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文档简介
www.CRTER.org李景兴,等. 电针对骶髓损伤后神经源性膀胱容量及其组织形态学的影响电针对骶髓损伤后神经源性膀胱容量及其组织形态学的影响*李景兴1,张 泓2,艾 坤2,张雨辰2,匡静之2,鲍秋影2 (1衡阳市中心医院儿童康复中心,湖南省衡阳市 421000;2湖南中医药大学针灸推拿学院,湖南省长沙市 410208)文章亮点:1 实验旨在通过观察电针次髎、中极、三阴交(穴)对骶髓损伤后神经源性膀胱尿潴留大鼠膀胱组织苏木 精-伊红染色情况、最大膀胱容量的影响,从膀胱组织形态学及尿流动力学层面探讨电针次髎、中极、三阴交(穴)促进骶髓损伤后尿潴留大鼠膀胱功能修复的可能机制。2 实验选取 “次髎”、“中极”、“三阴交”三穴,此三穴为作者对近10年针灸治疗骶髓损伤后尿潴留文献进行研究,而统计出应用频率最高且有效的主穴,选穴具有科学性。实验造模方法采取的脊髓横断的手术方法,经过作者实践改良后使模型存活率、成模率显著提高。关键词:组织构建;组织构建基础实验;电针;骶髓损伤;尿潴留;膀胱容量;膀胱组织形态;逼尿肌;神经反射;省级基金主题词:电针;针刺穴位;膀胱;脊髓损伤;尿潴留基金资助:湖南省自然科学基金项目(13JJ3098)*;湖南省中医药管理局重点项目(201109)*;湖南省教育厅科研项目(1200264)*摘要背景:骶段的脊髓和腰椎病变导致脊髓损伤使骶髓初级排尿中枢受损或其周围神经(副交感和体神经)病变引起逼尿肌无反射,会导致尿潴留,进而导致膀胱组织细胞形态学也发生了病理性变化。目的:观察电针次髎、中极、三阴交穴对骶髓损伤后尿潴留模型大鼠最大膀胱容量及其组织形态学的影响。方法:SD雌性大鼠40只,随机抽取10只为空白组,其余制备骶髓损伤模型后随机摸球法均分为模型组、电针穴位组和电针对照点组。模型组大鼠只捆绑不针刺,穴位组取大鼠“次髎”、“中极”、“三阴交”,对照点组取非穴对照点,针刺后加电针,均治疗20 min。且所有大鼠在治疗后第14天和第22天行膀胱容量检测,治疗结束后取膀胱组织行苏木精-伊红染色观察大鼠膀胱组织形态学变化。结果与结论:电针穴位组最大膀胱容量较治疗前明显降低(P 0.01),并且较对照点组疗效更明显(P 0.05),穴位组膀胱容量差值(d值)较对照点组差异更明显(P 0.05)。电针穴位组膀胱组织形态学较模型组及对照点组有明显改善。说明电针次髎、中极、三阴交穴可有效降低骶髓损伤后尿潴留大鼠最大膀胱容量并使受损的膀胱组织细胞得到一定程度修复。EIectroacupuncture effects on bladder capacity and tissue morphology of the neurogenical bladder after sacral spinal cord injuryLi Jing-xing1, Zhang Hong2, Ai Kun2, Zhang Yu-chen2, Kuang Jing-zhi2, Bao Qiu-ying2 (1Rehabilitation Center for Children, Hengyang Central Hospital, Hengyang 421000, Hunan Province, China; 2College of Acupuncture, Moxibustion and Massage, Hunan University of Traditional Chinese Medicine, Changsha 410007, Hunan Province, China)李景兴,男,1983年生,湖南省郴州市人,硕士,医师,主要从事针灸治病机制及儿童成人康复的研究。283962818通讯作者:张泓,博士,教授,博士研究生导师,湖南中医药大学针灸推拿学院,湖南省长沙市 410007zh5381271中图分类号:R318文献标识码:B文章编号:2095-4344(2013)50-08697-06 修回日期:2013-10-17(201308060/DW)Li Jing-xing, Master, Physician, Rehabilitation Center for Children, Hengyang Central Hospital, Hengyang 421000, Hunan Province, China283962818Corresponding author: Zhang Hong, M.D., Professor, Doctoral supervisor, College of