网织红细胞计数.doc

网织红细胞计数 1项目名称 网织红细胞计数2 检验目的21观察贫血疗效22骨髓移植后监测骨髓造血恢复23其他疾病协诊等 临床实验室3检验原理：网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞，其胞浆内尚存在有嗜碱性的RNA物质，甲蓝活体染色后，其胞浆内尚存在有嗜碱性的RNA物质，经煌焦油蓝或新亚呈浅蓝或深蓝色的网状结构。4性能参数41重复性42分析和计算参数：百分比（%）43样本量：染液量=1：144精密度5原始样品系统：全血6容器和添加剂类型容器采用真空负压专用抗凝管，添加剂类型为0.109M乙二胺四乙酸钾7试及显微镜71 10G/L新亚甲蓝（或煌焦油蓝）生理盐水溶液： 新亚甲蓝 1.0G 枸橼酸钠 0.4G 氯化钠 0.85G 溶于双蒸馏水100ML中，混匀，过滤后备用。72 显微镜721 商标8校准程序:显微镜的验证，光路系统校正 灯泡大约半年更换一次9程序步骤：91标本采集与要求911标本采集：抽取静脉血1.8ml，加入到含有乙二胺四乙酸钾溶液的抗凝真空试管中，并轻轻颠倒10次使之充分混匀，不得有凝块、不得形成泡沫，总量不得超过2.00.2ml，并在试管上做好标识。采血应避免溶血，采血后2小时内送到检验科，需要运输时应在低温条件下运输。采集标本时宜“一针见血”,以防止组织损伤。912不合格标本的处理 对凝固、有凝块、采血量不符合要求、无条码或无标识等不合格的标本,距采集时间超过2小时并且没有按要求储存的标本,按程序文件样品核收、登记和保存程序处理913标本保存检测应在标本采集后2小时内完成,28保存不超过4小时,分析后的标本保存三天。92检验前准备921把接收到的标本按顺序编写序号。922准备清洁、干燥、无尘、无油脂的载玻片、盖玻片、毛细管，玻璃笔。93病人标本的检验931取小试管1支加10G/L新亚甲蓝盐水溶液2滴。932加入末梢血（或EDTA钾抗凝静脉血）2滴于上述试管中，混匀。933室温下放置1015MIN后，取1滴制成薄片。934油镜下至少计数1000个红细胞中网织红细胞数。935计算 网织红细胞百分数=计数1000个红细胞中的网织红细胞数/1000 网织红细胞绝对数（个/L）=网织红细胞百分比数*红细胞数/L【注意】 1 活体染色时间不能过短。室温低时，放37摄氏度恒温箱。2 最好制两张片，每张计数1000个红细胞，避免分布不均引起的误差。涂片要薄而均匀，不使红细胞重叠。3 为计数方便，可于目镜中放一中间有孔硬纸，缩小视野便于计数。4 试剂应定期重配，以免变质沉淀。5 染液与血液比例约为1：1，严重贫血时可适量增加血液的比例。10质量控制101显微镜法 网织红细胞目视激计数误差较大，影响因素主要有：操作人对网织红细胞认识不同；血涂片的好坏；计数红细胞数量的多少和计数方法等。102仪器法 岁可计数红细胞1000050000个，但如存在Howell-Jolly小体、有核红细胞、巨血小板，则可见假阳性。11干扰12参考区间 网织红细胞百分数成人： 0.0050.015新生儿： 0.030.06儿童： 0.0050.015网织红细胞绝对数：成人： （2484）*10*9/L13实验室解释：131判断骨髓红细胞造血情况1311网织红细胞增多：表示骨髓红细胞生成旺盛。常见于：1.溶血性贫血，溶血时由于大量网织红细胞进入血液循环，RET可增至6%8%或以上，急性溶血时，可达到20%左右，严重者可在50%以上，绝对值常超过100*10*9/L。急性失血后510D网织红细胞达到高峰，2周后恢复正常。2.放射治疗和化学治疗后，造血恢复时，可见RET短暂和迅速增高，是表明检测幼稚RET的变化骨髓恢复较敏感的指标。3.红系无效造血时，骨髓检查表明红系增生活跃，而外周网织红细胞计数正常或仅轻度高。1312网织红细胞减少：见于再生障碍性贫血、溶血性贫血再障危象时。典型的再生障碍性贫血网织红细胞计数低于0.005，网织红细胞绝对值低于15*10*9/L,为诊断其标准之一。132观察贫血疗效 缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血治疗过程中，如RET增高，表明治疗有效，说明骨髓增生功能良好；如RET不增高，则表明治疗无效，并提示有骨髓造血功能障碍，需进一步检验。RET是贫血患者随访检查的项目之一。13.3骨髓移植后监测骨髓造血恢复 骨髓移植后第21天，如RET大于15*10*9/L，常表明无移植并发症；RET小于15*10*9/L，伴中性粒细胞和血小板增高，可能为骨髓移植失败。14.安全性防护措施141在操作显微镜时应按照仪器作业指导书进行操作,防止受伤、触电等142请带上橡胶手套进行染色、冲片,在工作完成后,用消毒液清洗双手,以免发生感染143在涂片时应小心谨慎,应始终戴上橡胶手套,以避免发生细菌感染,若样本溅入眼睛或者伤口,须用大量清水冲洗,并立即就诊144在配制染液时:如果试剂不慎落入眼睛,立即用大量清水冲洗,并接受治疗;如果不慎吞入试剂,立即向医生求助,喝入大量清水,并尽量呕出吞入试剂;如果试剂沾上皮肤或者手,用大量清水冲洗;在丢弃废液和消耗品时,请按照处理医疗、传染性、工业性废水的步骤进行处理,如果其中含有血样,可能导致细菌感染. 15变异的潜在来源1