化妆品防腐体系的构建及其效能评价.doc

化妆品防腐体系的构建及其效能评价黔与绸毛第4期2001年8化妆品防腐体系的构建及其效能评价陈诅本欧阳友生陈娇娣谢小保黄小茉彭红李剑英叶松广(广东省檀l生物研究所,广东省檀l生物分析稠试中心,广东广州510070)摘要:对建立化妆品防腐体系的各种要素进行了分析,就国内外有代表性的微生物挑战试验的评价方法进行r比较,提出了符合实践情况井适用于我国化妆品行业的化妆品防腐体系的散能翊I试方法的评价标准,还为化妆品防腐体系筛选过程的快速判定提供了经验依据.关毽词:化妆品;防腐剂;防腐体系;微生物挑战试验中国分类号:呻658文献标识码:A文章编号10011803一(21301)04一,004205大多数化妆品富含微生物生长所需的养分.环境中的微生物一俟进入,即可迅速繁殖,破坏产品的感官品质,损害消费者的健康.因此,一个良好的防腐体系,对于化妆品产品来说是必不可少的1化妆品的防腐体系化妆品的防腐体系实际上是由若干种防腐剂(和助剂)按一定比例构建而成防腐体系的基本要素是防腐剂,但其效能大小又与其用量和使用对象的剂型(液态,粉状,乳状,膏霜状等)特性,组成(是否含碳水化合物,蛋白质,动植物抽提物等),pH值,可能污染的微生物种类和数量等密切相关.1.1化妆品防腐剂早期使用的防腐剂有:尼泊金酯类,苯甲醇,烷基二甲基苄基铵氯化物,对氯问二甲酚,苯氧基乙醇,布罗波尔(Bmnopol,2一溴一2一硝基丙烷一1,3一丙二醇),道维希尔200(Dowieil一200,六亚甲基四胺衍生物),杰马一115(Germall一115,咪唑烷基脲),脱氢醋酸,甲醛,山梨酸等.这些防腐剂至今很多仍在使用0j,近期推广商品化的化妆品防腐剂见表1.至于复配而成的防腐剂商品更是数不胜数.防腐剂对微生物的最低抑制浓度(MIC)是判断一种防腐剂效果的首先考虑的基本指标,MIC值越小,表明其效力越高.表2(见下页)是某些化妆品防腐剂对主要测试微生物的MIC.1.2化妆品防腐体系的构建1.2.1防腐剂的复配一种万能的防腐剂是不存在的.多种防腐剂的相互配合,优缺点的互补,至少有如下优势:拓宽抗菌谱:某种防腐剂对一些微生物效果好而对另一些微生物效果差,而另一种防腐剂刚好相反.两者合用,就能达到广谱抗菌的防治目的.提高药效:两种杀菌作用机制不同的防腐剂共用,其效果往往不是简单的叠加作用,而是相乘作用,这种所谓增效作用.通常在降低使用量的情况下,仍保持足够的杀菌效力.抗二次污染:有些防腐剂对霉腐微生物的杀灭效果较好,但残效期有限,而另一类防腐剂的杀灭效果不大,但抑制作用显着,两者混用.既能保证贮存和货架质量,叉可防止使用过程中的重复污染提高安全性:单一使用防腐剂,有时要达到防腐效果,用量需超过规定的允许量,若多种防腐剂在允许量下的混配,既能达到防治目的,叉可保证产品的安全性预防抗药性的产生:如果某种微生物对一种防腐剂容易产生抗药性的话,它对两种以上的防腐剂都同时产生抗药性的机会自然就困难得多.表I一些化妆品防腐剂商品及化学成分商品名称化学成分Ervdk400Biopurel00PaglardDMDMHjPaglardTCCNipacidePX(PCItX)qmMLLG日LLPLUSLt7疆EIS【TmCInEA华科一98,凯松CG,JX一515,YNH3GL皿邶GL皿ANrPLUSIRG&SANDP300(玉洁新DP一300),Oletron甲基二溴戊二腈和苯氧乙醇咪唑烷基脲二甲基二羟基乙内酰脲一(4一氯苯基一N一3,4一二氯苯基)脲对氯问二甲苯酚双咪唑烷基脲双咪唑烷基脲(GERbkLL)和碘而炔基氨基甲酸丁酯(IPBC)己醛双酰脲羟甲基甘氨酸钠2一甲基一4一异噻唑啉一3一酮和5一氰一22甲基一4一异噻唑啉一3一酮二甲基二羟基乙内酰脲DMDM和IPBC2,4,4一三氯一2一羟基二苯醚收稿日期:200O一0622;修回日期:200O一0818第一怍者简介:陈仪本(1949一),男,广东新会人,1982年毕业于华南农业大学.副研究员硕士.