冠心病患者LDL亚组分分析初步报告.doc

冠心病患者LDL亚组分分析初步报告2011-05-09 冯宁冯宗忱杨钧国宗义强戴闺柱 【摘要】目的研究冠心病患者LDL亚组分与正常人的差异。方法用非变性聚丙烯胺梯度凝胶电泳法分离LDL后，扫描、计算机积分法分析32例冠心病患者及32例正常对照者的LDL亚组分图谱。结果(1)冠心病组小密LDL占总LDL的（38.015.1），对照组占（16.59.2），差异有显著性（P0.01）。(2)小密LDL与甘油三酯水平呈正相关，r0.54，P0.05。结论(1)冠心病患者血浆小密LDL水平增高，与冠心病发病可能有一定关系。(2)小密LDL水平与甘油三酯水平正相关 。 【关键词】冠状动脉病LDL亚组分 Analysis of low density lipoprotein subfractions in coronary heart diseaseFENG Ning, FENG Zongchen, YANG Junguo, et al. Institute of Cardiovascular Disease, Tongji Medical University, Wuhan 430022 【Abstract】ObjectiveTo compare LDL subfractions in coronary artery disease (CAD) patients and normal individuals. MethodsLDL subfractions in 32 CAD patients and 28 normal individuals were separated by 2%-16% non-denaturing polyacrylamide gel electrophoresis. The LDL subfraction distributions were analyzed by the measurement of the area under the curve of the scanned gel. Results (1) Comparing with the normal individuals, the small dense LDL subfractions increased significantly in CAD patients (3815.1% versus 16.59.2% of total LDL, P0.01). (2) The levels of small dense LDL were significantly postively correlated with plasma triglyceride level. ConclusionThe increase in small dense LDL fraction may be a risk factor of CAD. 【Key words】coronary artery diseaseLDL subfraction LDL由大小、密度等不均一的颗粒组成。用密度梯度超速离心法或非变性梯度凝胶电泳法可将其分为许多亚组分，最多达15个亚组分。临床上大多分为3部分：小密LDL（small dense LDL）、大轻LDL（larger buoyant LDL）及中间密度LDL（intermediate LDL）。80年代后期至今，国外陆续发表一些病例对照试验，发现冠心病患者血浆中主要为小密LDL，而正常人以大轻LDL及中间LDL为主1，2。小密LDL水平升高者冠心病或心肌梗塞危险性显著增加3，4。作为预测冠心病危险性的指标比LDL-胆固醇更好4，5。我国人群血脂水平与西方国家有很大差别，至今尚未见LDL亚组分与冠心病关系的报道，因此本研究观察了冠心病患者的LDL亚组分分布情况。 对象与方法 1研究对象：冠心病患者32例，其中男性28例，女性4例，平均年龄(59.78.5)岁(4375岁)。冠心病诊断按WHO标准，其中陈旧性心肌梗塞12例、典型心绞痛，发作时ST段下移者20例，32例正常对照者中，男性27例，女性5例，平均年龄（48.16.5）岁(4264岁)。均经严格体检排除心血管疾病及影响血脂的疾病。 2方法：空腹12小时后采血分离血浆，测定甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）（试剂盒购自Boehringer Mannheim公司），并按Friedwald公式计算LDL-C。 LDL亚组分用2%16非变性聚丙烯胺凝胶电泳分离6。电泳缓冲液为：Tris 0.09 mol/L、硼酸0.08 mol/L、叠氮钠0.03 mol/L、Na2EDTA 0.0025 mol/L，pH 8.4。凝胶用油红O（0.04%的60%乙醇溶液）染色，5乙酸脱色后，用岛津930薄层扫描仪扫描、波长530 nm。计算机积分得出各峰面积及LDL亚组分相对含量。建立方法时以密度梯度超速离心法分离得的小密LDL及大轻LDL确定亚组分位置。同一样品在2次凝胶电泳上各点样4个，计算得出CV为7.2。 3统计方法：数据均用均数标准差表示。组间均值比较用t检验法。小密LDL与TG关系用相关分析。 结果 1冠心病组与对照组的血脂水平（表1）：冠心病患者血浆TG水平的均数虽高于对照者，但统计差异无显著性，可能为例数较少，个体差异较大之故。其他各项的均数，两组相近，无统计学差异。 表1对照组、冠心病组的血脂水平（mmol/L，s） 组别 例数 TG TC LDL-C HDL-C 对照组 32 1.390.58 4.310.91 2.300.73 1.350.27 冠心病组 32 1.720.84 4.560.97 2.640.92 1.330.37 2用2%16非变性梯度凝胶电泳可将LDL分为3个亚组分，相应地凝胶扫描时可见3个峰（图1、2）。迁移最快者为小密LDL、最慢者为大轻LDL，中间LDL介乎二者之间。由波峰面积得出各亚组分的相对百分含量。 14冠心病患者；58正常对照者。：大轻LDL；：中间密度LDL；：小密LDL 图1LDL亚组分电泳图谱 A：小密LDL占5.7%；：中间密度LDL占61.9%； ：大轻LDL占32.2%。 B：小密LDL占47.7%；：中间密度LDL占23.2%； ：大轻LDL占29.1%。：电泳方向 图2LDL亚组分电泳图扫描曲线 冠心病组小密LDL占总LDL的(38.015.1)%，对照组占(16.59.2)%，二者差异有显著性(P0.01)。两组合并作相关分析时，小密LDL与TG水平呈正相关，r=0.54，P0.05(表2)。 表2LDL亚组分相对含量（） 组别 例数 大轻LDL 中间LDL 小密LDL 对照组 32 38.112.7 46.414.1 16.59.2 冠心病组 32 34.112.2 27.611.6 38.015.1* 注：*与对照组比较，P0.01 讨论 Austin等1用梯度凝胶电泳法将LDL亚组分的分布分为两类：图形A以大轻LDL为主、图型B以小密LDL为主。分析109例心肌梗塞患者及121例对照者的结果，以图形B为主者心肌梗塞危险性增加3倍。80年代后期Coresh等2、Swinkel等4、McNamara等7报道小密LDL与冠心病关系密切，而且统计结果，冠心病患者与正常人LDL颗粒大小、密度的差别比LDL-C更为明显。Griffin等3比较冠状动脉造影确诊的冠心病患者与造影阴性者；心肌梗塞存活者及对照者的小密LDL超过2.6 mmol/L的例数，发现小密LDL升高者冠心病及心梗危险性分别为对照的4.5及6.9倍。而且即使用TG、HDL校正后，小密LDL仍为独立的危险因子。STAR8及SCRIP9试验中高胆固醇血症冠心病患者治疗数年后，冠状动脉造影比较病变进展情况，小密LDL为主、治疗后降低的患者，病变消退最为明显。Gardner等5从5个横断面调