利骨素加强尼尔雌醇防治去卵巢大鼠骨元素代谢紊乱的作用.doc

利骨素加强尼尔雌醇防治去卵巢大鼠骨元素代谢紊乱的作用【摘要】用测定骨元素含量的方法，分析了尼尔雌醇及联合应用尼尔雌醇和利骨素对去卵巢大鼠骨元素代谢的影响。将健康4月龄雌性SD大鼠32只随机分成4组。A组：假去卵巢组；B组：去卵巢组；C组：去卵巢+CCE3（全量）组；D组：去卵巢+CCE3（半量）+利骨素。结果表明,去卵巢大鼠骨Ca、Mg、S、Mn、Zn等含量显著降低，P含量显著增加。单纯应用CCE3或联合应用CCE3和利骨素均可使去卵巢大鼠降低的骨Ca、Mg、S、Mn、Zn等含量显著回升，P含量显著回降，而后者使去卵巢大鼠降低的骨Ca、Mg、Zn、Co等含量回升的作用优于单纯应用CCE3，说明联合应用CCE3和利骨素对抗去卵巢大鼠骨元素代谢紊乱的作用强于单纯应用CCE3。提示利骨素可加强尼尔雌醇防治去卵巢大鼠骨元素代谢紊乱的作用。 【关键词】 SD大鼠；去卵巢；CCE3；利骨素；骨矿物元素 近年来对骨代谢及骨质疏松的研究引起人们对微量元素与骨代谢关系的关注。骨是宏量元素如钙、磷、镁等的贮存库，是否也是某些微量元素的贮存库尚有待研究。微量元素对维持机体的正常生理活动，维持内环境的稳态起着重要作用。骨组织具有稳定的物理特性，骨中成分的研究能够反映机体的健康状况，对骨代谢的研究有着重要意义。 尼尔雌醇（CCE3）对骨密度和骨组织形态学的影响已为人们所熟知1-3。而骨元素代谢对骨密度和骨组织形态、结构有极大影响。本课题组已经报道用含有Ca、Mg、Zn、S、Co、Mn等元素并按一定比例组成的利骨素，针对去卵巢大鼠丢失的骨元素给予补充，达到防治去卵巢大鼠骨矿盐丢失的作用4 。 本文观察CCE3和利骨素对去卵巢大鼠骨元素含量的影响及它们是否有协同作用。 1 材料和方法 11 动物分组及实验安排 普通级4月龄SpragueDawley (SD)雌性大鼠32只（广东医学院实验动物中心提供，实验动物合格证书编号：粤检证字2002A013号），按体质量从轻到重编号，用抽签法将动物随机分成4组：首先抽到的号码其对应的动物分到A组，其次分到B组，再者分到C组，最后抽到的号码其对应的动物分到D组，然后重复，每组8只。A组：假去卵巢组（SHAM）；B组：去卵巢组（OVX）；C组:去卵巢+CCE3组（OVX+CCE3）；D组：去卵巢+CCE3（半量）+利骨素实验期间，各组大鼠自由摄食（广东省卫生厅南海实验动物中心生产的标准固体饲料），经IPC（IRIS/AP等离子体发射光谱仪，美国TJA公司，下同）测定，每1 g固体饲料所含的矿物元素为：Ca 16.35×10-3g，Mg 2.90×10-3g，Zn 41.56×10-6g，P 4.60×10-3g，S 2.48×10-3g，Co 1.58×10-6g，Mn 44.40×10-6g，自由饮水。各组大鼠照明、通风、温度、湿度等饲养环境条件相同。 1.2 模型的建立 B、C、D组大鼠用1%戊巴比妥钠腹腔麻醉（3 mL/kg体质量），无菌条件下，经腹部正中线切口，切除双侧卵巢。切下的卵巢经组织学鉴定。A组动物手术过程及操作与B、C、D组同，但不切除卵巢，只切除腹腔内一小块脂肪组织，经组织学鉴定。 C组大鼠给予CCE3灌胃：用每片含CCE3 2 mg的CCE3片剂（上海华联制药厂）研成粉末状，加蒸馏水配成0.17 mg/mL的溶液，按每100 g体质量0.6 mL（即每100 g体质量0.1 mg）灌胃，于去卵巢手术后第2 d开始，每周1次，持续11周。CCE3溶液于每次灌胃前配制，即配即灌。 