云南白及的代用品水白及的研究.doc

云南中医学院2013届攻读学士学位本科生毕业论文 云南白及的代用品水白及的研究学 院 中药学院 学生姓名 吴剑 专 业 中药学 实习单位 云南中医学院 导师姓名 桂镜生（副教授） 2012年 11月 16日云南白及的代用品水白及的研究 实习学生：吴剑（09级中药学） 指导老师：桂镜生（副教授） 摘要 目的:研究云南水白及作白及代用品是否合理。 方法:运用系统的鉴定方法及化学成分和药理的比较研究。 结果:正品白及与二叶独蒜兰在来源、形状、显微等特征上均有相似，容易混淆，理化鉴别显示两者在薄层色谱在呈现不同的斑点。结论:根据现有研究二叶独蒜兰不适合作为白及的代用品。 关键词 水白及 白及 二叶独蒜兰 白及为兰科白及属植物白及Bletilla striata(Thunb.)Reiehb.f.的干燥块茎。夏、秋二季采挖，除去须根，洗净，置沸水中煮或蒸至无白心，晒至半干，除去外皮，晒干。 【性味与归经】苦、甘、涩，微寒。归肺、肝、胃经。 【功能与主治】收敛止血，消肿生肌。用于咯血，吐血，外伤出血，疮疡肿 毒，皮肤皲裂。 【用法与用量】615g；研末吞服36g。外用适量。 【注意】不宜与川乌、制川乌、草乌、制草乌、附子同用1。实验仪器与试药 尼康显微镜。白及（鲜品买于大理三月街，饮片买于昆明药材市场），二叶独蒜兰(鲜品买于大理三月街，饮片买于昆明药材市场）。 1 二叶独蒜兰来源 经过长时间的市场调查，走访民间，得知水白及的来源复杂，多为独蒜兰属的数种植物，其中两种比较常见，以下只针对其中一种做研究。研究的植物（如图1）所示 。 图1 根据民间收集的关于（图1）的资料与中国植物志（18卷）独蒜兰属的二叶独蒜兰Pleione scopulorum W.W.Smith（如图2）比较，有以下相同的特征：图2 地生草本。假鳞茎通常卵形，略偏斜，上端有明显的长颈，全长1-2.5厘米，直径 0.6-1.5厘米，绿色，顶端具2枚叶。叶在花期已长成，披针形、倒披针形或狭椭圆形，纸质，长4-13厘米， 宽1-2.3厘米，先端急尖，基部收狭成柄并包藏于数枚筒状鞘之中。花葶生于两叶之间，连同叶片发自无叶老假鳞茎基部，直立，长12-18厘 米，基部与尚未完全长成的叶柄共同包藏于膜质筒状鞘内，顶端具1花， 花玫瑰红色或较少白色而带淡紫蓝色，唇瓣上常有黄色和深紫色斑，翅自 中部以下甚狭，向上渐宽，在顶端成倒三角形围绕蕊柱，宽达5毫米，有 不规则齿缺。蒴果纺锤状长圆形，长2-3厘米。花期5-7月，果期10月2。兰科部分检索表1. 花粉团粒粉质，柔软；叶不具关节；花粉团8个，每4个为一群白及亚族2.地生植物，地下具有肥厚的、肉质的根状茎或假鳞茎百及属1. 花粉团蜡质，坚硬或较坚硬，叶具关节，花粉团4-6个附生植物，具绿色的、露裸的假鳞茎贝母兰亚族 3.花单朵，花期无叶或叶极幼嫩；假鳞茎与叶钧命短，每年更新独蒜兰属 结论：经过查阅各种文献和资料，确定来源是兰科独蒜兰属的二叶独蒜兰Pleione scopulorum W.W.Smith的干燥假鳞茎如（图1）所示。2010版药典记载该植物的假鳞茎作山慈菇使用，称作“冰球子3。”2 白及与二叶独蒜兰性状2.1 白及的性状鲜品性状：本品呈不规则扁圆形，多有23个爪状分枝，长1.55cm，厚0.51.5cm。表面灰白色或黄白色，有数圈同心环节和棕色点状须根痕，上面有突起的茎痕，下面有连接另一块茎的痕迹。质坚硬，不易折断，断面类白色，角质样。气微，味苦，嚼之有黏性（如图3）。图3 饮片性状：本品为不规则的薄片，常具角状分支，外表面类白色或黄白色，切面类白色，角质样，半透明，维管束小点状，散生。质脆。气微，味苦，嚼之有黏性4（如图4）。图42.2 二叶独蒜兰的性状 鲜品性状：二叶独蒜兰呈圆锥形，瓶颈状或不规则团块，直径12cm，高1.52.5cm。顶端渐尖，尖端断头处呈盘状，基部膨大且圆平，中央凹入，有12条环节，多偏向一侧。撞击外皮者表面黄白色，带表皮者浅棕色，光滑，有不规则皱纹。断面浅黄色，角质半透明5（如图5）。图5 饮片性状：为类圆形或不规则的薄片，外表皮灰黄色或黄棕色，具系皱纹。切面类白色、黄白色或粉红色。部分饮片韧性强，部分角质样，有众多筋脉纹及筋脉小点，质坚。气微，味淡，嚼之黏性大（如图6）。