药理学实验.doc

实验一 动物实验基本知识一、实验目的通过药理学实验的基础知识的学习和练习,掌握药理学实验的基本技能和方法。二、实验内容（一）教学电影：动物基本知识与实验技术；（二）实验：三、实验仪器、设备 实验动物：家兔、小鼠、实验器材：小鼠固定器家兔固定器、注射器兔台，手术器械，注射器，丝线，纱布等四、实验方法与步骤1、教师示教过程小鼠、大鼠的捉拿灌胃，腹腔注射，皮下注射，标记.家兔捉拿、固定、灌胃、静脉注射，肌肉注射等。重点示教小鼠、大鼠的捉拿灌胃.2、学生自己做实验操作练习。小鼠、大鼠的捉拿灌胃，腹腔注射，皮下注射，标记.家兔捉拿、固定、灌胃、静脉注射，肌肉注射等。1、捉持法 以右手提鼠尾，将小鼠放于粗糙面上，将鼠尾轻轻向后拉，以左手的拇指及其食指捏双耳及头部皮肤，无名指、小指及掌心夹其背部皮肤及其尾部，便可将小鼠固定。2、灌胃 左手持小鼠，使腹部朝上，颈部拉直，右手拿灌胃器子口交插入口腔，从舌面紧沿上颚进入食道。若遇阻力，应退出后再插。 3、皮下注射 一人抓小白鼠头部皮肤，右手拉鼠尾，另一人左手捏背部皮肤，右手持注射器刺入背部皮肤。4、腹腔注射 左手抓小白鼠，右手持注射器。取30将针头从下腹部刺入腹腔。5、尾静脉注射 将小白鼠置于固定筒内或倒置的大漏斗下，使鼠尾露出在外。用酒精棉球擦鼠尾，使血管扩张。左手拉住尾尖，选一条扩张最明显的尾静脉将针头刺入血管，推药。若有阻力，且局部变白，则需从新刺入血管。小结: 实验的认真及参与情况,实验室守则和实验的基本要求。同学在实验过程中出现的问题。五、实验报告要求 实验中认真观察实验现象，将实验记录在原始数据表格中，实验结束后，指导教师检查并签字。撰写实验报告要求内容完整、结论正确、书写规范、条理清楚、有分析、有讨论，并在规定时间内完成，及时交予实验指导教师。六、实验注意事项注意实验动物编号；动物捉拿、固定、给药、取血方法七、思考题动物捉拿、固定、给药方法有哪些？实验二 不同剂量对药物作用影响目的和原理观察药物不同剂量对药物作用的影响。药物剂量的大小决定血药浓度的高低，血药浓度又决定药理效应，因此药物剂量决定药理用强弱实验材料1动物：小鼠3只。2药品：o5苯甲酸钠咖啡因溶液(Caffeine and sodium benzoate solution)、4苯甲酸钠咖啡因溶液(Caffeine and sodium benzoate solution)。3器材:鼠笼、大烧杯、普通天平、1 m1注射器。实验步骤取小鼠3只，以苦味酸溶液涂毛作不同记号，称其体重，观察小鼠正常时的活动情况。给各鼠分别腹腔注射不同剂量的苯甲酸钠咖啡因：甲鼠o5 mg10 g体重，乙鼠2o mg10g体重，丙鼠8o mg10 g体重。将小鼠放人3个大烧杯中，密切注意先后出现的反应。咖啡因在小鼠身上可能引起的作用，按照轻重程度不同，大约有活动增加、呼吸急促、反射亢进、震颤、惊厥及死亡等。记录各鼠所出现药物反应的严重程度和发生快慢，并比较各鼠有何不同。结果整理及整理 记录并比较三只小白鼠出现的反应，分析不同给药剂量对药物效应的影响注意事项密切观察三只小白鼠先后出现的反应并记录各鼠出现药物反应的严重程度思考题 药物的剂量和作用的关系对临床用药有何重要意义?