普通病毒学(英文版)《GENERAL VIROLOGY》翻译,快速诊断.doc

GENERAL VIROLOGY普通病毒学18. DIAGNOSTIC VIOLOGY 第18章 诊断病毒学Page：514-526Rapid Diagnosis快速诊断Rapid diagnosis of both HSV and VZV infections can be accomplished by FA staining. For this technique, cells from the base of a lesion are obtained by scraping the base with a scalpel blade or rubbing vigorously with a Dacron or rayon swab, and placing the material obtained on one or more microscope slides. This material is air dried, fixed with acetone, and then stained with fluorescent-labeled monoclonal antibodies to HSV and VZV. This technique is particularly advantageous for VZV because of the difficulty of culturing that virus . FA staining is preferable to a Tzanck smear because it allows specific viral identification and is more sensitive. PCR can be used to detect HSV or VZV DNA in cutaneous lesions with greater sensitivity than cell culture.通过FA 染色可以实现对HSV和VZV感染的快速诊断。这种方法，用手术刀片刮或用涤纶、人造丝拭子用力摩擦来制造病变，并从病变基处来获得细胞。放置在一个或几个载玻片上，材料干燥后,用丙酮固定, 然后以荧光标记的 HSV和VZV的单克隆抗体染色。 这种方法对较难培养的VZV更为有利。FA染色是一种较好的Tzanck涂片方法，因为它能够对特定的病毒进行检测并且敏感性较高。PCR的方法用来检测病变皮肤中的HSV 或VZV DNA比细胞培养的方法更敏感。Serology血清学Serology has little role in the diagnosis of acute HSV infection because viral culture or antigen detection is usually successful, because serology requires acute and convalescent phase specimens, and because of difficulties in interpretation related to cross-reactions as well as asymptomatic reactivations. VZV serology is occasionally useful for diagnosis of acute VZV if appropriate specimens were not obtained for culture and antigen detection or if those tests were negative despite a clinical impression that VZV was the true diagnosis. Detection of seroconversion is the strongest serologic evidence of infection, although detection of VZV-specific IgM antibodies also supports the diagnosis of recent infection. Virus-specific IgM antibodies can be present with reactivation (zoster) as well as with primary infection.血清学检测对急性HSV感染的诊断意义较小。因为血清学检测需要有急性期的和恢复期的标本，而且难以解释交叉反应和阴性感染。通过病毒培养或抗原检测则往往更易成功。对于那些虽有VZV的临床表现但没有得到相应的标本来培养病毒或抗原检测为隐性，VZV血清学检测通常是有用的。血清转化实验是感染的最好的血清学证据，虽然VZV-特异IgM 抗体的检出也是近期感染的证据。继发感染和原发感染可能会共同出现病毒特异的IgM 抗体。