图6结果：白及与二叶独蒜兰的性状比较鲜品性状饮片性状白及多有23个爪状分枝表面灰白色或黄白色有数圈同心环节和棕色点状须根痕不规则的薄片，常具角状分支，外表面类白色或黄白色，角质样，半透明，维管束小点状二叶独蒜兰无分支表皮绿色有12条环节，多偏向一侧圆形或不规则的薄片，无分支外表皮灰黄色或黄棕色部分饮片韧性强，有众多筋脉纹及筋脉小点3 白及与二叶独蒜兰的显微 1.维管束 2.薄壁细胞中的针晶 3.薄壁细胞 4.表皮 A.横切片 B.维管束 B A3.1 白及的横切片3.2 二叶独蒜兰的横切片1.维管束 2.薄壁细胞中的针晶 3.薄壁细胞 4.表皮 A.横切片 B.维管束AB结果：白及与二叶独蒜兰的横切片比较：横切片维管束白及表皮细胞细胞壁表面观垂周壁波状弯曲，略增厚维管束鞘纤维圆形二叶独蒜兰表皮细胞细胞壁切向延长，细胞壁均匀加厚，表面观垂周壁不弯曲维管束鞘纤维半月形，偶有两个半月形3.3 白及粉末显微图 白及粉末显微图 1.表皮细胞 2.黏液细胞 3.导管 4.纤维及含硅质块的细胞 5.针晶束 6.淀粉粒 3.4 二叶独蒜兰粉末显微图 二叶独蒜兰粉末显微图1.木薄壁细胞 2.淀粉粒 3.导管 4.针晶束 5.表皮细胞结果：白及与二叶独蒜兰粉末主要区别白及与二叶独蒜兰的粉末颜色区别：白及粉末黄白色，二叶独蒜兰棕黄色。白及与二叶独蒜兰粉末显微区别： 相似点：两者钧可见导管和针晶束。区别点：1.白及粉末显微可见表皮细胞表面观垂周壁波状弯曲 二叶独蒜兰粉末的表皮细胞细胞壁切向延长，均匀加厚，不弯曲 2.白及粉末显微可见含硅质块细胞位于纤维周围，排列纵行 二叶独蒜兰粉末显微没有看见硅质块 3.白及粉末显微可见大量黏液细胞，里面含有多数针晶。 二叶独蒜兰粉末显微没有看见黏液细胞 4.二叶独蒜兰木薄壁细胞表面有许多细长壁孔 白及粉末显微没有看见木薄壁细胞。 5.白及粉末显微可见淀粉粒类圆形，上可见“人字形”样脐点 二叶独蒜兰粉末显微可见淀粉粒卵圆形或长椭圆形，看不见脐点。4 白及与二叶独蒜兰的理化4.1 白及与二叶独蒜兰的薄层色谱比较取水白及粉末5g，加70%甲醇50mL，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加水10mL溶解，用乙醚振摇提取2次，每次20mL，合并乙醚液，挥至1mL，作为供试品溶液。另取白及粉末5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱试验，吸取供试品溶液510L，对照药材溶液5L，分别点于同一块硅胶G薄层板上，以石环己烷乙酸乙酯甲醇（6：2.5: 1）为展开剂展开，取出，晾干喷以10%硫酸乙醇溶液，在105加热数分钟，放置3060分钟。观看斑点颜色。正 代结果：白及与二叶独蒜兰的薄层色谱图中，没有相同颜色的斑点。4.2 白及与二叶独蒜兰中白及胶的含量比较白及胶最佳提取工艺是提取前冷浸1h、加水总量是26倍、煎煮次数2次、煎煮总时间4h，醇沉时白及水提浓缩液的浓度为1/5( W/ V) 、白及水提浓缩液的含醇量达70%6。样品液的制备：精密称量规格相同的白及药材5g,按正交设计表中的设计条件进行水煎提取, 4层纱布过滤, 合并滤液。浓缩为1g/5ml水，加醇至含醇量70%。静置两小时后，用已知重量的滤纸抽滤，放置105的烘箱内烘烤至恒重。记录结果。实验结果为：药材 项目粉末重量白及胶重量白及5.000g1.82g二叶独蒜兰5.000g1.42g结果：相同质量的二叶独蒜兰粉末水提醇沉出的白及胶没有白及的多，差 （1.82-1.42)1.82100%=22%5 白及与二叶独蒜兰药理作用的比较5.1 白及与二叶独蒜兰中药药理作用比较 名称项目性味归经功能主治白及苦、甘、涩，微寒归肺、肝、胃经收敛止血，消肿生肌。用于咯血，吐血，外伤出血，疮疡肿毒，皮肤皲裂。二叶独蒜兰甘、微辛，凉归肝、脾经清热解毒，化痰散结。用于痈肿疔毒，瘰疬痰核，淋巴结结核，蛇虫咬伤。5.2.1 白及的现代研究白及以块茎入药，白及主要含黏胶质、菲衍生物、糖类、葸醌衍生物等成分，另外还含有大黄素甲醚、咖啡酸等成分; 其中粘胶质占40%50%7。