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文档简介

设计型实验酵母菌的分离及培养条件的优化 一 目的要求1 掌握培养基的配置及灭菌方法 能够正确的配制培养基并在高压灭菌锅内进行灭菌 2 熟知培养基成分的选择原则 能够对培养基的成分和配比进行优化设计 3 掌握固体斜面 平板的制备技术 能够通过划线 涂布等方法分离菌种 4 熟知影响酵母菌生长繁殖各种培养条件 能够对摇瓶培养条件进行优化设计 5 了解酵母菌培养过程的代谢变化规律 掌握酵母菌培养过程参数的测定和分析方法 二 基本原理酵母菌是单细胞真菌生物 具有很高的营养价值 特别是含有较多蛋白质 B族维生素 核酸和矿物质 同时也能产生一些保健功能活性物 因酵母属于简单的单细胞真核生物 易于培养 且生长迅速 被广泛用于现代生物学研究中 是遗传工程研究过程中常用的受体菌种 从自然界或商品中分离纯的酵母菌株 通常采用平板或斜面涂布划线法 这两种方法简单有效 是实验室分离纯化菌种常用到的方法 在发酵过程中定时地取样测定 包括对菌体进行镜检 测定不同时期发酵液的菌体浓度 残留的还原糖等参数 动态地了解发酵过程中过程变量的变化 分析菌体生长 基质消耗 产物生成的速度 研究发酵动力学 为生产中优化培养条件提供数据依据 三 实验材料 一 菌种 从安琪酵母中分离的酵母菌 二 培养基基础培养基YPD 酵母浸粉1 蛋白胨2 葡萄糖2 固体培养基再加琼脂2 优化N源培养基 酵母浸粉1 NH4 2SO42 葡萄糖2 酵母浸粉1 NH4 2SO44 葡萄糖2 酵母浸粉1 NH4NO32 葡萄糖2 酵母浸粉1 NH4NO34 葡萄糖2 酵母浸粉1 NaNO32 葡萄糖2 酵母浸粉1 NaNO34 葡萄糖2 三 仪器设备超净工作台 756型分光光度计 旋转式摇床 恒温培养箱 全自动灭菌锅 三角瓶 涂布器 移液管 平皿等玻璃仪器 四 试剂酵母浸粉 蛋白胨 葡萄糖 琼脂 NH4 2SO42 NH4 2SO44 NH4NO32 NH4NO34 NaNO32 NaNO34 等 裴林试剂甲液 裴林试剂乙液 NaOH溶液 HCl等 四实验内容1 分离单菌落 1 实验物品灭菌仪器 包扎9个移液管 9个涂布器 9个装有9ml蒸馏水的试管 16个平板 液体 3g酵母浸粉1 6g蛋白胨2 6g葡萄糖2 配成300ml溶液 取240ml溶液平均分装两个三角瓶中 然后每个三角瓶放入2 4g琼脂 剩下60ml为液体培养基 然后将以上设备拿去灭菌 2 划线涂布超净台上 1 把240ml的培养基分别倒入15个平板 每个平板为12 13ml 平板分别标10 2 10 10 还有倒一个斜面2 取1ml的菌原液进行稀释梯度为10 3 10
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