TBil测定的SOP.doc

总胆红素(TBil)测定SOP1. 原理：样品中胆红素在PH3.0附近，以及钒酸盐和表面活性剂作用下，可以被氧化成胆绿素。与此同时，胆红素特有的黄色也随之消失。测定胆红素氧化前后吸光度的差，可以计算出样品中胆红素的浓度。反应式如下：钒酸盐胆红素 胆绿素 2. 方法：钒酸盐氧化法（VOX）3. 试剂：上海科华生物工程股份有限公司的总胆红素试剂盒。4. 注意：1.此试剂为体外诊断用，不要服用。2. 试剂含有适量的防腐成分，应避免试剂接触人体。如不慎导致试剂接触粘膜或皮肤，应立即用大量清水冲洗，如有不适，则应去医院诊治。5. 储存条件及有效期：（1）当保存于28，不开盖情况下至标签的失效期。（2）开盖后放于仪器中可以稳定30天。（3）变质指示：当试剂有浊度时，不能继续使用。6. 样本要求： （1）最少样品量：0.2ml。（2）类型：新鲜无溶血现象的血清。（3）标本稳定性：收集样本后尽快测定，注意避光，否则冷冻保存。7. 检验步骤：（1） 开生化仪见贝克曼680生化分析仪的SOP。（2） 操作步骤：参数设置 ；试剂装载；校准；质控；样本装载；测定；结果审查；报告。a. 参数设置：TBil测定参数通道号1加样体积6.0R1体积168R2体积42主波长450次波长540方法END初始测量点10末始测量点27b. 试剂装载：每天在生化仪上进行试剂检查，检测的样本数，如发现量不多或不能满足当天需要，则需要加试剂，注意同一批号，不同批号的不能混用。c. 校准：换一批新试剂或质控做的不理想需要校准。使用生理盐水（蒸馏水）和科华公司校准品（或其它质量可靠的校准血清）进行二点定标。d. 质控：在做样本之前每天做质控，质控符合要求才可以做样本，不符合要求需要做校准，做完校准后，用校准品当样本来测，做质控。至少两个浓度水平的质控品。e. 样本装载：样本符合要求，放在试管架上，编号，上机检测。f. 测定g. 结果审查 h. 报告8. 参考值： 血清和血浆：020mol/L（37）。9. 临床意义：有许多肝脏疾病都会导致血中胆红素的异常，如肝炎、肝前黄疸、肝黄疸、肝后梗阻性黄疸等都可能使血中胆红素浓度增高。因此，总胆红素测定是评价肝功能的主要指标之一。10. 产品性能指标：（1）精密度（重复性）：批内变异系数6%；批间相对极差 6%。 （2）准确度：相对偏差15%(胆红素浓度17.1mol/L)相对偏差20%(胆红素浓度17.1mol/L)（3）分析特异性（抗干扰能力）：抗坏血酸0.5g/L或血红蛋白5g/L或浊度2.0，对测定的干扰可忽略。（4）分析灵敏度：171mol/L 的胆红素在450nm处测定，吸光度范围为0.12A0.45A。（5）线性范围：0684mol/l（37）（6）稳定性：试剂在28避光保存，有效期为1年半。试剂开启后在28避光保存，可稳定30天。11. 注意事项：总胆红素 (钒酸盐氧化法)试剂盒的线性范围是0684mol/L。样品浓度超过线性上限应稀释重做。如在贝克曼680中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。超范围的标本也可以用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释