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生物学实验教学论讲义3生物学实验教学论讲义3【实验8】用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体【实验目的】使用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体的形态和分布【实验原理】1、叶肉细胞中的叶绿体，散布于细胞质基质中，呈绿色，扁平的椭球形或球形。可以在高倍显微镜下观察到它的形态和分布。2、线粒体普遍存在于植物细胞和动物细胞中。线粒体的形态多样，有短棒状、圆球形，线形，哑铃形。3、键那绿（Janusgreen）染液：是专一性，染线粒体的活细胞染液。可以使活细胞中的线粒体呈蓝绿色。而细胞质接近无色。线粒体能在键那绿染液中维持活性数小时。、通过染色，可以在高倍显微镜下观察到生活状态的线粒体的形态和分布。【实验准备】新鲜叶（菠菜叶或黒藻）/新鲜草本盆花/木本盆花；新配制的质量分数为的键那绿染液（将.键那绿溶剂于生理盐水中，加温到使其充分溶解）。显微镜、载波片、盖玻片、镊子、滴管、消毒牙签、铅笔【实验设计】（一）制作鲜类叶片临时装片：1、取材：用镊子取一片藓类的小叶，把根部去掉。或者取菠菜叶稍带些叶肉的下表皮。2、制片：往载玻片中央滴一滴清水。用镊子夹住所取的以上小叶或下表皮，放入清水滴中。盖上盖玻片。注意：临时装片中的叶片不能放干了，要随时保持有水状态。3、制作人口腔上皮细胞临时装片：在洁净的载波片中央滴一滴键那绿染液。用消毒的牙签在自己漱静的口腔内壁上轻轻地刮几下；把牙签上附有碎屑的异端，放在染液中涂几下；盖上盖玻片。（二）用显微镜观察叶绿体：1、用低倍显微镜观察：对光：转动显微镜的转换器，让一个高倍物镜对准载物台中央的通光孔。转动遮光器使一个大光圈对准通光孔。左眼向目镜里看。同时右手转动反光镜，（光线弱时，用凹面反光镜。光线强时，用平面反光镜。）当视野中看到一个明亮的光圈时，光就对好了。低倍显微镜观察： 将制好的叶的临时装片，放在载物台上。让要看的物体在通光孔的正中央。用手逆时针（向内下）转动粗准焦螺旋，使镜筒徐徐下降，到快要接近装片为止。左眼注视目镜内的视野。用手顺时针（向外下）转动粗准焦螺旋，使镜筒徐徐上升，到看到叶片为止。转动细准焦螺旋，直到看清为止。低倍镜下：小、多、亮。2、用高倍镜观察叶绿体：换用高倍镜观察：找一个细胞、或细胞的一部分。移到通光孔正中央。转动转换器，让一个高倍物镜头对准通光孔。来回转动细准焦螺旋，直到看清细胞为止。如果视野太暗：可以用大光圈，凹面反光镜。高倍镜下：大、少、暗。观察叶绿体：仔细观察叶片细胞内的叶绿体的形态。仔细观察叶绿体的分布情况。绘图：用铅笔画一个叶片细胞。画出叶绿体的形态和分布情况。3、观察线粒体：在高倍显微镜下观察经过染色的人的口腔上皮细胞临时装片。可以看到蓝绿色的线粒体。细胞质接近无色。高倍显微镜下观察叶绿体和线粒体（已经染过色）。【注意事项】【常见问题】【实验改进】【教学建议】【实验思考】1、细胞质基质中的叶绿体，是不是静止不动的？为什么？ 答：叶绿体在细胞质基质中不是静止不动的。 因为，呈椭圆形的叶绿体在不同的光条件下，可以运动。这种运动能够随时改变椭圆形的方向，使叶绿体既能接受较多的光照，又不至于被强光灼伤。在强光下：叶绿体以其椭球体的侧面朝向光源。（接受光较少）在弱光下：叶绿体以其椭球体的正面朝向光源。因此，不同光照条件下，采集的葫芦藓，其小叶内叶绿体椭球体的形状不完全一样。2、叶绿体的形态和分布，与叶绿体的功能有什么？答： 叶绿体的形态和分布都有利于接受光照，完成光合作用。