D组大鼠给予半量CCE3灌胃，方法同C组。给予半量CCE3灌胃的同时，D组大鼠给予利骨素灌胃：每1 mL利骨素含Ca 6.66 mg;Mg 0.039 mg;Zn 8.54×10-3mg ;P 7.32×10-3mg;S 0.025 mg;Co 0.078 mg;Mn 0.61×10-3mg,按利骨素混悬液3.0 mL/kg.于去卵巢手术后的第2 d开始灌胃，1次/d，持续11周。 1.3 指标测定及方法 各组实验动物分别于第10周末实验结束时称体质量，动脉放血处死，取右尺骨，剥净软组织后置烤箱中于110°C温度下烤至恒质量，于1/10万分析天平上称质量，后装入10 mL安瓿中，加6 mol/L盐酸5 mL，加热封口，置烤箱中110°C烤16 h，让其溶解，开瓿过滤，将滤液稀释50倍后置于IPC上测定Ca，P，S，Mg，Zn，Co，Mn等元素含量。 1.4 数据处理 各组数据以均数标准差(xs)表示，数据比较采用单因素方差分析。统计学分析以SPSS 13.0软件进行数据分析。 2 结 果 2.1 去卵巢对大鼠骨元素含量的影响 见表1。表1 去卵巢对大鼠骨元素含量的影响从表1结果可见，去卵巢大鼠骨Ca、Mg、S、Zn、Mn等元素含量减少显著（P0.05）。P含量显著增加（P0.05），Co含量略减少。 2.2 CCE3或联合应用CCE3和利骨素，对去卵巢大鼠骨元素含量的影响 见表2。 表2 CCE3或联合应用CCE3和利骨素对去卵巢大鼠骨元素含量的影响从表2结果可见,CCE3可使去卵巢大鼠骨Ca、S、Mg、Zn、Mn等元素含量增加显著(P0.05），P含量减少，Co含量略增加。联合应用CCE3和利骨素则使去卵巢大鼠骨Ca、S、Mg、Zn、Co、Mn等元素含量增加显著(P0.05)，较单纯应用CCE3纠正去卵巢大鼠骨Ca、Mg、Zn、Co等元素含量的效果更为显著。 3 讨 论 雌激素替代疗法（HRT）虽然可以延缓绝经后妇女的骨量丢失，但其副作用仍为医师和患者忧虑。尼尔雌醇的副作用虽较少而轻，但临床研究表明，其副作用阴道出血者10.90%，乳房胀或触痛者9.09%5。为使HRT的副作用控制在最小范围，目前通常的做法是雌激素与孕激素、雄激素联合用药，以降低其用量。 本文观察了CCE3或联合应用CCE3和利骨素对骨元素含量的影响。结果发现，切除双侧卵巢大鼠骨Ca、Mg、Zn、S、Mn等元素含量减少显著（P0.05），P含量显著增加（P0.05），Co含量略减少。 CCE3使去卵巢大鼠骨Ca、Mg、S、Zn、Mn等元素含量增加显著（P0.05），P含量显著降低（P0.05）。说明CCE3能对抗去卵巢所引起的骨元素代谢紊乱，也就是CCE3可防治去卵巢大鼠骨元素代谢紊乱。 联合应用CCE3和利骨素使骨Ca、Mg、Zn、Co等元素含量增加较单纯应用CCE3对骨元素含量的影响作用显著。说明利骨素可加强CCE3防治去卵巢大鼠骨元素代谢紊乱的作用。由牡蛎和海螵蛸富含钙和其它微量元素按一定比例组成的利骨素，能加强CCE3对抗去卵巢大鼠骨元素丢失的作用，可考虑联合用药时减少CCE3的用量，降低CCE3的副作用。在应用CCE3防治骨质疏松时，若同时补充利骨素，可加强CCE3的疗效。【参考文献】 1史炜镔.尼尔雌醇作用下去势兔骨组织形态计量学改变J.中华妇产科，1997，32（9）：544547.2李朝阳,黄莲芳,李青南，等.尼尔雌醇对去卵巢大鼠骨代谢影响的定量研究J.中国老年学,1996,16（4）：227229.3史敏，巴雅，杜红,等.绝经后妇女尼尔雌醇治疗前后骨密度及骨代谢的变化J.中国骨质疏松，1999，5（1）：4