Acupuncture, Moxibustion and Massage, Hunan University of Traditional Chinese Medicine, Changsha 410007, Hunan Province, Chinazh5381271 Accepted: 2013-10-17AbstractBACKGROUND: Spinal cord injuries induced by sacral segment and lumbar lesions can damage the primary sacral micturition center or its surrounding nerves (parasympathetic and somatic nerve) to cause detrusor areflexia, thereby leading to urinary retention and further pathological changes in bladder tissue morphology.OBJECTIVE: To observe the effects of electroacupuncture at the Ciliao (BL32), Zhongji (RN3), Sanyinjiao (SP6) acupoints on bladder capacity and bladder tissue morphology of rats with urinary retention after sacral spinal cord injury. METHODS: Ten of 40 female Sprague-Dawley rats were randomly selected as blank group, and other 30 rats were randomly divided into model group, acupoint group and non-acupoint group. In the model group, the rats 3 P.O.Box 1200,Shenyang 110004 kf23385083received no electroacupuncture. In the non-acupoint group, acupuncture and electroacupuncture at non-acupoint points were performed, respectively, for 20 minutes. In the acupoint group, acupuncture and electroacupuncture were performed at the Ciliao, Zhongji, and Sanyinjiao acupoints. Bladder capacity was measured at days 14 and 22 after treatment. After treatment, bladder tissues were extracted for morphological observation with hematoxylin-eosin staining. RESULTS AND CONCLUSION: (1) The maximum bladder capacity in the acupoint group was obviously reduced after treatment (P 0.01); the curative effect in the acupoint group was more obvious than the non-acupoint group (P 0.05); the difference between preoperative and postoperative bladder capacity (d value) was more significant in the acupoint group than the non-acupoint group (P 0.05). (2) Compared with the model and non-acupoint groups, morphological changes in the bladder tissue were improved more significantly in the acupoint group. These findings indicate that