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文档简介

实验五苦味酸法测定血清肌酐 1 肌酐 CRE 是人体内肌酸代谢的最终产物 由肾排出 少部分来自食物 大部分在体内生成 血肌酐的浓度主要取决于GFR 血肌酐的测定对中晚期肾疾病临床意义较大 肌酐测定方法有化学法和酶法 酶法主要有三种类型 肌氨酸氧化酶法 肌酐氨基水解酶法和肌酐亚氨基水解酶法 2 一 实验目的1 掌握血清肌酐的测定原理和方法 2 了解肌酐测定的参考范围及临床意义 3 二 实验原理在碱性条件下 血清中的肌酐 Cre 苦味酸反应 生成橘红色的苦味酸肌酐复合物 检测505nm波长处吸光度的变化 可知被测血清中的肌酐的浓度 其反应式如下 肌酐 碱性苦味酸红色物质 OH 4 1 主要器具 微量移液器 三 器材 试管与试管架 三用水浴箱 可见分光光度计 5 四 试剂 1 试剂 R1 氢氧化钠R2 苦味酸工作液 将R1与R2按1 1的比例混合面成 2 肌酐标准应用液 133 mol L 6 五 操作步骤 取试管5支 按下表操作 混匀后 37度水浴箱放置 2分钟后 波长505nm处 空白管调零 先读取S1 U1吸光度 5分钟后再读取S2 U2吸光度 7 六 计算 参考区间 男性 62 115 mol L女性 53 97 mol L 血清肌酐 mmol L AU AS 133 mol L 8 七 注意事项 1 血标本无溶血 应及时处理 2 工作液开盖混合后 应置2 8度避光保存 稳定期3天 9 八 临床意义 肌酐经肾小球滤过后不被肾小管重吸收 通过肾小管排泄 只有当GFR下降到正常的1 3时 Scr才明显上升 是反眏GFR减退的后期指标 增高 见于各种原因引起的肾小球滤过功能减退 各种肾病 急慢性肾衰竭 重度充血性心力衰竭 心肌炎等 降低 见于尿崩症 进行性肌萎缩 白血病 贫血等 10 九 方法学评价 1 化学法 即苦味酸法 该法成本低廉 方法简便 但试剂具毒性和
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