联系电话:02087668142.?42第4期2001年8月陈仪车等:化妆品防腐体系的柑建及其技能评价表2一些化妆品防腐剂对微生物最低抑制浓度与尼泊金甲酯对羟基苯甲酸甲酯4O0O20OO20lx尼泊金丙酯对羟基苯甲酸丙酯5001000250Dowicil一200六亚甲基四胺衍生物1002005002OO5一氯一2一甲基一4一异噻唑凯松cG啉一3一酮,2一甲基一4一异15O125150125125噻唑啉一3一酮玉洁新DP300,4一三氯一2羟基二苯0.011.o>IO00o13(H争,4_三氯-羟基二苯0.010.25>IO00o13布罗波尔璐丙烷一一510010050NIPAGUAPK_f函嚣基丙烷一20020O250150400GERMALL1I双眯唑烷基脲10020O250200100GLYDM./T二甲基二羟基乙内酰脲29129129172787271455Mu)二羟甲基乙内酰脲5O0500500500Glypl删乙内酰脲,IPBC嚣棰:;霪接踺zs固体15:2笛50.霪棰:2笛5器撵24数据来自有关报道或商品说明书,但供参考1.2.2化妆品防腐体系构建需考虑的其它因素并不是说,简单地把几种抗菌效果较好的防腐剂混配起来就能获得一个好的防腐体系了,各类化妆品的组分复杂,理化性能差异很大,防腐剂的效能能否充分发挥出来,还受到其中多方面因素的干扰和制约.1.2.2.1防腐剂使用量化妆品防腐剂用量必须以安全性作为前提,我国和有关国家的组织允许使用的化妆品防腐剂都有一定的规定l8J.然而,要使防腐体系的效力能发挥出来,还须保证足够的使用量,在使用量选定时,可先参考防腐剂的MIC值和商品的说明书指导,但更重要的是必须通过具体产品的使用试验才能作出最终决定,因此,MIC值很小的杀菌剂,在产品中应用时表现得很糟糕的现象是经常发生的.1.2.2.2产品的DH值大多数的防腐剂都容易在酸性和中性的环境中发挥其效能_2.9J,在碱性环境中效力显着减低,甚至失效,而季铵盐类防腐剂却在pH值大于7时才有效.环境中的pH值主要是通过两方面的作用影响防腐剂效能的.pH值变化引起微生物的细胞膜结构的变化,从而改变其通透性,进而影响防腐剂进入微生物细胞的多寡.pH值的变化影响防腐剂分子的存在形式(例如离子形式或分子形式),而许多有机类的防腐剂通过常以分子形式才容易通过微生物细胞膜的脂质层.1.2.2.3溶解性能这是一个较为复杂的因素.微生物的生长繁殖必需在有水的环境中进行.因此,在多相系统中,水相中须溶解有足够的防腐剂.然而,只是强调防腐剂的水溶性显然是片面的,好的防腐剂还需要具有一定的脂溶性(或者说有一个恰当的油水分配系数),这样才有利于通过由蛋白质(亲水)和脂质(亲油)构成的微生物细胞膜,进人细胞内,发挥其毒害细胞的作用.1.2.2.4化学相容性一般来说,防腐剂和化妆品中的活性物质和助剂之间是有可能发生相互作用,也就是说,组分之间也具有一定的不相容性.在筛选化妆品防腐体系的时候,以下的一些情况是值得注意的:化妆品中的某些组成材料如碳水化合物,滑石粉,金属氧化物,纤维素等会吸附防腐剂,降低其效力.产品中含有淀粉类物质,可影响尼洎金酯类的抑菌效果L2.高浓度的蛋白质(氨基酸)一方面可能通过对微生物形成保护层,降低防腐剂的抗菌活性,另一方面又能促进微生物的增长.金属离子如M+,ca2+,z兀2+,对防腐剂的活性有很大的影响,一般情况下,过量的金属离子在香料,润滑剂,天然或敏感的化台物中易-43?瑚瑚啪如与蝴13用化学工业2001年第4期,第31卷形成难溶物或发生催化氧化反应.防腐剂可和化妆品的某些组分形成氢键(如山梨酸与某些组分)或螯台物(如增稠剂中的铁离子),通过束缚或消耗的方式,降低防腐体系的效能0一.少量表面活性剂增加防腐剂对细胞膜的通透性,有增效作用,但是量大时会形成胶束,吸引水相中的防腐剂,降低了防腐剂在水相中的含量,影响了其杀菌效能.某些防腐剂和表面活性剂如硫酸盐(酯),碳酸盐(酯),含氮表面活性剂作用,和色素荧光染料作用,和包装材料(塑料,金属,橡胶)作用,在影响防腐剂效力的同时,也损害产品的品质J.防腐剂对去离子水的表面张力,产品的发泡性,组分的溶解性.