electroacupuncture at the Ciliao, Zhongji, and Sanyinjiao acupoints can effectively reduce the maximum bladder capacity and repair the damaged bladder tissue after sacral spinal cord injury.Subject headings: electroacupuncture; acupuncture points; urinary bladder; spinal cord injuries; urinary retentionFunding: the Natural Science Foundation of Hunan Province, No. 13JJ3098*; the Major Project of Hunan Provincial Administration of Traditional Chinese Medicine, No. 201109*; the Research Project of Hunan Provincial Education Bureau, No. 1200264*Li JX, Zhang H, Ai K, Zhang YC, Kuang JZ, Bao QY. EIectroacupuncture effects on bladder capacity and tissue morphology of the neurogenical bladder after sacral spinal cord injury. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu. 2013;17(50):8697-8702.8701ISSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAH0 引言 Introduction骶髓损伤后神经源性膀胱是指发生在骶段的脊髓和腰椎病变导致的脊髓损伤使骶髓初级排尿中枢受损或其周围神经(副交感和体神经)病变引起的以逼尿肌无反射,膀胱容量不断增大,尿液无法排出,导致尿潴留的一种膀胱功能障碍。这种功能障碍导致膀胱组织细胞形态学也发生了病理性变化,由此继发的反复尿路感染,甚至肾功能衰竭,成为脊髓损伤患者死亡的重要原因之一1-3。完整的逼尿肌超微结构是保证膀胱正常收缩功能的前提条件4。有研究者提出脊髓损伤后膀胱逼尿肌平滑肌出现了细胞凋亡,并有人认为凋亡的增加可能是导致逼尿肌功能减退的一个重要原因5。相关文献表明临床上判断逼尿肌功能可以膀胱壁活检逼尿肌电镜观察结果为依据6。有学者通过建立大鼠脊髓损伤模型进行膀胱测压、膀胱容量测定等及体外逼尿肌条实验7-8,证实了脊髓损伤改变了逼尿肌兴奋性,使膀胱最大容量、膀胱顺应性发生改变。王俊华等发现电针神经源性尿潴留大鼠的关元穴可提高逼尿肌兴奋性、增加膀胱收缩张力、改善逼尿肌的收缩频率,重建膀胱排尿功能9。祖国医学将“尿潴留”归属“癃闭”范畴,针灸疗法对于脊髓损伤后神经源性膀胱,其双向调节膀胱功能与抗泌尿系感染的功效已被大量临床和实验研究所证实10-14。通过对相关临床及科研论文进行统计表明,针灸治疗脊髓损伤后尿潴留取穴规律以关元、中极、次髎、三阴交为最多15。根据中医经穴理论,“次髎”穴为八髎穴之一,位于膀胱经第一侧线上,既是局部取穴,又是治疗膀胱病变的经验要穴。“中极”穴为膀胱之募穴,募穴为脏腑经气结聚之处,可治本脏腑之病,可助膀胱气化,能调节膀胱功能,善治膀胱约束无权之“遗溺”或膀胱气化失司的“癃闭”。“三阴交”乃足三阴经交会穴,足三阴经循行少腹或阴器,可通调下焦气机,有利于调整膀胱功能。作者这次实验制作骶髓损伤后神经源性尿潴留大鼠模型,观察电针“次髎”“中极”和“三阴交”三穴,对大鼠治疗前后最大膀胱容量、膀胱组织形态学的影响,初步揭示电针对骶髓损伤后神经源性膀胱保护作用及电针治疗该病的有效性,为电针治疗骶髓损伤所致神经源性膀胱尿潴留提供一定的实验依据。1 材料和方法 Materials and methods 设计:动物实验观察。时间及地点:实验于2012年6月至2013年2月在湖南中医药大学实验动物中心,经穴与脏腑相关重点研究室完成。材料:实验动物:雌性SD大鼠40只,SPF级,体质量250-280 g,由湖南中医药大学实验动物中心提供,实验动物许可证号:scxk(湘)2011-0003。实验过程中对动物的处置符合医学伦理学标准。