高三生物备考动物细胞工程课件.ppt

提问 植物细胞工程常用的技术手段有哪些 植物组织培养 植物体细胞杂交 这些技术的理论基础 植物细胞的全能性 动物细胞全能性如何 动物细胞核具有全能性 二 动物细胞工程 常用技术动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体胚胎移植核移植 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础 1动物细胞培养液的主要成分 葡萄糖 氨基酸 无机盐 维生素和动物血清等 1 液体培养基 2 含有动物血清 动物体细胞大都生活在液体的环境 动物细胞培养 2 原理 细胞增殖 动物胚胎或幼龄动物的组织 器官 胰蛋白酶 单个细胞 加培养液 制成 细胞悬浮液 10代细胞 动物细胞培养 部分细胞 癌变 遗传物质改变 无限传代 动物细胞培养不能最终培养成动物体 50代细胞 原代培养 传代培养 细胞贴壁 剥离 分瓶 细胞株 细胞 细胞系 3 过程 思考 2 为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料 1 动物细胞培养液的主要成分是什么 较植物组培培养基有何独特之处 3 为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞 4 动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体 主要成分 葡萄糖 氨基酸 无机盐 维生素和动物血清等 独特之处有 1 液体培养基2 成分中有动物血清等 因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛 分裂能力强 增大接触面积 有利于组织细胞与培养液充分接触 不能 动物细胞培养只能使细胞数目增多 不能发育成新的动物个体 动物细胞生长特性 贴壁生长 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上 称为细胞贴壁 要求 培养瓶或培养皿的内表面光滑 无毒 易于贴附 细胞的接触抑制 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时 细胞就会停止分裂增殖 这种现象称为细胞的接触抑制 3 有关概念 原代培养 从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞 培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代培养 传代培养 将原代细胞从培养瓶中取出 配制成细胞悬浮液 分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养 称为传代培养 细胞株 原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞 大部分细胞衰老死亡 少数细胞存活到40 50代 这种传代细胞为细胞株 细胞系 细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态 只有部分细胞由于遗传物质的改变 使其在培养条件下可以无限制传代 这种传代细胞为细胞系 细胞株和细胞系的区别 细胞系的遗传物质改变 具有癌细胞的特点 失去接触抑制 容易传代培养 2 应用 1 生产蛋白质生物制品 2 检测有毒物质 许多致畸 致癌物质加入培养液后 培养细胞会发生染色体结构和数目的变异 根据变异细胞占全部培养细胞的百分数 可以判断某种物质的毒性 3 为烧伤病人植皮如何利用动物细胞培养技术 解决为烧伤病人植皮问题 利用动物细胞培养技术中细胞的贴壁生长和接触抑制特点 可以用烧伤病人自己的健康皮肤细胞培养出大量的自身薄层皮肤细胞供植皮所需 4 用于科学研究 生理 病理 药理 获得细胞 细胞的全能性 能获得细胞或产物 植物体或大量细胞 培养结果 或细胞产物 快速繁殖 培育无病毒植株等 培养目的 动物血清 植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物组织和动物细胞培养的比较 动物细胞融合 应用 制备单克隆抗体 原理 细胞膜的流动性 二 诱导动物细胞融合的方法 3 动物细胞融合的用途 制备单克隆抗体 仙台病毒 紫外线 丧失感染活性 不感染细胞 保留融合活性 诱导细胞融合 物理法化学法生物法 主要用于制备单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理 化学方法 同左 生物 灭活的病毒 物理 离心 振动 电刺激 化学 peg 诱导方法 使细胞分散后诱导细胞融合 去除细胞壁后诱导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合的比较 二 单克隆抗体 什么是抗体 抗体是机体受抗原刺激后产生的 并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白 效应b淋巴细胞产生抗体 效应b淋巴细胞与抗体 b淋巴细胞受抗原刺激后 可以产生相应抗体 动物体内的效应b淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体 每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用 每一个效应b淋巴细胞只能产生一种抗体 单克隆抗体 单个效应b细胞进行无性繁殖 克隆 形成细胞群 单克隆 这些细胞群就有可能产生化学性质单一 特异性强的抗体 单克隆抗体 遗憾 在体外培养条件下 一个b细胞是不可能无限增殖的 如何大量生产单克隆抗体 利用淋巴细胞产生抗体的功能利用肿瘤细胞无限增殖的特性利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞 单克隆抗体制备过程 细胞融合 筛选 足够数量的 能产生特定抗体的细胞群 单克隆抗体 化学性质单一 特异性强 灵敏度高 诱导其融合的方法有哪些 单克隆过程 思考 1 本过程利用了哪些原理 免疫原理 细胞融合原理和动物细胞培养原理 2 为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与b细胞融合 这样融合成的杂交瘤细胞 继承了双亲细胞的遗传物质 不仅具有b细胞分泌抗体的能力 而且还有无限增殖的本领 因而可以获得大量单克隆抗体 单克隆抗体的应用 与常规抗体相比 单克隆抗体产量高 特异性强 灵敏度高 优越性十分明显 应用主要有 1 临床诊断 2 作为载体 运载抗癌药物 形成 生物导弹 治疗肿瘤 资料 目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体 许多缺乏良好诊断手段的传染病 免疫性疾病 血液病 内分泌疾病和遗传病 用单克隆抗体作为诊断手段 是一个必然趋势 另外 用单克隆抗体做体内诊断 借以鉴别和定位体内 病灶 也引起人们的注意 目前 主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断 小结 两个过程 动物细胞培养过程 单克隆抗体制备过程 三个 一 一个诱导细胞融合的新方法 灭活病毒 一个新细胞 杂交瘤细胞 一个优势 单克隆抗体特异性强 灵敏度高的优势 1下图为某同学根据杂交瘤技术的方法 设计的生产破伤风杆菌的实验方案 制备单克隆抗体 b细胞 抗体 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞 分泌抗体 无限增殖 原代 传代 50 2动物细胞工程技术的基础是 a 动物细胞融合b 胚胎移植c 动物细胞培养d 核移植 3在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中 正确的是 a 结果是相同的b 杂种细胞的形成过程基本相同c 操作过程中酶的作用相同d 诱导融合的手段相同 4单克隆抗体制备过程中 骨髓瘤细胞和b淋巴细胞诱导融合后 要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 b淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞a b c d c 二 动物体细胞核移植技术和克隆动