色素的显色性,香料的气味,活性因子的生物活性等多方面的影响或潜在影响等都应该在考虑之列.1.2.2.5产品中微生物的初始污染量对防腐剂效能的发挥也有直接的影响当产品或原料污染严重时,微生物分泌的代谢产物与防腐剂作用,防腐剂杀死大量的菌体都会消耗一部分防腐剂;更重要的是,许多微生物在大量繁殖时,能分泌一种类似蛋白质的物质,把菌体包裹起来,起到抵御外来化学(如防腐剂)物理(如热)因素的损害;有报道甚至指出,当微生物已经大量繁殖后,某些杀菌剂(如山梨酸)还可作为营养物被微生物利用l9J.由此可见,即使是同一个防腐剂(体系),在不同组成,不同剂型的化妆品中发挥出的防腐效能都可能很不一样.一个防腐体系对一种(类)特定的产品效果优良,而对另一种(类)产品却很不理想是常有的事情,因此,在投产前对产品防腐体系的可靠性做效能测试是十分必要的.2化妆品防腐体系效能的评价2.1评价方法近年来,以微生物挑战试验作为测试和评价化妆品的防腐效能已经逐步被国内外化妆品生产企业接受和推行,这是基于微生物挑战试验能够模拟化妆品生产和使用过程中受到高强度的微生物污染的潜在可能性和自然界中微生物生长的最适条件,使得测试结果更接近残酷的现实,能经受严峻的考验,从而为保证产品避免由微生物污染造成的损失和保障消费者的健康提供可靠的保证.虽然,目前世界各国及其有关组织对化妆品微生物挑战试验还未有一个统一的方法,但其基本设计则是相同的,这就是,在待测样本中人为地接种若干种类,一定数量的微生物,在适当的温度下存放,定期分离样本的微生物,并根据微生物的数量变化情况评价样本的抗菌效能.不过,在微生物挑战试验的具体操作步骤里.不44?同国家和组织采用的测试菌种,接种方式(包括时间和次数),分离时间等还是有差异的,评价方法自然也有所不同,下面是几个典型的例子.CTFA的方法i1J初始的(棍台)霉菌和(混合)细菌的接种量分别为lO4du/s,(mE)和106cfu/g(mL),要求在第7天时霉菌降低9o%,细菌降低99.9%,并且在28天内菌数持续下降.美国在CTFA评价方法的基础上提出更为严格的标准,即,若单菌接种的三个平乎乎试验中任何一种微生物数量的平均值,在第七天肘下降到100cfp/g(rnl_)以下,28天全部为0,则视为效果优良;通过挑战试验若第七天时下降到1Oo0cfu/g(mL)以下,则视为勉强通过:若单菌接种的任何一种微生物,任何一个平行样达不到上述标准.也达不到CTIA的要求,防腐体系则评定为无效.S&IVIK0K0试验方法J,每星期在25g同一样品中接种0.1mL1o8cfu/glO9cfu/g(mL)的混合菌液,连续6星期,若每星期接种前的菌数下降至10cfu/g(mE)以下,则视为合格.本实验室参照CTFA的方法,根据目前国内生产企业的现状,特别是通过大量的实际测试数据分析和跟踪调查,提出了以下供化妆品企业参考的评价标准:初始接种量细菌1o6cfu/glO7cfu/g(rnl_),霉菌1oscfu/glO6cfu/g(mL):第28天时,样品中含细菌或霉菌>1o3cfu/g(mL),该样品不能通过微生物攻击的挑战试验,表明样品的防腐体系不能有效地起到抑制微生物的作用,产品在生产,贮藏和使用中很容易受到微生物的污染.第28天时,样品中含细菌或霉菌在1o2cfu/g1o3cfu/g(mL),该样品有条件地通过挑战试验,即当产品中蛋白质或其他动植物材料成分不是特别高,同时生产的卫生环境符合要求,包装物不易发生二次污染时,该防霉体系可以使用,否则不能.第28天时,样品中含细菌或霉菌在10cfu/g1o2cfu/g(mL),表明该样品的防腐体系对微生物有较强的抑杀效果,通过挑战试验,产品在生产,贮藏和使用时不容易受到微生物污染.从第7天起,样品中的细菌或霉菌<10cfu/g(mL),说明该样品的防腐体系对微生物有特强的抑杀作用,通过挑战试验,产品在生产,贮藏和使用时很不容易被微生物污染.22化妆品防腐体系快速评价方法探讨常规的微生物挑战试验方法的试用周期都在28天以上,这对于确认一个产品的防腐体系是必须的但很多生产企业在产品的防腐体系的筛选时,稍嫌摸索试验周期太长,不利于尽快淘汰无效的防腐体系而吾曩爵l蕊第4期21301年8月陈仪车等:化妆品防腐体系的构建及其技能评价表3一批化妆品的产品微生物挑战试验的数据与选择有希望的防腐体系作进一步试验,以缩短研究周期.本实验室整理了近期一批对外检测数据,列于表3(见上页)中(第1,3天内容省略).