电针对尿潴留大鼠膀胱容量及其组织形态学影响的主要仪器:来源仪器上海瑞仰净化装备有限公司江南光学集团日本Olympus 公司美国AO公司苏州医疗用品厂苏州医疗用品厂有限公司全套动物手术器械、牙科探针、CBV-1500A型无菌工作台XS-200型双目显微镜Bx-70显微成像系统820型薄片切片机毫针(直径0.3 mm25 mm)SDZ-V型电子针疗仪实验方法:实验分组:大鼠常规饲养20 d后编号,随机选取10只作为空白组,其余30只制备骶髓完全横断性损伤模型,待造模成功后,采用随机摸球法均分为3组(n=10):模型组、电针穴位组、电针穴位对照点组。动物模型制备:采用Hassan Shaker16脊髓横断法并参照相关文献17加以改良,制作大鼠骶髓横断模型及进行相关术后护理16。具体操作方法如下:除空白组外,其余30只大鼠禁食不禁水12 h后造模。造模前1 h腹腔注射青霉素20104 U以预防感染,实验时予10%水合氯醛(400 mg/kg)腹腔麻醉18,将大鼠俯卧固定于鼠板上,剔除腰骶部鼠毛,络合碘消毒术区皮肤,铺巾。大鼠骶髓损伤在S2-S4节段(对应椎体L2-L4)的任意部位7,这次实验以L2-L3椎间隙为中心点(尾骨与骶骨相连的连接为第4骶椎下19),纵向切开皮肤约2 cm,逐层钝性分离。显露L2-L4的棘突和椎板,找到L2-L3椎间隙,切断棘间韧带,左手持弯止血钳夹住L3棘突,右手用蚊式钳将L2或和L3全椎板咬除,显露脊髓。右手用牙科探针大弯端从腹侧穿过,挑起脊髓,用眼科剪剪断或手术刀沿牙科探针切断脊髓,探针自然脱出即可。然后于横断处尾端切除2 mm,为保证脊髓全切,再用探针大弯端在脊髓横断处反复钩刮,随后止血、缝合,络合碘消毒伤口。皮下注射乳酸钠林格液2 mL以防止术后电解质紊乱。大鼠置于37 恒温电热毯单笼饲养,观察术后大鼠肛温。自由进食、水,必要时滴管喂糖盐水,creds手法协助排尿、排便,3次/d,予青霉素20104 U腹腔注射以防止伤口及尿路感染20-21,前3 d每天2次,第4-7天1次/d,连用7 d后停用。在动物脊髓休克期后,如果只有前肢参与行走,后肢在前肢行走时处于拖动状态,且在大鼠耻骨联合上缘触及胀大的膀胱,表示出现尿潴留的症状则认为是成功的骶髓损伤后神经源性尿潴留大鼠模型。电针方法:穴位定取:根据李忠仁主编实验针灸学及华兴邦制定的实验动物图谱提供的方法,并模拟人体腧穴骨度分寸法量取。电针穴位组由“次髎”、“中极”、“三阴交”组成。次髎:在骶部髂后上棘内下方,第2骶后孔处,直刺约为15 mm;中极:下腹部前正中线上,神阙穴与耻骨联合上缘连线的上4/5与下1/5交点处,平刺5 mm(注:神阙穴为胸锁联合与耻骨的连线下1/4与3/4交点处22);三阴交:后肢内踝尖直上方1 cm处,直刺5 mm。对照点组均为穴外侧旁开0.3 cm处取穴(中极取左侧),刺法同穴位组。电针操作方法:造模后第15天起,除空白组大鼠外,均束缚于大铁笼盖上按组进行治疗:模型组只捆绑不电针;穴位组针刺后取双次髎为一组,左侧接正极,右侧接负极;中极,三阴交为一组,分别接负极、正极,三阴交穴隔日左右交替取穴,即治疗第1,3,5,7天取左侧三阴交,第2,4,6天取右侧三阴交。对照点组电针操作方法与穴位组相同。电针时间20 min,疏密波(10/50 Hz),强度以肢体轻微颤抖为度,1次/d,共7次。治疗前后最大膀胱容量变化:所有大鼠均于造模后第14天和治疗7次后1天(即第22天),在大鼠清醒状态下所测的膀胱容量值分别作为治疗前、后最大膀胱容量。方法:大鼠仰卧位绑于鼠板上,络合碘消毒大鼠尿道口、会阴部及腹股沟区。参照相关文献7采用双管法,将1根事先充满生理盐水的且用灭菌石蜡油润滑的无菌3F导尿管(红色)插入尿道;按压膀胱,使膀胱内的残尿经红色导尿管尽量排净,并按同样的方法将黑色导尿管(注水管)导入膀胱。然后用1 mL注射器向黑色导尿管内推注生理盐水,速度0.05 mL/s,注意使注射器与注水导尿管接合紧密,一边注射一边体会手下是否有阻力,观察出水管口是否有水滴溢出,若有溢出,此时的注水量即为膀胱的最大容量。测量完毕,拔出注水管。将注入膀胱的生理盐水通过出水导尿管排净,络合碘消毒尿道口及会阴部。光镜下观察膀胱组织细胞形态学变化:膀胱容量测定后(造模后第22天),所有大鼠予10%(5 mL/kg)水合氯醛腹腔过量麻醉,迅速剖腹取膀胱,冰生理盐水冲洗后于冰上分离。在膀胱颈、膀胱体和膀胱三角取 1 cm1 cm组织块,40 g/L多聚甲醛室温下固定 24-48 h后,石蜡包埋,切片,进行苏木精-伊红染色并在光镜下观察膀胱组织形态,并用 Bx-70显微成像系统采集电脑图像。主要观察指标:观察电针治疗前后各组大鼠最大膀胱容量、膀胱容量差值(d值)及光镜下膀胱组织细胞形态学特征。统计学分析:采用SPSS 16.0进行数据分析,数据用s表示。