染色体实验室质量控制.ppt

染色体实验室质量控制 一 室内质控 主要是培养基 常用试剂的室内质控 二 室间质控 定期与开展染色体检查的实验室合作 对同一血液标本进行实验对比 对实验中的不足之处进行改进 一 室内质控 1 外周血培养基质控程序目的 新购买的培养基需要做预实验以检测培养基的质量 避免因试剂的质量而影响实验结果 操作程序 1 取新购买的培养基 接种新鲜的外周血标本 每个标本接种两瓶培养基 每瓶培养基中接种 2 将接种好的培养基放入 培养箱中 培养 3 培养结束前 小时 加秋水仙素处理 4 收获细胞 5 将收获的细胞沉淀配成细胞悬液进行滴片 滴好的片放入烘箱中 烘烤 6 胰酶消化 吉姆萨染色 7 将玻片烘干后镜检观察 注意事项 接种过程中注意无菌操作 以免细菌污染导致实验结果异常 影响对培养基质量的判断 2 秋水仙素质控程序目的 新购买的秋水仙素需要做预实验以检测秋水仙素的质量 避免因试剂的质量而影响实验结果 操作程序 1 取培养基 接种新鲜的外周血标本 每个标本接种两瓶培养基 每瓶培养基中接种 2 将接种好的培养基放入 培养箱中 培养 3 培养结束前 小时 加新购买的秋水仙素处理 4 收获细胞 5 将收获的细胞沉淀配成细胞悬液进行滴片 滴好的片放入烘箱中 烘烤 6 胰酶消化 吉姆萨染色 7 将玻片烘干后镜检观察 注意事项 秋水仙素处理时要注意加入秋水仙素的量和作用时间 3 固定液质控程序目的 新购买的甲醇和乙酸需要做预实验以检测试剂的质量 避免因试剂的质量而影响实验结果 操作程序 在收获细胞的实验过程中使用新的固定液 制片后分析固定液的效果 1 按甲醇 乙酸 3 1比例配置固定液 2 预固定 加入1 5ml固定液 固定5min 3 第一次固定 加入8ml固定液 固定30min 4 第二次固定 加入8ml固定液 固定30min 5 配置细胞悬液滴片 80 烘烤3h 6 胰酶消化 吉姆萨染色 7 将玻片烘干后镜检观察 8 镜下观察细胞核型较多 染色体形态规则 分布均匀 条带清晰 则固定液效果良好 可以进行正常实验 4 胰酶质控程序目的 新配置的胰酶需要做预实验以检测胰酶的质量 避免因试剂的质量而影响实验结果 操作程序 1 配置胰酶工作液 工作液浓度 42ml生理盐水 8ml0 25 胰酶储存液 2 配置吉姆萨染液 储存液用蒸馏水1 10稀释 3 将烘烤好的玻片用胰酶消化 吉姆萨染色 4 将玻片烘干后镜下观察5 镜下观察染色体形态规则 条带清晰 则胰酶效果良好 可以进行正常实验 吉姆萨染液质控程序目的 新配置的吉姆萨染液需要做预实验以检测吉姆萨染液的效果 避免因试剂的质量而影响实验结果 操作程序 1 配置吉姆萨工作液 将吉姆萨染液储存液用蒸馏水1 10稀释 2 将经胰酶消化的玻片放入染缸中染色 一般染色3 5分钟 3 自来水冲洗干净后放入烤箱中烘干 4 镜下观察 细胞着色均匀 染色体的条带清晰 则染液的效果良好 可以进行正常实验 4 室内质控的失控处理在试剂的质控中 若发现试剂的使用效果不好 应重新配制 如果使用的是成品 应立即联系厂家更换产品 严重的要考虑更换厂家 对每一批新到的 新配制的试剂 都必须先做预实验 检测效果可以后才可以使用 二 室间质控 为了检测本科室实验方法的准确性 可重复性 实验室必须定期与其它实验室进行室间质控 操作程序 1 随即选取本实验室的几份新鲜血液标本送检其它实验室 进行细胞培养 制片 G显带分析 2 本实验室同样对这几份标本进行细胞培养 制片 G显带分析 3 对每一份标本分析两个实验室的结果 从细胞的形态 染色体的形态 条带等各方面进行分析 4 通过室间质控定期检验本实验室的准确性 三 常见差错处理 1 染色体检测的血液标本 都需肝素钠抗凝 如用其它抗凝剂抗凝 需通知相关人员予以重新采集标本 并在 标本接收和报告单发放记录本 及 不合格标本登记本 上记录存档 2 凡是待测定的血液标本有凝血的情况 应通知相关人员予以重新采集标本 并在 标本接收和报告单发放记录本 及 不合格标本登记本 上记录存档 3 凡是待测定的血液标本有血渗出的情况 应通知相关人员予以重新采集标本 并在 标本接收和报告单发放记录本 及 不合格标本登记本 上记录存档 4 染色体标本需严格无菌操作 采用经高温高压消毒的容器盛装 如标本送检不规范 应通知相关人予以重新采集标本 并在 标本接收和报告单发放记录本 及 不合格标本登记本 上记录存档 5 经查对标本的病人姓名 年龄 性别 住院号 床号 及检验号等不相符者 应通知相关人员予以重新采集标本 并在 标本接收和报告单发放记录本 及 不合格标本登记本 上记录存档 6 有的标本片 分裂相很多 但染色体 瘦小 是不是培养液营养不良引起 淋巴细胞一定要在良好的营养环境中才能生长增殖 分裂相多 说明了淋巴细胞生长旺盛 染色体 瘦小 是因为在制片过程中 染色体的蛋白结构发生异固缩造成的 起因可考虑为以下几个原因 秋水仙素浓度是否过高 或处理时间是否过长 加固定液的速度不要过快 有时瞬间的固定 会使蛋白结构产生固缩现象 固定液中的甲醇 冰醋酸是否有质量上的改变 可以适当加大固定液中的冰醋酸的比例 如甲醇 冰醋酸 3 1 5 7 为什么外周血培养过程中有时会出现凝血现象 在实验过程中下列原因可能会导致培养后的血液出现凝血现象 培养液中的PHA含量过高 培养液中的肝素使用量不足或效价下降 接种后 没有立即将外周血与培养液充分摇匀 8 为什么外周血培养有时会出现溶血情况 在实验过程中下列原因可能会导致培养后的外周血溶血 细菌污染 PHA和肝素过量 外周血样品不