《分子生物学实验》(073002)教学大纲.doc

分子生物学实验（073002）教学大纲学科部(系): 生物工程与技术系 执笔人: 刘文 审核人: 陈玲玲一、课程基本情况1.教学计划实验学时32学时，实际可开出实验学时32学时，独立设课。2. 课程类型：专业必修课。服务专业：生物工程、生物科学、生物技术本科二、实验教学目的和要求掌握基本的分子生物学实验技能；培养学生综合实验的能力和通过实验解决科学问题的能力；与理论课教学配合，加强学生对理论知识的掌握。三、学时分配及实验项目表 其中28学时必选实验，4学时可选实验，根据教学情况从实验项目03-06中选做一个。编码实验项目学时/学分每组人数实验类型必选/可选首开时间07300201分子生物学实验基本原理和实验技术240演示必选200707300202基因操作系列综合实验2620综合必选200307300202-1培养基的配制及细菌纯化培养207300202-2碱法抽提质粒DNA307300202-3琼脂糖凝胶电泳检测DNA307300202-4大肠杆菌感受态细胞的制备407300202-5DNA的酶切与纯化307300202-6DNA重组体的构建307300202-7重组DAN的转化与鉴定407300202-8PCR法扩增DNA及电泳检测407300203哺乳动物基因组或植物基因组DNA的提取220验证可选200707300204总RNA提取及定量分析220验证可选07300205mRNA的分离220验证可选07300206蛋白质印迹法220验证可选四、实验课的考核平时实验操作30% 实验报告20% 期末实验考核50%五、实验指导（参考）书和实验报告分子生物学实验指导魏群主编，高等教育出版社。实验报告要求：写明实验原理、材料、主要操作步骤、结果、讨论分析。六、实验项目信息：实验项目信息实验项目名称：1.碱法抽提质粒DNA 实验项目代码：课程名称分子生物学课程代码070212实验类别专业实验依据大纲实验学时4实验类型验证实验专业生物工程、科学、技术每组人数20实验者本科实验内容概述碱裂解法提取质粒，根据公价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA 在拓扑学上的差异来分离它们。本实验所需主要设备设备名称规格数量/组备注专用恒温摇床4台式离心机2高压灭菌锅2恒温培养箱2冰箱2共用-70度冰箱1超净工作台2颗粒制冰机1高速冷冻离心机1微量移液器15 填表人：张建勇 审核人：刘文实验项目信息实验项目名称：2.琼脂糖凝胶电泳测定DNA的浓度与纯度 实验项目代码： 课程名称分子生物学课程代码070212实验类别专业实验依据大纲实验学时4实验类型验证实验专业生物工程、科学、技术每组人数20实验者本科实验内容概述琼脂糖凝胶电泳的方法测DNA。不同DNA分子在胶中的泳动速度不同，因此可分离DNA.本实验所需主要设备设备名称规格数量/组备注专用电泳槽4紫外分析仪4电泳仪4紫外分光光度计4台式离心机1冰箱2共用-70度冰箱1凝胶成像系统1颗粒制冰机1高速冷冻离心机1微量移液器15 填表人：张建勇 审核人：刘文实验项目信息实验项目名称：3. 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化实验 实验项目代码：课程名称分子生物学课程代码070212实验类别专业实验依据大纲实验学时4实验类型验证实验专业生物工程、科学、技术每组人数20实验者本科实验内容概述诱导大肠杆菌感受态并进行转化。感受态是细菌容易吸收外源DNA的状态，用低温CaCI2可以诱导感受态出现。本实验所需主要设备设备名称规格数量/组备注专用台式离心机5高压灭菌锅2恒温培养箱2恒温摇床3家用冰箱1漩涡振荡器8冰箱2恒温水浴锅4共用高速冷冻离心机2-70度冰箱1超净工作台2颗粒制冰机1微量移液器15 填表人：张建勇 审核人：刘文实验项目信息实验项目名称：4. 蛋白质的PAGE分析 实验项目代码： 课程名称分子生物学课程代码070212实验类别专业实验依据大纲实验学时2实验类型验证实验专业生物工程、科学、技术每组人数20实验者本科实验内容概述聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质，考马斯亮兰染色，与分子量标准相比，测定蛋白质分子量。