Serology is widely used for determination of immune status, especially to VZV. The reference test for this purpose is the fluorescent antibody to membrane antigen test , but EIA, IFA, and latex agglutination assays are more widely used. None of these assays has optimal sensitivity for detection of VZV antibodies produced in response to varicella immunization. Latex agglutination is more sensitive than EIA or IFA for this purpose, although it is less sensitive than an EIA that uses purified glycoproteins as antigen . The latter assay is not commercially available at the current time.血清学检测通常用来判定免疫状态,尤其是对VZV。为达这一目的的参考试验是对膜抗原的荧光抗体检测 , 但是 EIA ，IFA 和乳胶凝集反应的更为常用。这些检测没有一个对由于水痘免疫接种而产生的 VZV 抗体的检测比较敏感。为达这一目的乳胶凝集反应比 EIA 和 IFA更敏感, 虽然它没有EIA对抗原蛋白的纯化更敏感。 后种方法检测现在还未商业化应用。Assays have become available that accurately distinguish antibodies made in response to HSV-1 or HSV-2 infection. These assays detect antibodies to type-specific glycoproteins, such as glycoprotein G. These assays may be useful in several settings. For example, in individuals with recurrent genital lesions who have never had a positive culture, detection of HSV-2 antibodies suggests that the genital lesions are probably herpetic. Type-specific antibody testing may also be useful for counseling couples. For example, if one partner is known to have HSV-2 infection, testing the other partner may reveal prior infection, suggesting no risk of transmission, or alternatively, absence of infection, indicating susceptibility and highlighting the need for precautions to prevent transmission. Testing of pregnant women may be helpful in identifying those who are seronegative but have a seropositive partner. These couples should take precautions to avoid transmission during the pregnancy. Pregnant women who are seropositive should be monitored with particular care taken to identify the presence of active lesions at the time of delivery. The issues involved in the use of type-specific HSV serology are complex and require much further evaluation.HSV-1 或 HSV-2 感染产生的抗体已有正确的检测方法。这些检测方法已发现抗体类型特异的糖蛋白, 如糖蛋白G。这些检测方法在一些情境是有用的。例如，在一粒再发性生殖障碍个体中没有病毒培养阳性， HSV-2 抗体的检出意味着生殖障碍可能是疱疹病毒感染。类型特异性抗体检测对前来咨询的夫妇也是有用的。 例如，如果一对夫妇中知道有一位HSV-2 感染, 检测另一方可能发现前期感染，没有传染危险, 或者，缺乏感染力, 指出易感性而且加强警惕避免传染是必要的。对那些血清反应阴性，但有一个血清反应阳性配偶孕妇检测是有益的。 这些夫妇应该警惕在妊娠期间避免传染。 