新鲜块茎中含淀粉30.48%, 葡萄糖1.5%8并分得三个新的联苯类( bibenzyls) 和2个新的双氢菲类(dihydrophenanthrenes)9, 近又分得菲并吡喃类( dihydrophentropyrans) 化合物白及醇(btelilol) A,B,C10。此外, 还分得暂称BS-14的4个化合物。有研究者11从白及中分离出了双4-(-D-吡喃葡萄糖氧)苄基-2-异丁基苹果酸酯，并以此作为白及质量控制的指标。近年来药理研究表明12，白及味苦、甘、涩，性凉，归肺、胃、肝经，能收敛止血、消肿生肌，主治肺胃出血、外伤出血、痈肿疮疡、皮肤皲裂、水火烫伤等。孙国岗等13在临床上利用白及配伍其他药治疗溃疡性结肠炎、慢性咳血等疾病，取得了满意的疗效，该研究者在临床工作中发现白及即可外服，又可内用，除了止血外，还可以治疗口鼻疾病。此外，陈玉等14研究发现白及具有抑制变形链球菌的作用，白及水煎剂可能具有防龋作用。白及是一种天然高分子材料，有功能缓释性、局部滞留性、自身降解性、无刺激性、无不良反应、资源丰富廉价易得等辅料的特性，在药物制备过程中应用上越来越受到重视。除了在医药方面的应用，白及由于其无不良反应，特别适合作为天然化妆品的功能组分15，发展以中药白及为化妆品原料的天然功能组分具有很大的市场潜力。 在工业方面，白及是高级卷烟烟条粘合剂，野山参断须修复剂，裱中国字画粘合剂，胃镜检查的保护剂，美容面膜等。随着研究的不断深入及应用的不断成熟，白及在食品方面也已经展现出广阔的应用前景16。5.2.2 二叶独蒜兰的现代研究二叶独蒜兰以假鳞茎入药，主要成分二氢菲类、联苄类化合物等。夏文斌等17研究发现, cir-rhopetalan thrin 对人结肠癌( HCT -8 ) 、肝癌( Be17402 ) 、胃癌( BGC - 8 23 ) 、肺癌( A549 ) 、乳腺癌( MCF-7) 和卵巢癌癌( A-2780 ) 细胞表现出非选择性中等强度的细胞毒活性。Shim 等18研究发现Ho-moiso flavanone 表现出很强的抗血管生成活性。在体外试验中, 它对基本纤维母细胞生长因子( bFG F )诱导的人类脐带血管内皮细胞( HUVECs) 增殖表现出较强的抑制作用。在体内试验中, 用该成分处理成长的鸡胚胎绒毛尿囊膜, 根据浓度不同, 则表现出不同程度的抑制毛细血管生成的作用。此外, Jeong等发现Homoiso flavanone 能通过降低cdc2 表达来停止细胞周期, 从而抑制视网膜血管新生的病变19。他们通过进一步的实验证明Homoiso flavanone 能有效抑制HUVEC 管腔形成和细胞迁移, 提出它是脉络膜血管新生的有效的抑制剂, 并将可以作为一种新的抗血管生成抑素, 应用于血管增生性视网膜病变和肿瘤的治疗。结论： 对白及和二叶独蒜兰的生药研究，主要从来源、性状（包括鲜品和饮片）、显微（包括切片和粉末）、理化（包括薄层和白及胶的含量）和药理作用（主要包括中药药理作用和现代药理）五方面的比较。其中来源、性状和显微均有相似，容易混淆，理化和药理作用有很大的差异。根据现有研究二叶独蒜兰不适合作为白及的代用品。 参考文献1 国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部），北京：中国医药科技出版社，2010： 95.2 中国科学院昆明植物研究所 .云南植物志云南植物志第十四卷（种子植物）,北京： 科学出版社，2003：535.3 国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部），北京：中国医药科技出版社，2010： 31.4 国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部），北京：中国医药科技出版社，2010： 31.5 国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部），北京：中国医药科技出版社，2010： 95.6 谢崇义, 吴 杨, 李国忠.安徽安徽医药,安徽：2004，6：04067 南京药学院. 中药药学(下册). 1980, 13808 Takagis ret al. 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