本实验所需主要设备设备名称规格数量/组备注专用恒温摇床4台式离心机5高压灭菌锅3恒温水浴锅4电泳仪5冰箱2电泳槽5共用高速冷冻离心机2超净工作台3分光光度计2微量移液器15 填表人：张建勇 审核人：刘文实验项目信息实验项目名称：5. PCR法扩增DNA 实验项目代码： 课程名称分子生物学课程代码070212实验类别专业实验依据大纲实验学时2实验类型验证实验专业生物工程、科学、技术每组人数20实验者本科实验内容概述用PCR仪体外扩增DNA.本实验所需主要设备设备名称规格数量/组备注专用紫外透射仪2电泳仪5电泳槽5冰箱2台式离心机5共用高速冷冻离心机1PCR仪2-70度冰箱1微量移液器15颗粒制冰机1凝胶成像系统1 填表人：张建勇 审核人：刘文实验项目信息实验项目名称：6.DNA重组体的构建与筛选 实验项目代码： 课程名称分子生物学课程代码070212实验类别专业实验依据大纲实验学时2实验类型综合实验专业生物工程、科学、技术每组人数20实验者本科实验内容概述 将外源基因与载体分子连接。现用限制性内切酶分别切割目的DNA和载体，在用连接酶连接。本实验所需主要设备设备名称规格数量/组备注专用恒温培养箱2恒温摇床3台式离心机5高压灭菌锅3冰箱2恒温水浴锅3恒温震荡培养箱2共用微量移液器15超净工作台2-70度冰箱1颗粒制冰机1高速冷冻离心机1 填表人：张建勇 审核人：刘文实验项目信息实验项目名称：7.哺乳动物基因组DNA的提取 实验项目代码：课程名称分子生物学课程代码070212实验类别专业实验依据大纲实验学时2实验类型综合实验专业生物工程、科学、技术每组人数20实验者本科实验内容概述在EDTA和SDS等去污剂的作用下，用蛋白酶K消化细胞，酚抽提法得到基因组DNA。本实验所需主要设备设备名称规格数量/组备注专用恒温培养箱2恒温摇床4低温离心机5恒温震荡培养箱2干热灭菌箱2电泳仪5电泳槽5冰箱2恒温水浴锅3玻璃匀浆机2共用微量移液器15超声破碎仪2-70度冰箱1凝胶成像系统1颗粒制冰机1高速冷冻离心机1 填表人：张建勇 审核人：刘文实验项目信息实验项目名称：8.DNA的酶切分析 实验项目代码：课程名称分子生物学课程代码070212实验类别专业实验依据大纲实验学时2实验类型综合实验专业生物工程、科学、技术每组人数20实验者本科实验内容概述用限制酶酶切载体和目的DNA序列，并电泳分析酶切结果。本实验所需主要设备设备名称规格数量/组备注专用恒温培养箱2恒温摇床3低温离心机5恒温水浴锅3恒温震荡培养箱2电泳仪5电泳槽5冰箱2共用液氮罐2高速冷冻离心机1-70度冰箱1凝胶成像系统1颗粒制冰机1全自动快速水平电泳系统1微量移液器15 填表人：张建勇 审核人：刘文实验项目信息实验项目名称：9.总RNA提取、定量分析及琼脂糖凝胶电泳 实验项目代码：课程名称分子生物学课程代码070212实验类别专业实验依据大纲实验学时2实验类型综合实验专业生物工程、科学、技术每组人数20实验者本科实验内容概述先破碎细胞、高浓度强变性剂使蛋白质变性沉淀，然后用酚氯仿法抽提RNA。本实验所需主要设备设备名称规格数量/组备注专用恒温培养箱2紫外透射仪3低温离心机5高压灭菌锅3干热灭菌箱2电泳仪5电泳槽5恒温水浴锅3恒温震荡培养箱2冰箱2共用高速冷冻离心机1微量移液器15-70度冰箱1凝胶成像系统1颗粒制冰机1液氮罐2全自动快速水平电泳系统1 填表人：张建勇 审核人：刘文实验项目信息实验项目名称：10.mRNA分离 实验项目代码：课程名称分子生物学课程代码070212实验类别专业实验依据大纲实验学时2实验类型综合实验专业生物工程、科学、技术每组人数20实验者本科实验内容概述先破碎细胞、高浓度强变性剂使蛋白质变性沉淀，然后抽提mRNA。本实验所需主要设备设备名称规格数量/组备注专用恒温培养箱2紫外透射仪3低温离心机5高压灭菌锅3干热灭菌箱2电泳仪5电泳槽5恒温水浴锅3恒温震荡培养箱2冰箱2共用微量移液器15冷冻干燥机1-70度冰箱1凝胶成像系统1颗粒制冰机1液氮罐2高速冷冻离心机1全自动快速水平电泳系统1 填表人：张建勇 审核人：刘文实验项目信息实验项目名称：11.蛋白质的分离纯化 实验项目代码： 课程名称分子生物学课程代码070212实验类别专业实验依据大纲实验学时2实验类型综合实验专业生物工程、科学、技术每组人数20实验者本科实验内容概述层析法、冷冻干燥等方法分离纯化蛋白质并用氨基酸自动分析仪分析氨基酸组成。本实验所需主要设备设备名称规格数量/组备注专用恒温培养箱2恒温摇床3台式离心机5高压灭菌锅3电泳仪5电泳槽5冰箱2恒温水浴锅3共用真空冷冻干燥系统1分光光度计2凝胶成像系统1高速冷冻离心机1微量移液器15层析柱5层析柜1全自动氨基酸分析仪1 填表人：张建勇 审核人：刘文实验项目信息实验项目名称：13.蛋白质印记法 实验项目代码：课程名称分子生物学课程代码070212实验类别专业实验依据大