从表3中的数字可看到:当测试进行到第7天时,若细菌和霉菌数均?45与日用化学工业2001年第4期,第3I卷能降低到lo3级以下时,第28天时的结果和评价一般都能通过挑战试验;当测试进行到第l4天时,细菌和霉菌数在104级以上时,第28天时的评价基本都不能通过挑战试验.虽然这仅仅是一个经验性的规律观察,还需要在实践中进一步验证.但对加快化妆品产品防腐体系筛选的过程,应该是一个有价值的帮助.3结论与展望(1)目前,世界各国报道的化妆品防腐剂已超过200种,我国现已在化妆品中使用的也有55种,不幸的是,至今还没有,将来也不可能有一种有效地使用在任何化妆品的防腐剂,也不可能有任何组合式的防腐体系可能做到万能,其制约因素包括防腐(剂)体系的抗菌谱,抗菌力,溶解性,相容性,配伍性,持久性,安全性等等.因此,以为随意选择一种(或几种复合)防腐剂就可能解决问题,或者以为在一种产品中效果良好的防腐体系,用在另一种产品中使用也可以放心的想法是非常错误的.每一个化妆品产品的防腐体系能否抵御在使用过程中微生物侵袭的潜在可能,必须通过专门的效能测试(挑战试验)加以证实.(2)迄今为止,国际上还没有一套标准化的化妆品防腐体系的测试和评价方法,比较权威的CTFA的方法无疑代表了许多基础性的,共性的,统计性强的情况.事实上,各国的大型化妆品企业对防腐体系效能的测试和评价都设计了自己的方法并且在实施.本实验室根据几年来对多家国内企业,中外合资企业,外资企业的样品测试实践,提出的一套测试和评价方案,具有技术上可靠,重现性强的特点,跟踪调查也证实了其评价结论,预测效果和实际应用情况的一致性,因而值得在国内的化妆品行业中推广.(3)未来化妆品防腐体系的发展,下述几方面工作是值得重视的开发安全性更高的高教防腐剂,这些物质可从天然抗菌物质或通过生物工程的研究开发获得用多组分的联合作用,提高抗菌力和扩展抗菌谱.虽该做法已逐步为人们接受.但其中盲目性仍很大,搭配的规律性问题还有待研究.对防腐剂与产品组分的相容性问题的认识至今仍十分肤浅,实际上目前应用化妆品防腐剂对微生物本身已经有相当出色的抑杀作用,但具体应用时的效果往往都相差甚远所以,从这种意义上说,有效地解决产品组分对杀菌剂功效的干扰问题,甚至比开发几种新的防腐剂显得更为迫切,也理应成为防腐体系构建的重要课题.参考文献:I.包于珊化妆品学M北京:中国纺纽出版社1998:2马振瀛,李象洪,季枪雄防霉学M昆明:云南科技出版牡.19903_剂骥,马洁薇化妆品用防腐剂J1同片i化学品科学,J000C1J:2223l4JSleinberg1)edCFrequency0rufoseatlvF毒Lwofthepeeativesrerted,qq1inproductssoldintheUnitedStatJjCosmeti&Toiletri.】997(112):57585井上真由美彭武厚,马振瀛,等译校微生物灾害及其防止技术M上海:上海科学技术出版社,19836JBrnmlDanielKCosmeticpresen,miml:1IndeIqan#them卸vttursinvolvedinch0ngthenpresematieforProdu【Jctrics挂Tolle.1996(Il1):71837SchtdkeW.S.NordetstedtMGS&M公化妆品和洗涤产品微生物质量管理M广州市澳云贸易有限岱司编译,19998中华民共和国卫生部生法制监督编化妆品卫牛规范M北京:中华人民共和国卫生法制与监督司,1999一I19BAL.llPMAmimkrobiMsinfoedsMNewYork:dDekker,Ine,1983.110DmlOrthPresenativeefticytesting:are4ewofvariouslesingmetho&andtheirI】I竹J.Curtreti&Tcnlet6es,1997f112):5961L1IJNuscatielloM.】CTFA.smsenguideline:ahistoricalwrsp一fiveandJJCometics&Toiletries,1993(108):5359lt2TTT,d.dafesmefcP一:chem