实验三 不同给药途径对药物作用影响一、实验目的观察药物的给药途径对作用的影响二、实验内容（一）演示（二）实验三、实验仪器、设备 家兔 5%异戊巴比妥钠注射液 2ml、5ml注射器、磅秤、剪刀四、实验方法与步骤1、教师示教过程取家兔2只，编号称重，先观察其正常活动情况，翻正反射及呼吸情况，然后一只从耳缘静脉缓慢推入5%异戊巴比妥钠注射液1ml/kg，一只肌内注射入等量药物，药后观察所发生的症状，2、学生自己做实验操作练习。五、实验报告要求 实验中认真观察实验现象，将实验记录在原始数据表格中，实验结束后，指导教师检查并签字。撰写实验报告要求内容完整、结论正确、书写规范、条理清楚、有分析、有讨论，并在规定时间内完成，及时交予实验指导教师。六、实验注意事项注意观察两兔翻正反射消失时间及呼吸抑制程度有何不同七、思考题不同给药途径对药物作用是如何影响的？实验四 传出神经系统药理实验一、实验目的观察毒扁豆碱、毛果芸香碱、阿托品和去氧肾上腺素对瞳孔作用二、实验内容（一）演示（二）实验三、实验仪器、设备 家兔 毒扁豆碱、毛果芸香碱、阿托品和去氧肾上腺素溶液滴管、测瞳尺、剪刀四、实验方法与步骤1、教师示教过程取家兔2只，编号称重，先观察其正常瞳孔大小，剪去睫毛后，在自然光下测瞳孔大小，用手电筒的光照射兔眼，观察瞳孔对光反射。 然后手指将眼睑下拉成杯状并压住鼻泪管，向左右两眼分别滴入1%阿托品溶液3滴与1%毛果芸香碱3滴，右眼15分钟后再滴入1%阿托品溶液3滴另一只左右两眼分别滴入1%去氧肾上腺素3滴与0.05%毒扁豆碱。右眼15分钟后再滴1%去氧肾上腺素3滴2、学生自己做实验操作练习。五、实验报告要求 实验中认真观察实验现象，将实验记录在原始数据表格中，实验结束后，指导教师检查并签字。撰写实验报告要求内容完整、结论正确、书写规范、条理清楚、有分析、有讨论，并在规定时间内完成，及时交予实验指导教师。六、实验注意事项测瞳孔时不能刺激角膜以免影响实验结果七、思考题毛果芸香碱对瞳孔的影响？实验五 镇静催眠药抗惊厥作用一、实验目的观察地西泮镇静催眠作用二、实验内容（一）演示（二）实验三、实验仪器、设备 小白鼠0.5%地西泮注射针剂（10毫克支） 生理盐水、注射器、烧杯四、实验方法与步骤1、教师示教过程1、取大小相近的小白鼠2只，称重编号，先观察正常活动，甲鼠腹腔注射0.5%地西泮注射针剂0.1毫升10g，乙鼠腹腔注射0.9%的氯化钠注射液0.1毫升10g 做观察对照，20分钟后观察两鼠变化。2、学生自己做实验操作练习。五、实验报告要求 实验中认真观察实验现象，将实验记录在原始数据表格中，实验结束后，指导教师检查并签字。撰写实验报告要求内容完整、结论正确、书写规范、条理清楚、有分析、有讨论，并在规定时间内完成，及时交予实验指导教师。六、实验注意事项记录两鼠症状出现时间七、思考题地西泮镇静催眠作用的特点？实验六 氯丙嗪镇静降温作用【目的】 观察氯丙嗪的镇静和降温作用并掌握其降温作用特点。【原理】 氯丙嗪的镇静作用是通过阻断中脑-边缘叶及中脑-皮质通路中的多巴胺受体而发生的。同时，氯丙嗪能抑制下丘脑体温调节中枢，使体温调节失灵，因而机体体温随环境温度变化而升降。【动物】 小白鼠3只。【药品】 0.08盐酸氯丙嗪溶液、生理盐水、液状石蜡。【器材】 托盘天平、肛表、大烧杯、1m1注射器、冰箱。【操作】 取小白鼠3只，称重编号，观察正常活动及精神状态。