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菊花黄酮提取与测定1、实训的背景、目的和意义：菊花具有疏风清热、消肿解毒的功效, 常用于上呼吸道感染、扁桃体炎、高血压和冠心病等治疗。野菊花中含有木犀草素、槲皮素、木犀草素、葡萄糖苷、槲皮素苷类等黄酮类化合物, 而药典中仅规定了绿原酸的含量, 并没有总黄酮含量的评价指标。为了更好地检验菊花中黄酮的含量，比较哪种方法更好,本次试验应用超声波提取菊花黄酮，分光光度法检测菊花总黄酮含量的方法, 从而使学生掌握菊花黄酮的提取与测定工艺。2、实训要解决的问题：1）在何种情况下提取黄酮效率高？2）影响提取效率的有哪些因素？3）比较提取时间、提取次数不同所带来的影响。3、实训操作关键技能吸取样品量（根据样品的吸光度调整）1.0ml，放入10毫升容量瓶内（写明标记），用60%乙醇加到2.0ml；加入5%亚硝酸钠溶液0.5ml摇匀，放置6min；加入10%硝酸铝，溶液0.5ml，放置6min后；加入4%氢氧化钠溶液4.0ml，摇匀后，加60%乙醇定容，放置15min；在510nm处测定吸光度。根据标准曲线计算总黄酮的含量。 （加入药品时的次序不能搞错）材料及方法1、实训材料及配制、预处理技术 材料：杭白菊干花 、芦丁对照品 试剂：75%乙醇、蒸馏水 仪器：电热恒温鼓风干燥箱、提取装置、温度计、超声波发生 （带加热功能）、真空泵、紫外分光光度计、低速离心机等。 样品溶液的制备：称取10g菊花，剪碎，加入75%热乙醇80ml, 超声波提取10min（我们组的）2次,过滤。转移至容量瓶中备用。 对照品溶液的制备：精密称取在120摄氏度减压干燥至恒重的芦丁( 对照品) 1.00mg , 置于100ml 容量瓶中, 加乙醇溶解刻度, 作为对照品贮备液。 标准曲线绘制:精密吸取对照品贮备液0.50ml、1.00ml、2.00m l、3.00ml、4.00ml、5.00ml分别置于10ml容量瓶中, 吸取样品量（根据样品的吸光度调整）1.0ml，放入10毫升容量瓶内（写明标记），用60%乙醇加到2.0ml；加入5%亚硝酸钠溶液0.5ml摇匀，放置6min；加入10%硝酸铝，溶液0.5ml，放置6min后；加入4%氢氧化钠溶液4.0ml，摇匀后，加60%乙醇定容，放置15min；以试剂作空白,于510nm处分别测其吸收度。以对照品浓度C( mg/ ml) 为横坐标, 吸光度( A)为纵坐标, 绘制标准曲线。2、实验技术流程路线：杭白菊烘干干杭白菊10克剪碎 于圆底烧瓶 适当体积75%热乙醇超声波发生器 按时提取（每提取10min，中间停顿1min） 过滤提取液滤渣（按试验设计 ）再过滤合并滤液抽滤收集滤液、量体积 量取提取滤液5mL 离心 （离心5000rmin，6min ）取上清液1.00mL测定吸光度值结果与分析1、 实验结果黄酮的含量=m100%稀释倍数 Mm为标准曲线中的含量M为菊花总质量标准曲线：y0.0401x0.0731 R0.9252、实验结果加以分析：(1)、由于
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