血清试验阳性的孕妇在分娩时候应该特别监护，检测病变出现。 参与类型特异 HSV 血清学的使用议题是复杂的并且加需要进一步的评价。B VirusB病毒Most cases of human B virus infection have occurred after a bite or other exposure to infectious secretions or excretions from a monkey infected with B virus. Symptomatic disease may not be apparent in the monkey. Typically, a vesicular lesion develops at the site of the bite, leading to lymphangitis and regional lymphadenopathy, followed by ascending encephalomyelitis. Recommendations for evaluation and treatment of suspected cases have been published by an expert working group. When B virus infection is suspected, specimens should be obtained from mucocutaneous lesions using a Dacron or cotton swab. CSF and conjunctival and pharyngeal swabs can also sometimes yield the virus, which grows in several types of primary and continuous monkey kidney cell cultures. Attempts to isolate the virus should be carried out only by appropriate reference laboratories with the necessary biologic safety capabilities (see later for listing of qualified laboratories). PCR may also be used to detect B virus. Acute and convalescent serum specimens should also be obtained, although cross-reactions with HSV can make interpretation difficult.大多情况下，人类感染B病毒是由于被感染了B病毒的猴子咬伤或接触了感染B病毒猴子的具有传染性的分泌物或排泄物。而猴子身上可能并未表现出这种疾病的明显症状。典型的是，在人被咬伤部位形成的一个小病变会引起淋巴管炎和局部淋巴结病, 继而发展成为上行性脑脊髓炎。一个专家工作组已经发表了对疑似病例的诊断和治疗建议（95）。当怀疑为B病毒感染时，应该用涤纶或棉签从皮肤黏膜损伤处采集样本。用拭子擦拭CSF、结膜和咽有时也能得到该病毒, 这种病毒能在几类原代和传代猴肾细胞上生长。分离该病毒只能在具有必要生物安全能力(参考相应标准)的实验室进行 (见后所列具备资格的实验室)。PCR也可以用来检测B病毒。还应该采集急性期和恢复期的血清样本,尽管很难区别此病毒和HSV的交叉反应。The following laboratories provide consultation as well as testing for B virus:下列实验室可提供关于B病毒的咨询和实验:l Julia K. Hilliard, Ph.DSouthwest Foundation for Biomedical ResearchDepartment of Virology and Immunology7620 Northwest Loop 410San Antonio, Texas 78228Telephone (210) 674-1410 extension 280; or (210) 673-3269Pager 1-800-443-7243; ID 011422l Seymour S. Kalter, Ph.D.Virus Reference Laboratory7540 Louis Pasteur DriveSan Antonio, Texas 782229l David Brown, M.R.C. Path.Virus Reference DivisionCentral Public Health Laboratory61 Colindale AvenueLondon NW9 5HT, EnglandTelephone 081-200-4400Betaherpesvirinae疱疹病毒亚属The betaherpesvirinae include CMV, HHV-6, and HHV-7. These viruses are