用电子温度计测正常体温。然后甲、乙两鼠腹腔注射0.08盐酸氯丙嗪溶液0.1m110g，丙鼠腹腔注射生理盐水0.1ml10g。用药后将乙、丙两鼠放入冰箱冷藏室。30分钟后各测一次体温，并观察小白鼠的活动情况。【结果】鼠号药物环境活动情况体 温用药前 用药后用药前 用药后30 甲乙丙氯丙嗪 氯丙嗪 生理盐水室温冰箱冰箱【讨论题】 1、氯丙嗪镇静和降温作用的机制、特点及临床意义。【注意事项】 l、室温影响实验结果，必须在30以下进行实验。 2、无冰箱时也可在大盆中放入冰块，造成局部环境低温进行实验。 3、测体温时，勿使小白鼠过度骚动，要固定好。每只小白鼠最好固定用一支体温表，且每次插入深度和时间要一致。 4、实验前24小时，最好将小白鼠放在准备实验的环境中适应，并小笼喂养。实验七 强心苷对离体蛙心作用【实验目的】1. 学习离体在位蟾蜍心脏的恒压灌流法，观察前、后负荷和心肌收缩性能对心功能的影响，并描绘心功能曲线的变化； 2. 制备实验性全心衰的动物模型；观察强心药物对衰竭心肌的治疗作用。【实验器材与药品】蛙类手术器械一套，恒压灌流装置一套，10ml量筒，小烧怀，动、静脉插管，计算，器滴管，坐标纸，任氏液，1:10,000去甲肾上腺素，1:10,000乙酰胆碱，21062105mol/L硫酸镉任氏液，0.2地高辛，0.2%普奈洛尔（按片剂重量计算），0.001%异丙肾上腺素。 【实验对象】蟾蜍或蛙【实验方法和步骤】一.离体在位心脏灌流标本的制备 1. 破坏蛙脑和脊髓、暴露心脏。 2. 分离出左、右主动脉，在其下方穿两根线备用。3. 用镊子夹住下腔静脉的上壁少许，用剪刀沿镊子下缘剪一小口，将事先充满任氏液（不含气泡）的静脉插管插入此切口，直至静脉窦内，用备用线结扎固定。翻转心脏向下，提起左主动脉，在左主动脉尽量长的远端剪一斜形切口，然后用充满任氏液的吸管插入心室，冲洗并反复数次（目的是避免血液堵塞插管）。注意不要进气泡。 4、将事先充满任氏液的动脉插管向心性插入，作为心搏出口，并用线结扎固定。5、把静脉插管与橡皮管1相连，但先不打开夹子；把动脉插管与橡皮管2相连. 二. 观察项目1. 每分输出量和有效心功率的计算方法2.观察实验因素对每分输出量和有效心功率的影响【实验注意事项】1. 实验过程中勿用手捏拿心脏，以免损伤心脏。 2. 心脏表面应经常滴加任氏液，以保持湿润。 3. 整个实验过程中，管道不要扭曲。 4. 实验过程中，应回收、循环使用任氏液或硫酸镉任氏液。【讨论思考题】1. 评价心功能指标有哪些？各有何优缺点？ 2. 影响心功能的因素有哪些？从心脏本身来分析，那些因素可影响心功能？ 3. 强心苷对心脏有何作用？中毒表现如何？为什么？ 4. 临床上左、右心衰表现各如何？治疗原则及药物选择各如何？实验八 利尿药对家兔尿量影响目的 1. 了解急性利尿的实验方法； 2. 观察速尿对麻醉兔的利尿作用。 【实验器材与药品】1. 动物选择可用大白鼠、小白鼠、家兔、猫和狗，其中以大白鼠较为常用。2. 实验方法 代谢笼实验法：适用于大、小白鼠； 直接自输尿管或膀胱收集尿液：适用于较大动物（家兔、猫、狗）。三、具体实验 材料 1. 动物：家兔 2. 器材：兔手术台、量筒、注射器、手术器械 3. 药品：25乌拉坦，1速尿 方法 1. 