所有资料均进行正态性检验;多组计量资料采用单因素方差分析(One-way ANOVA)。自身前后对照采用配对设计均数比较,配对成功且子差值服从正态分布者采用配对t 检验。 2 结果 Results2.1 实验动物数量分析 纳入实验大鼠40只,随机分为4组,造模成功率为100%,其中34只进入结果分析,空白组10只,模型组、对照点组及穴位组各8只,每组各死亡2只,均因自噬或膀胱破裂死亡。2.2 大鼠最大膀胱容量测定 造模后大鼠最大膀胱容量较空白组明显升高,差异有非常显著性意义(P 0.01),提示膀胱容量增大,出现排尿功能障碍,为造模成功的指征之一;治疗后电针对照点组,电针穴位组膀胱容量较模型组膀胱容量明显降低(P 0.05,P 0.01),且电针穴位组疗效较对照点组疗效更好(P 0.01),穴位组治疗前后膀胱容量差值(d)较对照点组更大(P 0.05),说明电针次髎、中极、三阴交可有效降低膀胱容量。见表1。表1 尿储留大鼠经电针治疗前后最大膀胱容量的比较Table 1 Maximum bladder capacity in rats with urinary retention before and after electroacupuncture treatment (s, mL) 组别n治疗前治疗后D(治疗前-治疗后)空白组100.970.100.960.14-0. 010.17模型组8 4.340.23a4.450.25-0. 110.36电针对照点组8 4.410.25a 3.070.47b 1.340.41d电针穴位组8 4.200.21a 2.650.37c 1.650.24ef与空白组比较,aP 0.01;与治疗前比较,bP 0.05,cP 0.01;与模型组比较,dP 0.05,eP 0.01;与对照点组比较,fP 0.05。注:治疗后电针对照点组及电针穴位组膀胱容量明显降低(P 0.05,P 0.01),且电针穴位组疗效较对照点组疗效更好(P 0.01),说明电针次髎、中极、三阴交可有效降低膀胱容量。2.3 光学显微镜下观察大鼠膀胱组织苏木精-伊红染色结果 实验通过膀胱组织苏木精-伊红染色光镜下观察到:空白组:黏膜上皮组织连续,层次清晰,不厚不薄,有三四层,各层细胞形态正常;无细胞空泡,或炎症细胞浸润,无异常出血或毛细血管扩张,见图1。A:100 B:400注:各层细胞形态正常。图1 空白组正常大鼠膀胱组织苏木精-伊红染色结果Figure 1 Hematoxylin-eosin staining of bladder tissue from rats in the blank group电针穴位组:上皮组织层次清楚,连续,表层细胞正常。可见少量细胞空泡,但程度较轻,偶见少量中性粒细胞,基层与上皮组织之间偶见异常出血或毛细血管扩张,见图2。电针对照点组:黏膜上皮组织可见脱落,层次紊乱,厚薄不均,细胞大小不一,可见较多空泡细胞,黏膜上皮组织层和肌层均可见较多中性粒细胞浸润,血管外异常出血或毛细血管扩张,见图3。模型组:上皮组织脱落,层次紊乱,膀胱壁变薄,可见大量空泡细胞,黏膜层及肌层可见大量中性粒细胞浸润,以及大量血管外异常出血或严重毛细血管扩张,见图4。A:100 B:400注:上皮组织层次清楚,表层细胞正常。可见少量细胞空泡,偶见少量中性粒细胞,基层与上皮组织之间偶见异常出血或毛细血管扩张。图2 尿潴留大鼠针刺“次髎”、“中极”、“三阴交”治疗 20 min后大鼠膀胱组织苏木精-伊红染色结果Figure 2 Hematoxylin-eosin staining of bladder tissue from rats at 20 min after electroacupuncture at the Ciliao (BL32), Zhongji (RN3), Sanyinjiao (SP6) acupointsA:100 B:400注:黏膜上皮组织可见脱落,层次紊乱,厚薄不均,细胞大小不一,可见较多空泡细胞,黏膜上皮组织层和肌层均可见较多中性粒细胞浸润,血管外异常出血或毛细血管扩张。图3 尿潴留大鼠非穴对照点针刺后加电针治疗20 min后大鼠膀胱组织苏木精-伊红染色结果Figure 3 Hematoxylin-eosin staining of bladder tissue from rats at 20 min after acupuncture and electroacupuncture at non-acupoint points A:100 B:400注:上皮组织脱落,层次紊乱,可见大量空泡细胞,黏膜层及肌层可见大量中性粒细胞浸润,以及大量血管外异常出血或严重毛细血管扩张。