实验12Vc含量的测定.ppt

实验十二维生素C含量的测定 提出问题 什么是维生素C 是性质的检测还是量的检测 WhatisVitaminC VitaminC alsocalledascorbicacid抗坏血酸 isawatersolublevitaminfoundabundantlyinmanyplants VitaminCisessentialtogrowthinthehumanbodybecauseitisrequiredformakingcollagen胶原 However humancannotmakeVitaminC Ithastobeprovidedthroughdiet ThediseasethatresultsfromaseveredeficiencyinvitaminCiscalledscurvy坏血病 Peoplewithscurvygetbruises瘀伤easily Theirskinandteethalsobecomeveryunhealthy 维生素C 又称抗坏血酸 在植物的绿色部分及许多水果 蔬菜中含量丰富 是一类对物质代谢具有重要的作用的水溶性维生素 参与氧化还原反应 递氢体 参与体内羟化反应 Vc是羟化酶的辅酶 解毒作用 维生素C是具有L系糖构型的不饱和多羟化合物 可分为还原型和氧化型两种形式 根据它具有的还原性质可测定其含量 什么是维生素C 生理特性 参与体内羟化反应 参与氧化还原反应 促进铁吸收防止贫血 解毒作用 改善变态反应 提高免疫力 人体不能自己生产 物理特性 水溶性化学特性 强还原性 维生素C的生物特性 水溶性强还原性 提取维生素C的水溶液通过氧化还原滴定法来测定维生素C 测定的思路 DCPIP Theprincipleofthismethodisatitrationwithdichlorophenolindophenol orphenol indo 2 6 dichlorophenol alsoknownasDCPIP AscorbicacidreactswithDCPIP changingthecolorfrombluetopinktocolorless Theyreactina1 1fashion soifaknownquantityofDCPIPsolutionreactswiththeplanttissueextract thequantityofDCPIPusedgivesadirectmeasureofthequantityofascorbicacidpresent 是性质的检测还是量的检测 蛋白质的性质实验蛋白质的两性反应及等电点的测定溶菌酶的提取蛋白质含量的测定蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳细菌DNA的提取UV测定DNA含量和纯度PCRDNA琼脂糖凝胶电泳酶的动力学测定血清SGPT酶活性的测定 用标准品来测定样品 1 学习定量测定维生素C的原理和方法 2 进一步掌握滴定法的基本操作技术 3 了解水果及蔬菜中维生素C的含量情况 目的和要求 一 提取 称取松针2 0克 或其他水果2 10克 剪碎 放在研钵中 实验方法 加2 草酸5 10毫升 研磨成浆状 滤纸过滤 滤饼可用少量2 草酸洗2 3次 置滤液于50mL容量瓶中 用2 草酸溶液定容并混匀 2mL标准Vc溶液 0 1mg mL 8ml2 草酸 二 标准抗坏血酸的滴定 根据所用染料的体积 计算出1ml染料相当于多少毫克 T 抗坏血酸 分别以0 1 2 6 二氯酚靛酚钠溶液滴定至淡红色 并保持15秒不褪色 即达终点 10ml2 草酸 空白对照 三 样品的滴定 滤液2份 每份10mL 滴定方法同前 ml染料相当于TmgVc 四 计算 VA 滴定样品提取液所用染料的平均毫升数VB 滴定空白对照所用染料的平均毫升数C 样品提取液总的毫升数D 滴定时所取样品提取液的毫升数W 待测样品的重量 g T 为1ml染料能氧化抗坏血酸的毫克数 Vc含量 mg 100g样品 VA VB TD C 100W 1 整个操作过程要迅速 防止还原型抗坏血酸被氧化 2 滴定所用2 6 二氯酚靛酚的量应在1 4毫升之间 超出或低于此范围 应增减样品液用量或改变提取液稀释度 注意事项 3 微量滴定管要小心操作 实验报告 实验标题姓名 班级 学号实验原理DCPIP 蓝色 H DCPIPH 粉红色 DCPIPH 粉红色 VcDCPIPH2 无色 实验方法及简单步骤实验结果及计算 实验报告 ml染料相当于TmgVc 实际测得每