characterized by restricted host range, slow growth in culture, enlargement of infected cells, and latency in secretory glands and lymphoreticular cells. These viruses are widespread in the population, usually causing asymptomatic infection, but sometimes causing serious disease, especially in immunocompromised patients. The diagnosis of infection with these viruses is complicated by the frequent presence of these viruses in the absence of clinically significant manifestations. Thus, the presence of the virus, particularly in saliva or urine, is not diagnostic of disease. General approaches to this problem involve detection of the virus in less usual sites, such as blood; detection of the viruses in tissue, along with histologic examination to provide evidence that the infection is associated with pathologic findings; and quantitation of the level of virus present. For CMV, a number of laboratory methods are well established, including culture, antigen detection, nucleic acid detection, and serology.疱疹病毒亚属包括 CMV，HHV-6和HHV-7。这类病毒显著特点是：宿主范围限制性，培养生长缓慢，被感染细胞增大，潜伏在分泌腺和淋巴网状内皮细胞内。这类病毒在人群中广泛流传, 通常引起隐性感染, 但有时会引起严重的疾病, 尤其是在免疫力低下的病人中。诊断这类病毒感染比较复杂，因为经常会出现没有显著临床特征的情况。因此,检测出该病毒, 尤其是在唾液或尿液中,并不能诊断为疾病。通常解决这个问题的方法是在不常见部位检测出病毒, 如血液、组织，结合组织学诊断以提供证据证实该感染伴随有病理变化；而且病毒数量比较大。对于 CMV 的检测，已建立了许多很好的实验室方法,包括培养法，抗原检测，核酸检测和血清学检测。 Cytomegalovirus细胞巨化病毒Culture培养CMV can be readily cultured in the diagnostic virology laboratory, although the virus is labile, and rapid transport to the laboratory is important (160). CMV grows only in human fibroblast cells and typically requires 7 to 21 days to exhibit CPE. For this reason, the shell vial technique is important because it provides results within 24 to 48 hours. Its sensitivity compared with that of conventional culture varies widely among individual laboratories but can be comparable or greater. The interpretation of CMV cultures can be difficult because of frequent shedding of the virus in saliva and urine in symptom-free individuals. Cultures of blood are more helpful diagnostically because asymptomatic CMV viremia does not occur in nonimmunocompromised hosts. In the immunocompromised patient, positive blood cultures indicate active infection but may occur in the absence of symptoms. Culture of CMV from urine or saliva usually has little diagnostic significance.