药物制剂微生物检验.ppt

药物制剂微生物检验 目录 1 微生物检验分类2 药品微生物限度检测的基本条件3 非灭菌制剂的微生物限度检查4 灭菌制剂的无菌检查法 一 微生物检验分类 无菌检查 凡直接进入人体血液循环系统 肌肉 皮下组织或接触创伤 溃疡部位而发生作用的制品或要求无菌的材料 灭菌器具都要进行无菌检查 注射用制剂 注射剂 输液 注射粉针等 眼用制剂 滴眼剂 眼用膜剂 凝胶剂 软膏剂等 植入型制剂 植入片等 创面用制剂 溃疡 烧伤及外伤用溶剂 软膏剂及气雾剂等手术用制剂 止血海绵 骨蜡等 二 药品微生物限度检测的基本条件 二 药品微生物限度检测的基本条件 二 药品微生物限度检测的基本条件 由于某些供试品具有抗菌活性 在建立测定方法或原测定法的检验条件发生改变时 可能影响检验结果的准确性 必须对供试品的抑菌活性及测定方法的可靠性进行验证 二 药品微生物限度检测的基本条件 1 检测用量 2 检测量 二 药品微生物限度检测的基本条件 二 药品微生物限度检测的基本条件 第三节药品微生物限度检测方法 微生物检验基本流程 1 领取并配制培养基2 擦拭工作台及墙壁3 开启紫外灯灭菌1h4 进行微生物实验5 实验完成后再次擦拭工作台 二 细菌数 霉菌和酵母菌数检查 1 平皿法 二 细菌数 霉菌和酵母菌数检查 二 细菌数 霉菌和酵母菌数检查 封闭式薄膜过滤器 传统开放式薄膜过滤器 二 细菌数 霉菌和酵母菌数检查 二 细菌数 霉菌和酵母菌数检查 二 细菌数 霉菌和酵母菌数检查 二 细菌数 霉菌和酵母菌数检查 二 细菌数 霉菌和酵母菌数检查 细菌总数 平均菌落数 稀释倍数 二 细菌数 霉菌和酵母菌数检查 当有两个相邻稀释级的菌落数在30 300之间 比值 2时 则以2个稀释级的平均值报告 比值 2时 则以低稀释级的平板菌落数乘以稀释倍数报告 高稀释级的平板菌落数 稀释倍数 比值 低稀释级的平板菌落数 稀释倍数 细菌总数检查表 培养温度 30 35 培养基名称 营养琼脂培养基 批号 14040901 特殊药品微生物限度检验 三 控制菌检查 检查项目 1 阴性对照试验 取稀释液10ml按相应供试品控制菌检查法检查 应无菌生长 2 阳性对照试验 供试品 10 100CFU阳性对照菌 应检出相应的阳性对照菌 3 供试品控制菌检查 依相应的检查方法进行 三 控制菌检查 检查流程 三 控制菌检查 检查流程 2020 1 29 33 可编辑 三 控制菌检查 检查流程 三 控制菌检查 检查流程 三 控制菌检查 检查流程 三 控制菌检查 检查流程 三 控制菌检查 大肠埃希菌检查 大肠埃希菌 三 控制菌检查 大肠埃希菌检查 大肠埃希菌检查意义 大肠埃希菌为条件致病菌 当人体免疫力低下或是侵入肠外组织 器官 可引起肠外感染 乃至败血症 也可随人和动物的粪便排出体外 污染环境 一旦食品 药品 水等物品中检出该菌 说明已受粪便污染 可能存在其他肠道致病菌和寄生虫卵 人们饮用或服用它们则可能引起消化道传染病 三 控制菌检查 大肠埃希菌检查 乳糖胆盐培养基 伊红美蓝琼脂培养基 靛基质试验 紫黑色金属光泽 玫瑰红色液面 麦康凯琼脂培养基 大肠杆菌呈桃红色 IMViC试验大肠埃希菌 或 产气杆菌 吲哚 靛基质 甲基红 二乙酰 枸橼酸盐利用 三 控制菌检查 大肠埃希菌检查 大肠埃希菌检查结果报告 MUG阳性 紫外光下管内培养物呈现蓝白色荧光 三 控制菌检查 大肠菌群检查 大肠菌群检查意义 大肠菌群主要存在于温血动物粪便中 随粪便排出体外后可直接污染药品 若产品中检出该菌群 表明该产品受到粪便污染 可能存在肠道致病菌并引起疾病 以此作为粪便指示菌比大肠埃希菌更具广泛卫生学意义 三 控制菌检查 大肠菌群检查 大肠菌群检查流程图 三 控制菌检查 大肠菌群检查 大肠菌群检查结果报告 大肠菌群MPN表 根据发酵乳糖产酸产气 平板上有典型菌落 并经证实为革兰氏阴性短杆菌 靛基质试验阳性 则可报告被检样品中检出粪大肠菌群 三 控制菌检查 铜绿假单胞菌检查 铜绿假单胞菌 三 控制菌检查 铜绿假单胞菌检查 铜绿假单胞菌检查意义 三 控制菌检查 铜绿假单胞菌检查 最终结果判断 增菌培养 供试液的制备 书写检验记录单 分离纯化 无菌落或无特征菌落 配培养基和稀释液 铜绿假单胞菌检查流程图 30 35 18 24h 30 35 18 24h 十六烷三甲基溴化铵平板 胆盐乳糖培养基 黄绿色菌膜 灰白色湿润 氧化酶试验 粉红 紫红色 绿脓菌素试验 盐酸层呈粉紫色氯仿层呈蓝绿色 硝酸盐还原产气试验 N2 明胶液化试验 明胶培养基 高层 明胶液化 三 控制菌检查 金黄色葡萄球菌检查 金黄色葡萄球菌 三 控制菌检查 金黄色葡萄球菌检查 革兰染色 镜检 生化试验 血浆凝固酶试验 最终结果判断 增菌培养 供试品的处理 书写检验记录单 分离纯化 无菌落或无特征菌落 配培养基和稀释液 30 35 30 35 18 24h 24 72h 金黄色葡萄球菌检查流程图 卵黄氯化钠琼脂 金黄色 有乳浊圈 甘露醇发酵试验 血浆凝固酶试验 血浆凝块 液态血浆 三 控制菌检查 白色念珠菌检查 白色念珠球菌检查意义 三 控制菌检查 白色念珠菌检查 革兰染色 镜检芽管试验 有特征菌落 1 聚山梨酯80 玉米培养基 小结 对于外用药品 不得检出铜绿假单胞菌 金黄色葡萄球菌及白色念珠球菌 对于口服药品 不得检出大肠埃希菌 对于原药材 控制大肠菌群数量 第四节 无菌检查方法 第四节 无菌检查方法 阳性对照试验 阳性对照菌液 供试品 金黄色葡萄球菌 无抑菌作用或抗G 菌 大肠埃希菌 抗G 菌为主的供试品 生孢梭菌 抗厌氧菌的供试品 白色念珠菌 抗真菌的供试品 阳性对照菌选用原则 阴性对照试验 以无菌检查所用稀释剂做阴性对照 不得长菌 一 直接接种法 二 薄膜过滤法 50ml硫乙醇酸盐流体培养基 50ml改良马丁培养基 阳性对照 30 35