如，叶绿体呈椭圆形它能够在不同光照条件下改变方向。又如，叶肉细胞中的栅栏组织，其中的叶绿体的分布，比海绵组织的多，可以接受更多的光照。【实验9】用高倍显微镜观察叶绿体和细胞质流动1. 若用菠菜叶做观察叶绿体的实验材料，要取菠菜叶的下表皮而稍带些叶肉，其原因是（ ）A. 下表皮细胞含有叶绿体较多 B. 叶绿体主要存在于叶肉细胞中C. 上表皮细胞无叶绿体 D. ABC三项都正确2. 生命活动旺盛的细胞中，下列哪些部分不具备流动性（ ）A. 细胞壁 B. 细胞膜C. 细胞质D. 叶绿体3. 在视野右下方发现一后期的细胞，要将其移至视野正中，应将装片移向（ ） A. 左上方B. 左下方 C. 右上方D. 右下方4. 用显微镜观察时，先用低倍镜观察后，后用高倍镜观察，所看到的现象，后者比前者（ ）A. 物象较大，视野较亮B. 物象较小，视野较亮C. 物象较大，视野较暗 D. 物象较小，视野较暗5. 植物叶片含叶绿体较多的是（ ）A. 下表层B. 叶肉海绵组织C. 叶肉栅栏组织D. 导管6. 在用黑藻作实验材料观察细胞质的流动时，在制成装片之前，应事先将黑藻放在光下培养或放在2025的水中，其目的是（ ）A. 加速细胞质的流动 B. 防止其死亡 C. 增强光合作用 D. 使代谢旺盛7. 高倍显微镜下看到的叶绿体是（ ）A. 绿色、棒状 B. 绿色、扁平的椭球形或球形 C. 红色、棒状 D. 红色、扁平的椭球形或球形8. 在高倍显微镜下观察细胞质流动时，可看到（ ）A. 细胞质沿着细胞质膜在流动 B. 细胞质围绕着叶绿体运动C. 细胞质围绕着线粒体运动 D. 细胞质围绕着细胞核运动9. 观察黑藻叶的细胞质流动，最佳观察位置是（ ）A. 叶片边缘细胞 B. 叶片表皮细胞 C. 保卫细胞 D. 主脉处细胞10. 细胞质流动的速度与下列因素无关的是（ ）A. 光照 B. 温度 C. 酶 D. 细胞含水量 11. 在使用物镜为10和目镜为5镜头观察到根尖生长点细胞后，不移动装片的位置，又换用物镜为40目镜为5的镜头观察同一部位，所见的细胞比前一次（ ）A. 多且大 B. 少且小 C. 大且少 D. 小且多12. 下列关于细胞质流动的叙述中，不正确的是（ ）A. 细胞质流动的标志是叶绿体等颗粒位置的移动B. 细胞质流动的速度，在不同的温度等环境条件下有所不同C. 细胞质流动的方式是多样的，有的沿细胞壁作环形流动，也有管状或线条状细胞质的流动。D. 有的植物的细胞质能流动，有的不流动，所以实验时应选好材料。二. 简答题：1. 制作菠菜叶的临时装片时，应取菠菜叶的 表皮并稍带些叶肉为观察对象，因为该细胞内的叶绿体的体积 ，而且数目 。高倍镜下可观察到叶绿体分布于 中，并随细胞质的流动而 。2. 下图是高倍镜下观察到的黑藻叶细胞图，回答下列问题：（1）为了看到细胞质处于不断流动状态，最好选择图中的_作为参照物.（2）图中箭头表示_。（3）联系该图，说明为何黑藻叶片是细胞质流动的观察试验的理想材料？ 。（4）加速细胞质流动的方法有 。3. 下图是光学显微镜的一组镜头，目镜标有5和15字样，物镜标有10和40字样。请看图回答：（1）要仔细观察叶绿体的形态时，显微镜的目镜、物镜及其与盖玻片间距离的组合为 _（用标号作答）。此时放大的倍数为 。 （2）在观察叶绿体时，和的显微视野中比较明亮的是 。（3）若在低倍镜视野中发现有一异物，当移动装片时，异物不动，转换高倍镜后，异物仍可观察到，此异物可能在 A. 物镜上 B. 目镜上 C. 装片上 D. 反光镜上4. 在观察黑藻细胞内细胞质流动的实验中：（1）制作临时装片时，用镊子从黑藻的新鲜枝上取下 ，放在载玻片的 中，盖上 。（2）先用 观察，旋转 ，再用 仔细观察。