尽管CMV不稳定，只要是将其迅速地送到诊断病毒学实验室，CMV还是很容易培养的。(160) CMV只在人成纤维细胞中生长并且出现典型CPE需要 721天。 因此, 小玻璃瓶密封技术尤为重要因为它能在 2448小时内显示结果。与常规培养相比,虽然它的诊断敏感性在不同实验室之间差异很大，但还是可以比较的。解释CMV培养结果可能比较困难，因为在无症状个体的唾液和尿液中经常会检测到病毒。因为在非免疫抑制宿主个体中不会出现无症状的CMV病毒血症，所以通过从血液中分离培养病毒来进行诊断是有效的。在免疫抑制的病人中，血液培养阳性说明有病毒感染，但可能没有症状出现。从尿液或唾液中分离培养的CMV通常诊断价值不大。以下为pp65 Antigenemia Assaypp65 抗原血症检测The pp65 antigenemia assay is commercially available in both FA and IP formats and is widely used for the rapid diagnosis of CMV infection. In this assay, leukocytes are separated from other blood elements, spotted onto a microscope slide, and stained using a monoclonal antibody to pp65, the CMV lower matrix phosphoprotein. The assay has a number of desirable attributes, including potential availability of results within a few hours of receipt of the blood sample in the laboratory, sensitivity exceeding that of culture, capability of providing quantitative data, and a strong although not perfect correlation with the presence of clinically significant infection. A concern in the use of the assay, particularly for quantitative purposes, is that the antigen is labile, and results may be inaccurate if transport to the laboratory takes more than 24 hours.pp65抗原血症FA 和IP片段已有商业化检测方法，并且对CMV 感染的快速诊断已广泛应用。 在这种检测方法中，白血球与其它血液成分分离，而且用单克隆抗体对 pp65染色，在显微镜下可见CMV 基质下的磷蛋白。这种检测方法有许多理想的特点, 包括在几个小时之内收到实验室的血试样结果的潜在有效, 敏感性超过病毒培养，提供数量的数据能力和强壮虽然不用临床重要感染的出现使相互关系完美。 检测的使用关心, 特别地对于数量的目的, 是如果实验室的传送轮流超过 24 小时，抗原是不安定的，而且结果可能是错误的。核酸检出分析CMV DNA 的检出可能是完成的使用 PCR 或 Digene 杂种抓取系统 (Digene Corporation，Beltsville MD) 。为 CMV pp65 RNA 的一个检测也是商业可得。(NucliSens, Organon-Teknika，Durham, NC) PCR 检测能在任何的身体物质或组织上被运行但是通常为活动 CMV 感染的诊断在血上被运行。 常态的血 CMV DNA 的检出, CMV- 血清反应阳性的个体是不寻常的并且强烈地建议临床重要的感染或现在或在最近的过去中。 在 免疫抑制 患者中，然而，血的 CMV 的检出是更加通常的并且贫穷地对临床重要 CMV 疾病的出现感到有相互关系的。 逐渐增加的证据意味着测量周边的血CMV DNA 的数量的测试将会在关于对抗病毒的治疗需要的临床下决策方面是更有用的。 更高深的研究是定义无论最佳的标本是血浆，白血球所必要者或整个的血。血清学CMV 血清学比是病毒的直接测试对 免疫抑制 患者的感染诊断是较少价值。 然而, 资讯科技是有用的, 对于正常的主体 (见后) CMV 感染的诊断和为定义 CMV 免疫的状态, 例如,在捐血者或移植供体和受体中。 EIA 对于 CMV 抗体的检出是使用过的是最广泛地检测格式并且比补体结合测试敏感,广泛地在过去被用。正常的宿主体内的细胞巨大性病毒正常的宿主 CMV 的最通常疾病显示是一种像单核细胞增多症一样的疾病。 在这些情况，嗜异性抗体测试是否定的, 如同是 EBV IgM 抗体的测试。 