麻醉：取家兔一只，称重，耳缘i.v. 25乌拉坦4ml/kg； 2. 水负荷：麻醉后i.g.给自来水40ml/kg； 3. 手术：背位固定后剪去下腹部毛，于耻骨联合上方切开皮肤约45cm，并沿腹白线剪开肌肉，暴露膀胱，在少血管区做荷包缝合后行膀胱插管； 注意：膀胱插管需注满生理盐水 4. 记录正常尿量(ml2分钟)，连续记录10min； 5. 耳缘i.v.1速尿4mg/0.4ml/kg，记录给药后2、4、6、8、10、12、14、16、18、20min尿量毫升数(ml2分钟)。 结果 结果汇总，计算不同时间尿量的均值，以尿量毫升数(ml2分钟)为纵坐标，给药后不同时间为横坐标作直方图。 实验九 尼可刹米对家兔的影响【目的】观察尼可刹米对吗啡所致呼吸抑制的解救作用，并联系其临床意义。【原理】 吗啡可抑制呼吸。治疗量尼可刹米能直接兴奋延脑呼吸中枢，提高呼吸中枢对CO2的敏感性；也通过刺激颈动脉体化学感受器反射性兴奋呼吸中枢，用于急性吗啡中毒所致的呼吸抑制。 【动物】 家兔。【药品】 1盐酸吗啡溶液、5尼可刹米溶液。【器材】 兔固定器、婴儿秤、玛利气鼓、5m1及10mI注射器、胶布、酒精棉球、压力换能器、MedLab。 【操作】 取家兔1只，称重，置于固定器内。将玛利气鼓固定于家兔口鼻，另一端连接于压力换能器并将换能器连接于MedLab。首先记录正常的呼吸曲线，然后由耳静脉注射1%盐酸吗啡溶液12ml/kg,观察呼吸频率及幅度，待频率极度减慢，幅度显著降低时，立即由耳静脉注射5%尼可刹米溶液12ml，观察呼吸变化，待呼吸抑制被解除后，以稍快的速度追加尼可刹米0.5ml，观察惊厥的发生。【结果】 观察分析描记的呼吸曲线。【讨论题】1、为什么选用尼可刹米对抗吗啡的呼吸抑制作用？使用是时应注意什么？2、吗啡急性中毒的主要症状有哪些？【注意事项】 1、通气量调节好后不要再更动，否则会影响实验结果。 2、注射吗啡的速度应根据呼吸抑制情况调节，一般宜先快后慢。 3、尼可刹米应事先准备好，当出现呼吸明显抑制时立即注射，但注射速度不宜过快，否则容易引起惊厥。实验十 红霉素的体外配伍禁忌一、实验目的掌握红霉素的配伍禁忌，联系临床实际了解配伍禁忌的临床意义。二、实验内容（一）演示（二）实验三、实验仪器、设备 乳酸红霉素粉针剂，（0.9%）的氯化钠注射液，5%葡萄糖注射液，注射用水2ml、5ml注射器、四、实验方法与步骤1、教师示教过程将乳酸红霉素粉针剂编为甲、乙、丙号，然后甲瓶加入0.9%氯化钠注射液，乙瓶加入5%的葡萄糖注射液，丙瓶加入注射用水，均为6ml.振摇3-5分钟后，观察是否溶解。2、学生自己做实验操作练习。五、实验报告要求 实验中认真观察实验现象，将实验记录在原始数据表格中，实验结束后，指导教师检查并签字。撰写实验报告要求内容完整、结论正确、书写规范、条理清楚、有分析、有讨论，并在规定时间内完成，及时交予实验指导教师。六、实验注意事项溶液应充分摇匀七、思考题红霉素的配伍禁忌的临床意义？实验三： 药物的基本作用一、实验目的了解药物的兴奋作用与抑制作用，局部作用与吸收作用二、实验内容（一）演示（二）实验三、实验仪器、设备 家兔 5%的盐酸普鲁卡因 2.5%硫喷妥钠注射液四、实验方法与步骤1、教师示教过程取家兔一只，称重，先观察其正常活动情况，并用大头针刺其后肢，看其有无痛觉反应。然后在一侧坐