验证A药对急性中毒性肾衰竭的治疗作用.doc

验证A药对急性肾衰竭的治疗作用某药物研究所新研制出一个新制剂A，拟通过制备急性肾功能衰竭的实验动物模型，以及选择有效的观察指标，证实A药在急性肾功能衰竭的治疗作用。请你设计一个可行的方案，并说明理由或者机理，同时简单谈谈新药研究与评价分哪几个阶段？临床前研究包括哪些内容？一、 实验目的：验证A药对急性肾衰竭有治疗作用。二、 实验动物：健康雄性SD大鼠三、 实验原理：1、甘油致ARF模型的原理：肌注甘油可造成肌肉溶解及溶血，释放大量肌红蛋白及血红蛋白，肌红蛋白可使肾血管、肾小球入球小动脉发生收缩，大鼠肾血流减少，肾小管内皮细胞肿胀，增大了肾血管的阻力，血管节段性坏死，外膜纤维化，血管自身调节功能丧失，导致肾血流及肾小球滤过率下降，引起肾脏缺血而使肾小管功能受到损害。此外，大量的血红蛋白和肌红蛋白滤过不能被肾小管重吸收而聚集为管型堵塞肾小管，进一步加重肾的损伤，从而引发局部炎症反应。甘油毒性小，一般认为甘油致大鼠血红蛋白尿性急性肾衰竭模型有中毒性和缺血性两种机制，接近于人常见的急性肾小球肾衰竭，且此法不用动手术伤及大鼠，操作简单、方便、复制出来的急性肾衰竭模型稳定。2、阳性药物：地塞米松，肾上腺皮质激素类药，具有抗炎、抗内毒素作用， 故能缓解急性肾衰竭症状。抗炎作用：减轻和防止组织对炎症的反应，从而减轻炎症的表现。激素抑制炎症细胞，包括巨噬细胞和白细胞在炎症部位的集聚，并抑制吞噬作用、溶酶体酶的释放以及炎症化学中介物的合成和释放。可以减轻和防止组织对炎症的反应，从而减轻炎症的表现。四、 实验器材与药品50 %甘油、生理盐水、A药、地塞米松注射液、代谢笼、离心机、注射器、普朗医疗生产的全自动生化分析仪PUZS-300、尿素氮检测试剂盒BUN、肌酐CRE检测试剂盒等。五、 实验方法与指标观察:1、动物造模及喂养：健康雄性SD大鼠50只,体重220 + 20g,适应性喂养两天后禁水24 h。第四天上午随机取10只大鼠作正常组，其余40只大鼠双侧大腿肌肉注射50%甘油(10 ml/kg.),正常组同法给等容量生理盐水,之后分别饲养于恒温动物饲育室,予普通固体饲料及自来水喂养。肌注甘油前及之后每隔12小时每只大鼠内眦取血0.2mL，离心取上清液测量BUN与Scr。第6天上午根据大鼠的BUN和Cre值选出30只急性肾衰竭成型较好的大鼠，随机平均分成三组（模型组、治疗组、阳性对照组）。2、实验给药和指标测量：从第6天上午开始给药四天。阳性对照组腹腔注射地塞米松 0. 1mg/ kg/d、治疗组腹腔注射有效剂量新药A，正常组、模型组腹腔注射同容量生理盐水。分别放入代谢笼中收集两小时尿液，然后每只大鼠内眦取血0.2mL，离心取上清液来测量大鼠BUN和Scr，记录相关数据，其他时间饲养于恒温动物饲育室,给予相同普通固体饲料及自来水喂养。最后数据汇总记录为： + S（N=10），模型组与空白对照组比较,治疗组分别与模型组和阳性药物组比较。3、造模成功的指标和药物疗效观察：注射甘油48h内尿量明显减少 ,血液BUN 、Scr 明显增高。所试药物药效可根据用药后对以上指标的改善来评价 ,结果进行组间比较 ,统计学处理采用单因素方差分析。a0.05且差异有显著意义时 ,可判断阳性。4、BUN和Scr测定：用普朗医疗生产的全自动生化分析仪PUZS-300测定BUN和Scr、检测试剂用普朗医疗生产的尿素氮检测试剂盒BUN、肌酐检测试剂盒CRE。5、注意点：个别大鼠可在肌注甘油后,肾脏损害过重而死亡。 表1 肾衰大鼠 4 天内的尿量 (ml/24h) 第1天 第2天 第3天 第4天空白对照组肾衰模型组地塞米松组A药组表 2 肾衰大鼠BUN 和Scr (mmol/L) 第1天 第2天 第3天 第4天 BUN SCR BUN SCR BUN SCR BUN SCR空白对照组肾衰模型组地塞米松组 A药组六、结果分析：地塞米松组和模型组比较，尿量增加、BUN和Scr均降低，如果A药组和模型组比较， A药组和地塞米松组比较，尿量、BUN和Scr变化趋势相似，则于说明A药对急性肾衰竭有治疗作用。新药研究分为三个阶段：第一个阶段是新活性成分的发现与筛选；第二个阶段是新药的临床前研究；第三个阶段是新药的临床研究。每一个研究阶段的研究内容、目的、对象和侧重点各不相同。 任何一种新药，必须经过活性成分的发现与筛选以初步确定其潜在的医疗价值，再通过充分的临床前研究以决定其是否值得进行以人体为试验对象的临床研究，通过严格可靠的临床研究以决定该新药是否能够作为一种安全有效的药品上市销售。 一般而言，新药临床前研究包括以下三个方面: (1)文献研究通过充分的文献研究以保证研究计划的创新性，避免劳而无功的重复性研究。 (2)药学研究包括侯选药物的合成工艺、提取方法、理化性质及纯度、剂型选择、处方筛选、制备工艺、检验方法、质量指标、稳定性考察等。中药制剂包括原药材的来源、加工及炮制等；生物制品包括菌毒种、细胞株、生物组织等起始材料的质量标准、保存条