（3）黑藻细胞中的叶绿体随着 流动，其流动方式是 。（4）叶片各个细胞中叶绿体的流动方向是否一致？ （5）细胞中这种流动状态，对于活细胞完成生命活动的意义是 1. 若用菠菜叶做观察叶绿体的实验材料，要取菠菜叶的下表皮而稍带些叶肉，其原因是（ ）A. 下表皮细胞含有叶绿体较多 B. 叶绿体主要存在于叶肉细胞中C. 上表皮细胞无叶绿体 D. ABC三项都正确2. 生命活动旺盛的细胞中，下列哪些部分不具备流动性（ ）A. 细胞壁 B. 细胞膜C. 细胞质D. 叶绿体3. 在视野右下方发现一后期的细胞，要将其移至视野正中，应将装片移向（ ） A. 左上方B. 左下方 C. 右上方D. 右下方4. 用显微镜观察时，先用低倍镜观察后，后用高倍镜观察，所看到的现象，后者比前者（ ）A. 物象较大，视野较亮B. 物象较小，视野较亮C. 物象较大，视野较暗 D. 物象较小，视野较暗5. 植物叶片含叶绿体较多的是（ ）A. 下表层B. 叶肉海绵组织C. 叶肉栅栏组织D. 导管6. 在用黑藻作实验材料观察细胞质的流动时，在制成装片之前，应事先将黑藻放在光下培养或放在2025的水中，其目的是（ ）A. 加速细胞质的流动 B. 防止其死亡 C. 增强光合作用 D. 使代谢旺盛7. 高倍显微镜下看到的叶绿体是（ ）A. 绿色、棒状 B. 绿色、扁平的椭球形或球形 C. 红色、棒状 D. 红色、扁平的椭球形或球形8. 在高倍显微镜下观察细胞质流动时，可看到（ ）A. 细胞质沿着细胞质膜在流动 B. 细胞质围绕着叶绿体运动C. 细胞质围绕着线粒体运动 D. 细胞质围绕着细胞核运动9. 观察黑藻叶的细胞质流动，最佳观察位置是（ ）A. 叶片边缘细胞 B. 叶片表皮细胞 C. 保卫细胞 D. 主脉处细胞10. 细胞质流动的速度与下列因素无关的是（ ）A. 光照 B. 温度 C. 酶 D. 细胞含水量 11. 在使用物镜为10和目镜为5镜头观察到根尖生长点细胞后，不移动装片的位置，又换用物镜为40目镜为5的镜头观察同一部位，所见的细胞比前一次（ ）A. 多且大 B. 少且小 C. 大且少 D. 小且多12. 下列关于细胞质流动的叙述中，不正确的是（ ）A. 细胞质流动的标志是叶绿体等颗粒位置的移动B. 细胞质流动的速度，在不同的温度等环境条件下有所不同C. 细胞质流动的方式是多样的，有的沿细胞壁作环形流动，也有管状或线条状细胞质的流动。D. 有的植物的细胞质能流动，有的不流动，所以实验时应选好材料。二. 简答题：1. 制作菠菜叶的临时装片时，应取菠菜叶的 表皮并稍带些叶肉为观察对象，因为该细胞内的叶绿体的体积 ，而且数目 。高倍镜下可观察到叶绿体分布于 中，并随细胞质的流动而 。2. 下图是高倍镜下观察到的黑藻叶细胞图，回答下列问题：（1）为了看到细胞质处于不断流动状态，最好选择图中的_作为参照物.（2）图中箭头表示_。（3）联系该图，说明为何黑藻叶片是细胞质流动的观察试验的理想材料？ 。（4）加速细胞质流动的方法有 。3. 下图是光学显微镜的一组镜头，目镜标有5和15字样，物镜标有10和40字样。请看图回答：（1）要仔细观察叶绿体的形态时，显微镜的目镜、物镜及其与盖玻片间距离的组合为 _（用标号作答）。此时放大的倍数为 。 （2）在观察叶绿体时，和的显微视野中比较明亮的是 。（3）若在低倍镜视野中发现有一异物，当移动装片时，异物不动，转换高倍镜后，异物仍可观察到，此异物可能在 A. 物镜上 B. 目镜上 C. 装片上 D. 反光镜上4. 在观察黑藻细胞内细胞质流动的实验中：（1）制作临时装片时，用镊子从黑藻的新鲜枝上取下 ，放在载玻片的 中，盖上 。（2）先用 观察，旋转 ，再用 仔细观察。