因为这些是原发的感染,CMV IgM 抗体的检出是一个方便的通入以通常提供一种诊断。 急性的 EBV 感染也能产生错误- 阳性 CMV IgM 测试; 因此，急性的 EBV 感染应该在阳性 CMV IgM 之前被排除测试是考虑过的诊断。 在患者中以 CMV 单核细胞增多症， CMV 经常地在培养旁边的尿中被发现和时常在血中被培养， pp65 抗原血症或 PCR。 这些， PCR 是最敏感的,到达一项研究的 100% 敏感性。免疫抑制宿主的体内细胞巨大性病毒CMV 是已经收到的患者或坚硬的器官或骨髓移植的机会主义感染的最通常因素。 资讯科技也是引起患有艾滋病的患者机会主义的感染最通常的病毒。 CMV 感染的通常显示,尤其在移植之后,是没有特定的器官定位的一个全身性征候群。 特定器官的牵涉也能连同一个全身性征候一起也发生或没有全身性显示。像更昔洛韦和膦甲酸这样的抗病毒药物的有效, 那是有效的两者对于预防和 CMV 感染的治疗已经产生影响被用的测试选择的多种病毒的诊断需要。全身性细胞巨大性病毒感染的诊断没有可得的诊断测试对在移植后的现在全身性 CMV 征候群的诊断是完美的。 血的 CMV 的检出比做尿或唾液的检出以全身性疾病的出现使有相互关系更多。 周边血白血球的培养的检出意味着，因为 CMV 病毒血症也在无症状的移植受体中发生，一个全身性征候群能被归因于 CMV 但是不是完全诊断(121,127)。为全身性 CMV 感染的诊断血培养的敏感性也是有缺点的因为不是有在移植后的一个全身性 CMV 征候群的所有患者阳性血培养。 pp65 抗原血症检测是更敏感的，而且较血为多的特性为现在疾病的检测培养。 继续的标本高度抗原血症或逐渐增加的水平增加阳性预言性的价值(190)。PCR 是甚至更敏感的, 但是比较不特异。 事实上发现 PCR 的血 CMV DNA 的失败排除如全身性征候群的因素 CMV ，但是一个阳性测试有低的预言性的价值。 数量 PCR 发现的高度 CMV DNA 可能有比较高的预言性的价值。局限性疾病诊断由于局限性 CMV 感染的患者并不总是病毒血症。CMV 肺炎或胃肠道疾病的诊断最好地被来自疾病的位点组织的组织学诊断做。 CMV CNS 感染的诊断最好地经过 PCR 的使用被做发现 CSF 的 CMV DNA (10)。 CMV 视网膜炎的诊断通常是一种被眼科医师做的临床诊断，但是以防万一由于异型的特征，CMV PCR 能在玻璃的或水样液上被运行(125)。 胁迫疾病的诊断培养pp65 抗原血症检测的血 CMV的检出,混合的抓取化验,或在症状已经发生之前 , PCR 能被当作一个板机使用开始抗病毒的治疗。 当给疾病的危险是最高的时候移植使用先买的治疗摄生典型地在移植之后在最初 4个月期间每个1-2星期为对于 CMV 病毒血症的证据评估患者的计画。 大体上，PCR是最敏感的测试,在症状的开始之前发现事实上所有的移植血 CMV DNA 受体, 但是也发现从不发展症状的受体 CMV DNA ，如此有低的积极预言性的价值。混合的抓取检测和 pp65 抗原血症检测每天变成积极一些到在 PCR 后 1个星期而且有时候无法在症状的开始之前发现 CMV 抗原血症,但是他们有比较高的积极预言性的价值。 (20,175) 培养是最没有敏感的和时常最后一个变成阳性测试。 测试的适当选择仰赖被检测的忍耐总体的易受伤,通常由比较敏感的测试为比较易受伤害的患者推荐。资讯科技是有可能的那个数量血的测试将会改善 CMV 检出检测的预言性价值。 (43,159) 如数量 CMV PCR 所测量的血浆 CMV DNA 的水平与患有艾滋病的患者后来 CMV 感染的可能有关(179)。在抗病毒的治疗和恢复期的患者监测在抗病毒治疗的引发之后，培养在几天之内变成否定, 被 pp65 抗原血症检测跟随, 被 PCR 跟随.(74) 更高深的研究是定义在治疗期间的抗原血症或 CMV DNA 的持续是否与复旧有关所必要者。数量的检测可能在可能地提供上升的水平给对治疗的对响应值 的衡量 , 提供一个抗病毒抗药性的早警告方面是有用的(159)。 先天性巨细胞病毒感染先天性CMV感染能不迟疑地被在第一个星期的生活里面在尿上被运行的培养或 PCR 诊断。 因为较迟的培养不可能区别来自在围产期内被获得的感染先天性感染，所以资讯科技是重要在这时期期间运行测试(156)。在子宫 CMV 感染中能被培养或 PCR 诊断在羊水上运行。当羊水被获得在妊娠中太早或在母亲的感染之后太早的时候，错误-否定结果已经发生。 (27,55,56) 当临床怀疑的程度是高的时候，重复的取样为最大的敏感性被建议。人疱疹病毒 6 和 7HHV-6 是婴儿蔷薇疹的原因。资讯科技也已经被建议为脑炎的情形因素,在骨髓移植后的热病捕获，肝炎和中级的骨髓失败。 一项研究已经为如多发性硬化的因素 HHV-6 建议一个角色。 (29) HHV-7 也已经被使如蔷薇疹的一些情形的因素产生关系。因为两者是到处存在的，而且无症状的病毒的流出是通常的，所以这些感染的诊断很困难。 HHV-6 DNA 在有急性的 HHV-6 感染的婴儿 CSF 已经被发现，但是这一个发现的临床重要性在个别的情况是不易了解的。 (26) HHV-6 DNA 缺乏神经系统的疾病也已经在脑中被发现(118)。 