离心 细胞破碎a bc d答案a3下列关于血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的说法中,不正确的是 ()。a加滤纸桥时,待滤纸条湿润后,要驱除气泡,以便使滤纸紧贴于支架上b浸泡薄膜时要识别出光泽面,并做记号c平悬薄膜时,有记号的一面朝上d从染色液中取出薄膜后,用滤纸条压平并吸干,再浸入透明液中脱色解析薄膜染色后要先放入漂洗液中漂洗直至蛋白质区底色脱净,然后才用透明液脱色。答案d4在水蒸气蒸馏装置中,从进水口通入水的作用是 ()。a加热 b防止过度沸腾c过滤 d冷凝解析在使用水蒸气蒸馏法提取植物芳香油时,需要用到蒸馏装置,在装置中,进、出水口之间水是不断流动的,以降低装置温度,使水蒸气与芳香油混合物冷却成为液体,便于分离。答案d二、非选择题(共30分)5(6分)试回答下列“蛋白质提取与分离实验”和“叶绿体中色素提取和分离实验”的有关问题。(1)为了提取和分离血红蛋白,首先对红细胞进行洗涤以去除杂质蛋白,洗涤时应使用生理盐水而不使用蒸馏水的原因是_。(2)若要去除血清蛋白中的小分子杂质,采用图1装置。透析液是_,一段时间后,若向烧杯中加入双缩脲试剂,透析袋内溶液是否出现紫色?并说明判断的依据:_。(3)图2、图3分别表示电泳法分离蛋白质和纸层析法分离叶绿体中色素的结果。不同蛋白质得以分离是因为_;不同色素得以分离是因为_。条带c呈_色。解析在洗涤红细胞时,应当使用生理盐水,以维持红细胞正常的形态。利用透析法除去血清蛋白中的小分子杂质过程中,透析液应为磷酸缓冲液,以维持蛋白质的结构,防止蛋白质变性失活。由于双缩脲试剂为小分子物质,能通过半透膜进入袋内,所以能与血清蛋白结合生成紫色物质。电泳法分离蛋白质的原理是不同蛋白质所带电荷性质、分子大小不同,导致电泳时迁移速度不同。图示中条带c为叶绿素b,呈黄绿色。答案(1)防止红细胞吸水破裂(2)(磷酸)缓冲液出现紫色。双缩脲试剂可以透过半透膜,与袋内血清蛋白反应,生成紫色物质(3)不同蛋白质所带电荷性质、分子大小和形状不同,导致电泳时迁移速度不同不同色素在层析液中溶解度不同,导致层析时扩散速度不同黄绿6(12分)(全国新课标)下列是与芳香油提取相关的问题,请回答问题。(1)玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取,其理由是玫瑰精油具有_的性质。蒸馏时收集的蒸馏液_(是、不是)纯的玫瑰精油,原因是_。(2)当蒸馏瓶中的水和原料量一定时,蒸馏过程中,影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和_。当原料量等其他条件一定时,提取量随蒸馏时间的变化趋势是_。(3)如果蒸馏过程中不进行冷却,则精油提取量会_,原因是_。(4)密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好存放在温度_的地方,目的是_。(5)某植物花中清油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如图所示。提取精油时采摘花的最合适时间为_d左右。(6)从薄荷叶中提取薄荷油时_(能、不能)采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法,理由是_。解析(1)由于玫瑰精油的化学性质稳定(耐一定程度高温)、易挥发(水蒸气可以将精油携带出来)、难溶于水(冷却后油水会重新分层),所以玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取。(2)当水和原料量一定时,影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和蒸馏温度,在一定的时间内随着蒸馏时间的延长提取量不断增加,一定时间后不再增加。如果蒸馏温度过高,提取量也会减少。(3)如果蒸馏过程中不进行冷却,部分精油会随水蒸气挥发,则精油提取量会下降。(4)玫瑰精油具有发挥性,瓶装精油时若密封不严,需要低温保存,以减少挥发。(5)分析图示可知,在该植物花的蓓蕾期与开放期之间(即a时期)精油含量最高。(6)由于薄荷油与玫瑰精油的化学性质相似,易挥发、难溶于水、化学性质稳定,故可以用水蒸气蒸馏法提取。答案(1)易挥发、难溶于水、化学性质稳定不是玫瑰精油随水蒸气一起蒸馏出来,所得到的是油水混合物(2)蒸馏温度在一定的时间内提取量随蒸馏时间的延长而增加,一定时间后提取量不再增加(3)下降部分精油会随水蒸气挥发而流失(4)较低减少挥发(或防止挥发)(5)a(6)能薄荷油与玫瑰精油的化学性质相似7(12分)如图是用水蒸气蒸馏法从薄荷叶中提取薄荷油的装置图,请据图补充下面的实验并回答有关问题。(1)实验步骤安装好如图所示的装置,特别要注意将冷凝器夹好。将薄荷叶尽量剪碎,取适量的薄荷叶放入_瓶内。向_瓶内加水,至容积的_左右,为防止出现水碱,可加入数滴稀硫酸。此时应向瓶中放入几粒_,以防暴沸。向冷凝器中通入_。放好连接管,将连接管的出口放在接收瓶中。接收瓶口上盖一小块铝箔或牛皮纸。将水蒸气发生器加热,至瓶中的水沸腾,然后调节火的大小,维持水稳定的沸腾。当接收瓶内漂在水上的油状物(即精油)不再增多时即可停止实验。(2)回答有关问题a蒸馏瓶通入b蒸馏瓶中的连接管为什么插入蒸馏瓶底部?_。冷凝器的作用是_。接收瓶口上盖一小块铝箔或牛皮纸,其目的是_。(3)本实验装置可用来提取橘皮芳香油吗?原理是什么?_。(4)冷凝管的出水口和进水口可以互换吗?原因是什么?_。解析水蒸气蒸馏法的原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来,形成油水混合物,冷却后混合物又会重新分出油层和水层。用水蒸气蒸馏法提取芳香油时,原料放入b瓶中,通入水蒸气的玻璃管到达瓶底,让水蒸气由下而上进行蒸馏。a瓶中水量不能加满,约占就行,为防止水暴沸,可向a瓶内放入几粒沸石或碎玻璃、碎砖瓦等。薄荷油具有挥发性,因此在收集瓶口盖上小块铝箔或牛皮纸。答案(1)ba沸石(或碎玻璃、碎砖瓦)自来水(2)让水蒸气由下而上进行蒸馏使混合气体冷却分层薄荷油具有挥发性,以减少薄荷油的散失(3)可以。橘皮芳香油存在于果皮的油细胞中,具有一定

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