（3）黑藻细胞中的叶绿体随着 流动，其流动方式是 。（4）叶片各个细胞中叶绿体的流动方向是否一致？ （5）细胞中这种流动状态，对于活细胞完成生命活动的意义是 【参考答案】一. 选择题1. B 2. A 3. D 4. C 5. C 6. A 7. B 8. A 9. D 10. C 11. C 12. D二. 简答题1. 下，大，少，细胞质基质，流动2.（1）叶绿体 （2）细胞质的环流方向 （3）黑藻的幼嫰叶片只一层细胞，便于用显微镜观察，并且细胞含水量较高 （4）放在光下培养;放在2025的温水中；切割部分叶片3.（1） 600 （2） （3）B4.（1）一片幼嫩的小叶 水滴 盖玻片 （2）低倍镜 转换器 高倍镜 （3） 细胞质 转动式 （旋转式） （4）一致 （5）随着细胞质的不断旋转流动，叶绿体、线粒体等细胞器和无机盐、蛋白质、各种没等物质遍布整个的细胞，有利于细胞进行新陈代谢等各种生命活动【实验10】检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质【实验目的】尝试用各种化学试剂检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质，讨论本实验内容的教学【实验原理】略【实验准备】材料、用具、仪器、药品：苹果或梨匀浆，马铃薯匀浆，花生种子匀浆，豆浆，鲜肝提取液；斐林试剂（NaOH和CuSO4），苏丹III或苏丹IV，酒精，碘液【安全事项】1、在鉴定还原性糖的实验中，对试管中的溶液进行加热时，试管底部不要触及烧杯底部。2、试管口不要朝向实验者，以免沸腾的溶液冲出试管，造成烫伤。或者在提取液与斐林试剂混合后，可用酒精灯直接加热，可缩短实验时间和增加安全性。【实验设计】略【注意事项】1、对量的控制：组织样液与斐林试剂等量；2、对时间和顺序的控制：先将斐林试剂的A液和B液混合均匀后再与组织样液反应；现用现配（斐林试剂不稳定）；3、对温度的控制：隔水加热；4、组织样液与斐林试剂经过震荡充分混合均匀。4、在鉴定脂肪的实验中，应注意切片要薄，切片不薄影响实验效果；同时用苏丹染色时间不宜过长。【常见问题】（1）可溶性还原糖的鉴定实验中，为什么要选择含糖量高的植物组织？为什么要选择白色或者近于白色的植物组织？（2）试剂的配制：斐林试剂与双缩脲试剂都由Na0H和CuS04组成，两者有何不同? A、溶液浓度不同 B、使用原理不同 斐林试剂实质是新配制的一定浓度的Cu(OH)2溶液，在加热条件下，与加入的葡萄糖(可溶性还原糖，分子内部含有还原性半缩醛羟基)能够生成砖红色的Cu2O沉淀，而葡萄糖本身氧化成葡萄糖酸。 双缩脲试剂实质是在碱性环境下的Cu2+与双缩脲(H2NOC-NHCONH2)作用，形成紫色或紫红色的络合物。 C、使用方法不同 斐林试剂使用时，先把NaOH溶液和CuS04溶液混合，而后立即使用。 双缩脲试剂使用时，先加NaOH溶液，然后加入CuS04溶液。（3）为何在该实验中，一般不选用双子叶植物的叶子和单子叶植物的叶片?在双子叶植物中，光合作用的主要产物葡萄糖形成后合成淀粉，暂时储存在叶片内，因此最好不选用双子叶植物的叶片作实验材料。在单子叶植物如韭菜、鸢尾，并不将光合作用的初始产物转变为淀粉，因此叶内含有大量的可溶性还原糖，但是，由于叶片中叶绿素的颜色较深，对于鉴定时的颜色反应起到掩盖作用，导致实验现象不明显，因此也不选用单子叶植物的叶片。（4）为什么蛋白质要稀释?防止蛋白质与双缩脲反应后粘固在试管壁上，使反应不彻底，也不易洗刷试管。（5）反应过程中，出现的颜色变化及原因分别是什么? A、还原糖的实验 因先加入刚配制的Cu(OH)2溶液，故溶液