HHV-6 和 HHV-7 显现的培养实际的困难，因为它需要脐带淋巴细胞的使用,这在大多数的诊断病毒学实验室中不是可得的。此外，没有标准为免疫抑制患者的 HHV-6 和 HHV-7 为诊断测试的解释存在。 在婴儿中，血清转化对急性感染是诊断的。对急性感染暗示性的其他调查结果是连同周边的血单核细胞的否定抗体效价 (33) 和 HHV-6 的出现在周边的血单核细胞上被运行的积极 PCR ，但是不在唾液中因为唾液的流出有较迟的开始胜于病毒血症(41)。在不寻常的情况，组织应该被 IHC 和 ISH 调查每当可能的协助了解对患者的病理过程的 HHV-6 的关系。丙型疱疹病毒亚科传染人类的丙型疱疹病毒亚科的成员是 EBV 和 HHV-8, 也知道如卡波西氏瘤病毒。 这些病毒的性状是淋巴的和上皮的细胞复制 , 淋巴样细胞的潜伏期 , 和在潜伏性受传染的细胞上的一个增殖的效果。 EBV 是传染性单核细胞增多症的因素。 HHV-8 已经在患者中被艾滋病毒- 相关的免疫抑制与卡波西氏肉瘤相连。EBV的诊断测试EBV 的培养用被使不灭的细胞 EBV 抗原的出现示范需要脐带淋巴细胞的无限增殖化。 这一个步骤对常规诊断实验室是不实际的，而且因此，大多数 EBV 感染的诊断以血清学的测试为基础。大多数传染性单核细胞增多症的情形被诊断加上嗜异性抗体的出现在周边的血中基于异型淋巴细胞的出现,是使羊，牛和马的红血球黏着的 IgM 抗体。第一流的保罗- Bunnell- 戴维森的测试已经是使用骑马红血球并且不需要差别的吸收玻片凝集试验用主要地代替的牛肉红血球和天竺鼠肾脏。产生嗜异性抗体的失败是通常的在孩子中, 尤其小于4岁的儿童, 而且也有时候在成人中发生。特异EBV抗体测试作为这些患者的诊断。特异 EBV病毒血清学EBV 血清学有测试测量对病毒的壳体抗原 (VCA) ，早的抗原 (EA) 和核子抗原 (NA) 的抗体。 在一些实验室中，测试对于反 EA 区别抗体散播而且限制了成份,基于对丙酮和甲醇固结的荧光染色和二个成份的差别敏感性的位置。 在定义急性的感染方面为对 VCA 的 IgM 抗体的测试是有用的因为 IgM 反 VCA 通常对临床显示的开始感到可发觉而且保持可发觉只有好几个月(60,91)。因为这些抗体对个体的生活是可发觉的，所以在定义 EBV 免疫的状态方面为 IgG VCA 的测试是有用的。 反 EA 在几个星期之内感染出现但是不被以急性的传染性单核细胞增多症在所有的患者中发现(91,92)。因为这些抗体不超过数个月坚持，所以对漫射成份的抗体出现对最近的感染是更特定的。 在对比中，被限制的成份抗体在感染之后可能坚持好几年。 抗核抗体稍后在感染之后超过反 EA 出现而且为生活坚持。 (90,91) 因此，反 EA( 尤其漫射成份) 和反 NA 的测量对决定感染的时间安排有时候是有用的。因为在 EBV 感染和这一个征候群之间存在的曾经想的联编已经被证明是不对的，所以为慢性疲累征候群的诊断 EBV 抗体的使用是没有价值。免疫抑制患者的 EBV感染像其他的疱疹病毒属,EBV 能产生免疫抑制患者的严重疾病。 在患有艾滋病的患者中， EBV 与原发的 CNS 淋巴瘤有关。 发现 CSF 的 EBV DNA 的 PCR 对作这一种诊断是有用的(9,38,51)。EBV 也有关移植后的淋巴细胞增殖的在坚硬的器官和骨髓移植受体中见到的病变 (PTLD) 的征候群。 EBV 血清学对作这一种诊断不是有用的。 PTLD 被由发现表现适当的组织学的调查结果的淋巴组织的 EBV 抗原 (201) 或核酸 (115,147) 确认。 一些报告意味着使用 PCR 检测周边的血单核细胞的 EBV DNA 水平可能对早的识别和这一个征候群的临床管理是有用的.(99,117,158) 呼吸性病毒的感染呼吸感染的通常原因的病毒包括流感和副流感病毒菌病毒，RSV ，腺病毒，鼻病毒，冠状病毒和肠道病毒。 几乎冠状病毒时常在常规诊断病毒学实验室中被识别。 测试包括病毒的培养和抗原检出技术。 优先的标本是鼻咽抽吸物，洗和拭子。气管抽吸物和标本获得过一个气管镜,尤其支气管肺泡灌洗法液体,也是适当的标本。 像 FA 染色法这样的抗原检出技术,广泛地用来达成迅速的诊断。呼吸性病毒的培养为呼吸性病毒培养因为不同的生长和可能是礼物的不同病毒的检出需求是复杂的。流感和副流感病毒在原发的猴子肾脏细胞中复制得最好,虽然连续的细胞线能被用, 如 Madin- Darby 的犬齿肾脏为流行性感冒病毒和 LLC- MK2 为副流感病毒。萣生熟的无血清作为为流感和副流感病毒的回收孵化这些细胞，而且流行性冒病毒统计实验的一些毒株最好地以 33. 胰蛋白酶被包含在 Madin- Darby 的犬齿肾脏细胞被用的血管中膜母鸡之中。 流感和副流感病毒可能不需要产生 CPE 就复制，而且和天竺鼠红血球的红细胞吸附试验作为检出。 病毒复制的早检出在接种之后早在 24 小时藉着 红细胞吸附试验 可能是完成的。 (130) RSV 最佳地在消息很灵通的 -2 细胞中复制。 这一个病毒非常不安定, 而且延迟对实验室的传送可能造成失败隔离 RSV。 腺病毒最佳地在人类的胚胎肾脏细胞中复制(104)。鼻病毒只在人类的二倍体中复制纤维母细胞细胞，而且他们复制更多在一些纤维母细胞细胞中线超过在其它里面。