图4 尿潴留模型组大鼠膀胱组织苏木精-伊红染色结果Figure 4 Hematoxylin-eosin staining of bladder tissue from rats in the model group3 讨论 Discussion祖国医学认为尿潴留属于“癃闭”的范畴,肾气不足,膀胱气化失司,三焦不能通调水道为本病的基本病因病机。“次髎”穴属于膀胱经,既是局部取穴,又是治疗膀胱病变的经验要穴。针灸聚英指出“次髎,主大小便不利”。“中极”穴为膀胱之募穴,为足三阴与任脉之会,六腑病多取募穴,亦为治此病要穴。“三阴交” 乃足三阴经交会穴,足三阴经循行少腹或阴器,可通调下焦气机,有利于调整膀胱功能。从现代医学解剖及排尿反射神经通路来看,排尿中枢位于骶丛神经,而“次髎”穴下有支配膀胱等盆腔脏器的骶神经,电针刺激该穴不仅可激活与排尿相关的传入与传出神经,而且可通过传入神经元将刺激传入到脊髓排尿中枢等高级中枢,引起逼尿肌及膀胱内括约肌节律性收缩和舒张运动,促使其建立并完成排尿反射23-24;“中极”穴下为支配膀胱和直肠的神经分支-髂腹下神经,又位于膀胱局部,通过电针中极穴可刺激膀胱,使膀胱逼尿肌发生收缩,使因逼尿肌收缩无力而导致膀胱充盈而消失的膀胱皱襞再次发生皱缩,达到引发排尿反射,产生尿意,治疗“癃闭”的作用25; Cheng等26报道电针“中极、关元”可通过自主神经刺激传入神经,调节膀胱活动促进其功能恢复。“三阴交”处有来自于L4-S3神经根的胫神经通过,该穴浅层有属L4神经节段的隐神经, 深层有L5、S1 神经节段27。电刺激该穴可通过反射弧传到脊髓后根激发腰骶部排尿中枢,引起反射性排尿28。骶髓损伤后由于逼尿肌无反射,膀胱容量不断增大,使平滑肌功能的减退,膀胱壁弹性的丧失29,并且由于残尿量的持续存在,使膀胱组织细胞产生凋亡,继发炎症反应,从而使膀胱组织发生组织形态学病理性变化30。临床研究表明,针刺次髎、中极、膀胱俞等穴可改善膀胱运动和尿道括约肌舒缩功能,降低膀胱容量,对低张性膀胱效果尤佳31。有学者研究发现,电镜下观察其神经源性膀胱无反射性逼尿肌超微结构,可见平滑肌细胞排列紊乱,且有去分化现象30。侯春林等32通过实验发现大鼠脊髓圆锥损伤后膀胱逼尿肌及其神经肌肉接头组织发生系列形态学变化。研究发现通过电针能改善逼尿肌组织超微结构,可明显减轻粗面内质网扩张和线粒体肿胀程度,减少胶原纤维,可有效提高逼尿肌弹性和顺应性。李怡等33通过针刺次髎、三阴交等穴,发现针刺可改善脊髓损伤患者膀胱运动和尿道括约肌舒缩功能,能有效降低膀胱的最大容量,减少残尿量。王俊华等34认为,电针治疗脊髓损伤后神经源性尿潴留的机制可能与逼尿肌兴奋性提高、逼尿肌的收缩频率增加,使膀胱收缩能力增强、膀胱最大容量和残尿量减少而到达重建膀胱功能有关。作者这次研究结果提示电针次髎、中极、三阴交穴可以降低尿潴留大鼠最大膀胱容量,减少残尿量,减轻炎症反应,改善膀胱组织细胞病变,一定程度上恢复逼尿肌张力,协调逼尿肌与括约肌功能,达到部分重建膀胱自主排尿功能。致谢:衷心感谢湖南中医药大学康复教研室张泓教授、艾坤老师、实验室陈北阳老师和参与本实验的师兄弟的帮助与指导,感谢维尔生物科技有限公司予以技术支持。作者贡献:实验设计由张泓、艾坤完成,实验实施由李景兴、张雨辰、匡静之、鲍秋影完成,实验数据收集评估处理、成文由李景兴完成,文章审校由张泓、艾坤完成,李景兴及张泓对文章负责。利益冲突:课题未涉及任何厂家及相关雇主或其他经济组织直接或间接的经济或利益的赞助。伦理要求:实验过程中对动物的处置符合2009年Ethical issues in animal experimentation相关动物伦理学标准的条例。学术术语:“中极”穴-“中极”穴下为支配膀胱和直肠的神经分支-髂腹下神经,又位于膀胱局部,通过电针中极穴可刺激膀胱,使膀胱逼尿肌发生收缩,使因逼尿肌收缩无力而导致膀胱充盈而消失的膀胱皱襞再次发生皱缩,达到引发排尿反射,产生尿意。作者声明:文章为原创作品,数据准确,内容不涉及泄密,无一稿两投,无抄袭,无内容剽窃,无作者署名争议,无与他人课题以及专利技术的争执,内容真实,文责自负。4 参考文献 References1 Jeong SJ,Cho SY,Oh SJ.Spinal cord/brain injury and the neurogenic bladder.Urol Clin North Am.2010;37(4):537-546.2 周谋望.关于脊髓损伤神经源性膀胱处理的几个问题J.中国康复医学杂志,2011,26(11):997.3 de Groat WC, Yoshimura N. 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