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家兔肠缺血 再灌注损伤Ischemia reperfusionInjuryinRabbit I R 中南大学病理生理学教研室 理论复习 缺血再灌注损伤的定义缺血再灌注与缺血再灌注损伤的区别影响缺血再灌注损伤发生的因素缺血再灌注损伤的发生机制 掌握缺血再灌注损伤模型的复制 比较缺血损伤和缺血再灌注损伤的区别观察缺血再灌注损伤的表现 理解缺血再灌注损伤发生的机制 目的要求 实验动物 家兔 性别 体重 实验设计原理 通过肠系膜上动脉结扎 即SMAO SuperiorMesenteryArteryOcclusion 来阻断部分肠的血液供应一段时间后再恢复血流灌注 以复制肠缺血 再灌注损伤的动物模型 探讨缺血 再灌注损伤的发生机制 组 持续缺血组结扎肠系膜上动脉2h 组 再灌损伤组结扎肠系膜上动脉1h 再恢复血流1h 实验分组 实验方法与步骤 1 称重2 全麻 耳缘静脉注射3 戊巴妥钠1ml kg 注意 从耳缘静脉的远心端开始注射 排尽气泡 速度不宜太快 麻醉效果 角膜反射基本消失 钳夹家兔大腿肌肉无反应 3 仰卧固定 背部交叉 备皮颈部正中 甲状软骨下缘 胸骨上切迹 腹部正中 剑突下1 5cm起向下5cm 注意 平贴皮肤剪毛 勿拎起皮肤 4 颈部正中切口行动脉插管切口范围 颈部正中 甲状软骨下缘 胸骨上切迹 长约5cm 分离左侧颈总动脉 胸骨舌骨肌与胸锁乳突肌之间深面的颈动脉鞘内 与气管平行 颜色鲜红 较细 触之有搏动感 长约2 3cm 穿线备用 注意 1 钝性分离 2 辨清颈A鞘内的血管神经血管插管 先结扎远心端 后夹闭近心端 剪口部位尽量靠近远心端 成45度角朝向近心端剪一小口 约为管径的1 3 1 2 插管方向朝向近心端 插入1 1 5cm 插管的注意事项 插管内事先应加入少量肝素以防凝血 排净气泡 记录前应关闭三通管插管易滑脱 应双线固定 结扎牢靠勿使插管尖端与血管壁形成角度 避免刺破血管 5 腹部正中切口 腹正中线自剑突下1 5cm起向下做5cm切口 6 寻找肠系膜上动脉 将家兔腹腔内脏左移 找到齐右肾门对侧垂直向腹主动脉分出的肠系膜上动脉 穿双线备用 肠系膜上动脉示意图 1 移动内脏时 动作要轻柔2 分离肠系膜上A时需小心细致 不要使用锐利器械 以免损伤血管造成大出血3 肠系膜上A夹闭要彻底 缺血再灌注组结扎时注意垫橡皮管 恢复血流灌流 复流 要完全 注意 6 分组进行试验并记录以下指标 结果分析 各组的模型复制是否成功 缺血 再灌注血压变化的机制是什么 各组动物指标变化的机制是什么 1 尽早恢复血流灌流 缩短缺血时间 2 再灌注时遵循低温 低压 低钙的原则 3 清除活性氧 4 Ca2 拮抗剂的使用 5 减少白细胞的激活和炎性介质的释放 6 补充能量及促进能量生成 7 启动细胞内源性保护机制 如何
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