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比色法（colorimetry）以可見光作光源，比較溶液顏色深淺度以測定所含有色物質濃度的方法。以生成有色化合物的顯色反應為基礎，通過比較或測量有色物質溶液顏色深度來確定待測組分含量的方法。比色法作為一種定量分析的方法，開始於19世紀3040年代。比色分析對顯色反應的基本要求是：反應應具有較高的靈敏度和選擇性，反應生成的有色化合物的組成恆定且較穩定，它和顯色劑的顏色差別較大。選擇適當的顯色反應和控制好適宜的反應條件，是比色分析的關鍵。常用的比色法有兩種：目視比色法和光電比色法，兩種方法都是以朗伯-比爾定律(Abc)為基礎。常用的目視比色法是標準系列法，即用不同量的待測物標準溶液在完全相同的一組比色管中，先按分析步驟顯色，配成顏色逐漸遞變的標準色階。試樣溶液也在完全相同條件下顯色，和標準色階作比較，目視找出色澤最相近的那一份標準，由其中所含標準溶液的量，計算確定試樣中待測組分的含量。 光電比色法是在光電比色計上測量一系列標準溶液的吸光度，將吸光度對濃度作圖，繪製工作曲線，然後根據待測組分溶液的吸光度在工作曲線上查得其濃度或含量。與目視比色法相比，光電比色法消除了主觀誤差，提高了測量準確度，而且可以通過選擇濾光片來消除干擾，從而提高了選擇性。但光電比色計採用鎢燈光源和濾光片，只適用於可見光譜區和只能 得到一定波長範圍的復合光，而不是單色光束，還有其他一些局限，使它無論在測量的準確度、靈敏度和應用範圍上都不如紫外-可見分光光度計。20 世紀3060年代，是比色法發展的旺盛時期，此後就逐漸為分光光度法所代替。 分光光度法乃是基於有色溶液明暗及強度的測定，來確定溶液試樣的濃度。溶液的色度依試樣吸收輻射的量而定，溶液外觀若為紅色，正確的說就是允許紅光通過，而其他補色(黃色與藍色)卻被吸收了。而濃度越高，吸收度越高，這就是所謂的比爾定律(Beers，s Law )。朗伯比爾定律(Lambert-Beer) 當一束平行的波長為入的單色光通過一均勻的有色溶液時，光的一部分被比色皿的表面反射回來，一部分被溶液吸收，一部分則透過溶液。如圖所示： Io = Ia + Ir + ItIo 入射光的強度； Ia 被吸收光的強度； Ir 反射光的強度； It 透過光的強度。在光度分析中，反射光強度Ir因使用同種質料的比色皿，反射光強度不變，因此反射所引起的誤差互相抵消。則：Io = Ia + ItIa大 It；則光減弱越多。比色分析法的實質：透過光強度的變化。如果：濃度 c大Ia大；液層厚度L大Ia大。 當入射光波長不變時，光吸收程度與溶液的濃度和液層厚度有關。 It 透光度或透光率：T = Io T大，光的吸收小；T小，光的吸收大。吸光度：A = log (Io/ It) = log (1/ T)吸光度也叫光密度D或消光度E。光的吸收定律（又稱為朗伯比爾定律）：比色濃度分析法(比色法)就是利用物質濃度不同，和某些化合物反應產生不同顏色作基礎，比較分析而得的。當物質曝曬在一定強度I光線下，由Lambert-Beer定律，知被吸收的輻射量為： A=log I / It這吸收量也可由下式得到： A= C b 其中 = 在波長下，物質的莫耳消失係數(molar extrinction coefficient) C = 物質的莫耳濃度 b = 光通過樣品的光距所以，依上式，在其他係數已知情況下，物質濃度C可藉由激發光強度I所決的顏色直接參予以計算。下圖乃一典型比色濃度計的構造表示。單色發光二極體放出單一波長的輻射，提供系統I強度光。因為物質吸收光色和激發光色成互補，(例如：物質顯現黃色，因為它吸收藍光)銅離子分析儀使用發光二極體，發射某適當的波長以測量樣品。而光距，即是取樣玻璃試管之尺寸。感測器收集樣品的激發光強度I將轉換成電流，產生毫伏特(mV)的電位訊號。 微電腦將此電位訊號，轉換成適當的測量單位，並顯示在觸控螢幕上。實際上，相關溶液測量曲線早已記憶在微處理器的程式內，這曲線就是每次測量的比較參考基礎。經由這種方式，對未知濃度的樣品，我們能利用它比色濃度反應後