高中生物一轮复习 第40讲 微生物的利用课件.ppt

第40讲微生物的利用 考点一微生物的实验室培养 1 微生物的营养物质及功能 2 培养基的种类 3 无菌技术 消毒与灭菌 4 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基操作分析 1 培养基需冷却至50 时开始倒平板 原因 琼脂是一种多糖 在98 以上熔化 在44 以下凝固 倒平板时高于50 则会烫手 低于50 时若不能及时操作 琼脂就会凝固 估计培养基温度的方法是 培养基从灭菌锅中取出冷却一段时间后用手触摸 感觉上以刚不烫手为准 2 平板倒置原因 平板皿盖上会凝结水珠 培养基表面的温度也较高 平板倒置后 既可使培养基表面的水分更好地挥发 又可防止肛盖上的水珠落入培养基 造成污染 5 纯化大肠杆菌操作过程中的注意事项 微生物的接种方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法 1 平板划线法 操作第一步即取菌种之前及每次划线之前接种环都需要进行火焰灼烧灭菌 划线操作结束时 仍需灼烧接种环 每次灼烧目的如下表 从第二次以后的划线操作总是从上一次划线末端开始 能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐渐减少 最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落 2 稀释涂布平板法稀释涂布平板的操作比较复杂 且各个细节均需保证 无菌 应特别注意 酒精灯与培养皿的距离要合适 吸管头不要接触任何其他物体 吸管要在酒精灯火焰周围使用 例1某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验 实验包括制备培养基 灭菌 接种及培养 菌落观察计数 请回答与此实验相关的问题 1 培养基中含有蛋白胨 淀粉分别为细菌培养提供了和 除此之外 培养基还必须含有的基本 成分是和 2 对培养基进行灭菌 应该采用的方法是 3 为了尽快观察到细菌培养的实验结果 应将接种了湖水样品的平板置于中培养 培养的温度设定在37 要使该实验所得结果可靠 还应该同时在另一平板上接种作为对照进行实验 4 培养20小时后 观察到平板上有形态和颜色不同的菌落 这说明湖水样品中种细菌 一般说来 菌落总数越多 湖水遭受细菌污染的程度越 5 如果提高培养基中nacl的浓度 可以用于筛选耐细菌 这种培养基被称为 答案 1 氮源 碳源不作要求 碳源无机盐水 2 高压蒸汽灭菌 3 恒温培养箱无菌水 4 多高 5 盐 或nacl 选择性培养基 例2苯酚是工业生产排放的有毒污染物质 自然界中存在着降解苯酚的微生物 某工厂产生的废水中含有苯酚 为了降解废水中的苯酚 研究人员从土壤中筛选出只能降解利用苯酚的细菌菌株 筛选的主要步骤如图所示 为土壤样品 请问答下列问题 1 中培养目的菌株的选择培养基中应加入作为碳源 中不同浓度碳源的培养基 a 影响 b 不影响 细菌的数量 如果要测定 中活细菌数量 常采用法 2 为对照 微生物在 中不生长 在 中生长 与 培养基的主要区别在于使用法可以在 上获得单菌落 采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养 3 如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小 4 实验过程中如何防止其他微生物的污染 答案 1 苯酚a 影响稀释涂布平板法 2 的培养基没有加入苯酚作为碳源 培养基中加入苯酚作为碳源稀释涂布平板法或平板划线法以防止培养基冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基 3 5支洁净培养瓶一分别加入相同培养基 加等量的苯酚 用ph试纸检测这5支瓶内培养基的ph值 用苯酚调试使它们的ph值相等 苯酚是唯一的碳源 一分别接种5种等量的来自不同菌株的菌种一在相同的适宜条件下培养相同的时间一再用ph试纸检测这5支瓶内培养基的ph值 苯酚显酸性 不同菌株的菌种降解苯酚的能力不同 5支 瓶内培养基中的苯酚被分解的量不同 所以ph值不同 用ph试纸检测这5支瓶内培养基的ph值 从而比较不同菌株降解苯酚能力的大小 4 从制备培养基到接种与培养等全部实验过程保持无菌操作 a 对实验操作的空间 操作者的衣着和手 进行清洁和消毒 b 将用于微生物培养的器皿 接种工具和培养基等进行灭菌 c 实验操作应在酒精灯的火焰附近进行 d 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触 考点二微生物的分离 1 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1 实验原理统计菌落数目的方法是稀释涂布平板法 统计活细菌数 计算方法是每克样品上的菌落数一 c v m 设置对照 2 实验流程土壤取样一样品稀释一培养与观察 3 实验设计原则设立重复组 对照原则