高三生物 实验专项突破31 DNA的粗提取与鉴定 新人教版 课件.ppt

实验原理1 dna在不同浓度的nacl溶液中的溶解度不同 其中在物质的量浓度为0 14mol l时最低 2 dna不溶于酒精 但是细胞中的一些有机物如蛋白质则溶于酒精 可以用酒精提纯 3 dna遇二苯胺 沸水浴 会被染成蓝色 可用来鉴定dna分子 实验流程 1 做该实验时 不能用猪血代替鸡血 因为哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核 不能提取dna 2 制备鸡血细胞液时 要注意向鸡血中加柠檬酸钠 防止血液凝固 3 涨破细胞的方法 向血细胞中加入蒸馏水 血细胞溶液的浓度大于蒸馏水的浓度 从而使血细胞大量吸水而涨破 不能用生理盐水 因为血细胞溶液的浓度与生理盐水的浓度相当 所以血细胞在生理盐水中不能吸收水分 4 两次加入蒸馏水 第一次是为了使血细胞吸水涨破 第二次是为了降低氯化钠的浓度 有利于dna的析出 5 两次析出dna的方法 第一次是加入蒸馏水 降低氯化钠的浓度 促使dna析出 第二次是加入冷酒精 因为dna不溶于酒精溶液 6 鉴定dna时要用两支试管 其中不加dna的试管起对照作用 该试管溶液不变色 另一支加有dna的试管溶液变蓝色 选材时注意选用细胞易破碎 dna含量相对较高的生物组织 鉴定dna的二苯胺试剂要现配现用 否则会影响鉴定效果 2010 江苏卷 某生物兴趣小组开展dna粗提取的相关探究活动 具体步骤如下 材料处理 称取新鲜的花菜 辣椒和蒜黄各2份 每份10g 剪碎后分成两组 一组置于20 另一组置于 20 条件下保存24h dna粗提取 第一步 将上述材料分别放入研钵中 各加入15ml研磨液 充分研磨 用两层纱布过滤 取滤液备用 第二步 先向6只小烧杯中分别注入10ml滤液 再加入20ml体积分数为95 的冷酒精溶液 然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌 使絮状物缠绕在玻璃棒上 第三步 取6支试管 分别加入等量的2mol lnacl溶液溶解上述絮状物 dna检测 在上述试管中各加入4ml二苯胺试剂 混合均匀后 置于沸水中加热5min 待试管冷却后比较溶液的颜色深浅 结果如下表 注 越多表示蓝色越深 分析上述实验过程 回答下列问题 1 该探究性实验的课题名称是 2 第二步中 缓缓地 搅拌 这是为了减少 3 根据实验结果 得出结论并分析 结论1 与20 相比 相同实验材料在 20 条件下保存 dna的提取量较多 结论2 针对结论1 请提出合理的解释 4 氯仿密度大于水 能使蛋白质变性沉淀 与水和dna均不相溶 且对dna影响极小 为了进一步提高dna纯度 依据氯仿的特性 在dna粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是 然后用体积分数为95 的冷酒精溶液使dna析出 思路点拨 本题主要考查dna粗提取的相关知识 意在考查考生的实验与探究能力 如果dna断裂 就不容易被提取出来 温度主要是通过影响酶的活性来影响生理过程 粗提取得到的dna中含有少量的蛋白质 可以通过氯仿的特殊功能来去除蛋白质 提高dna纯度 答案 1 探究不同材料和不同保存温度对dna提取量的影响 2 dna断裂 3 等质量的不同实验材料 在相同的保存温度下 从