回收鼻病毒33-34保温为最佳的需要。 冠状病毒不复制在现在可得的细胞中培养系统, 但是在实验室中需要为培养气管的器官培养。呼吸性病毒抗原的检出抗原检出技术能用来达成 RSV ，流行性感冒，副流感和腺病毒呼吸的径路感染的快速诊断。 病毒的抗原被鼻咽 h音，洗或拭子获得的呼吸上皮的细胞 FA 染色法看得见。抽吸物和洗涤提供一个比较高的细胞收率而且有比较高的病毒的效价胜于拭子 (2,84,123) ，但是鼻咽的拭子是方便的并且成功地被许多实验室用(2,66)。气管抽吸和支气管肺泡灌洗法标本也对诊断是适当的。 在实验室的抵达身上，一个细胞圆球被准备, 在一个显微镜载玻片，干燥的,固定式的空气上看见, 而且染色。 整个过程大约 2-3小时。 染色法能被运行使用能发现多样的呼吸病毒的单克隆抗体的单一特异的抗体或池。 能比被需要为 RSV 和流行性感冒为 FA 染色是现在商业可得培训人员用较少的运行的方便膜免疫测定。 这些检测能在急症病房或医师的办公室中进行。 为流行性感冒病毒的检出其他的新迅速的检测格式对于流行性感冒抗原 (45) 包括一个光学的免疫测定并且为神经氨酸酶活性的直接检出包括一个检测。 一个不断的发现是抗原检出方法的敏感性为 RSV 培养超过那(148)。对于流行性感冒，副流感和腺病毒，一些实验室已经报告可比较培养 (72) 的敏感性，但是发现降低敏感性的许多实验室为这些病毒与培养相较(148)。鼻病毒和冠状病毒因为抗原的不同和适当抗体的缺乏有效不是被抗原检出方法发现的。大体上，抗原检出方法超过成人在孩子中有较高的敏感性。发现成年的患者 RSV 的抗原检出方法的敏感性是特别地贫穷(61)。呼吸性病毒的核酸扩增PCR 和 RT- PCR 已经被适用于呼吸病毒的检出。 (32,40,62,63,67,76,132,137,143,196) 这些技术可能是比抗原检出或培养更敏感，但是否增加的敏感性证明增加的费用，而且复合体需要较进一步的评价。 一项吸引人的观念是同时地发现多样的呼吸病毒的多样 PCR 的使用(63)。核酸扩增法对被现行方法发现不了的病毒是非常有用, 如冠状病毒，鼻病毒，流感正粘病毒C型和副流感病毒4型。对特殊患者是有用的，如低度病毒，免疫抑制患者和也许气喘的患者包括成年的患者。特异病毒诊断需要有急性的病毒的呼吸感染的关于对患者的特定病毒诊断的需要继续的辩论。建议者争论，特定的诊断对建立预后，限制的抗生用法是有用的，而且步兵大队就医了患者避免医院的传递(1,103)。怀疑者争论，缺乏特定的抗病毒的治疗，忍耐的管理不被改变。有很少的怀疑，作一种特定的诊断以不寻常的临床显示是有帮助的在患者中和在 免疫抑制患者中。 胃肠病毒的感染胃肠感染的重要因素的病毒是轮状病毒，肠的腺病毒 ( 尤其血清型 40 、41) ， 嵌杯样病毒，星状病毒, 和可能地 环曲病毒。有趣的是没有一个这些病毒不迟疑可培养，而且实验室诊断已经仰赖电镜技术和抗原检出技术。核酸扩增技术也已经被应用。电镜技术电镜技术在每一个这些因子的发现方面是仪器的(6,64)。和铀酰醋酸盐或磷钨酸的否定染色能在和最小的制剂凳子标本上被直接地运行。 一些病毒,尤其嵌杯样病毒,更被看得见使用病毒的粒子被黏着使用在否定前的一个特定的抗血清染色法的免疫电镜技术。 电镜技术不在诊断的病毒学实验室的广大使用中但是，被和对技术的特别兴趣的挑选实验室的优良收率用。抗原的检出抗原检出方法广泛地被用于病毒性肠胃炎的实验室诊断。 使用多种 EIA 和粒子凝集作用格式的许多商业的检测可用来轮状病毒检出，而且至少一个商业的腺病毒检测是可得的。 因为排泄物的标本轮状病毒抗原礼物的数量在轮状病毒胃肠炎期间同样地是高的如凳子的每克1011个粒子, 轮状病毒抗原检出测试的敏感性容易是高的。 EIAs 容易是略微比凝集作用更敏感测试 (53),虽然后者可能有方便的优点。 有在各种不同的商业检测之中的专一性的一些变化。 (53) 为星状病毒的抗原检出检测已经被用于调查 (131) 但是不是商业可得。核酸的扩增RT-PCR 和 PCR 检测为胃肠炎的主要病毒因子已经被发展，但是他们的使用被限制研究实验室。 这些检测不可能因为适当的敏感性为轮状病毒代替抗原检出检测，而且抗原检出的较棒单纯化验。 同样地，至少 星状病毒 感染的调查对于 RT 在敏感性中表示没有优点-PCR 与 EIA 相较(70)。嵌杯样病毒s 的不同是如此广泛那一个仍然被设定的没有单一引物是可得扩增所有的使生病的嵌杯样病毒。 核酸扩增方法可能尤其对分子流行病学的环境研究和研究是有用的(14,140,198)。 病毒性脑膜炎和脑炎不同一群病毒引起脑膜炎和脑炎。没有单一诊断测试方法发现所有的可能嫌疑犯，而且来自照射和临床的调查结果的患者病史的线索一定用来指导测试的选择。 作一种特定的诊断可能大幅地已经被核酸扩增方法的敷贴增加。 不同的诊断方法为患者被 CNS 的脑膜炎，脑炎和机会主义病毒感染需要。 多样的 PCR 检测可能地适用于每一个这些临床的问题而且可能未来是一个重要的通入(149,161)。脑膜炎肠病毒脑膜炎艾柯病毒和柯萨奇病毒是脑膜炎的最通常病毒因素。 RT-PCR 化验那放大一个 5 的区段 非翻译被保存的肠道病毒基因组的区域在大多数的 肠病毒 类型之中正在快速地为诊断变成标准.(31,163,