人教版教学课件单克隆抗体的制备.ppt

请同学们在课本P32页上找出 1 细胞融合的概念2 诱导动物细胞融合的方法3 意义并用笔画出来 2 2 2动物细胞融合与单克隆抗体 2 动物细胞融合过程 诱导 细胞膜穿通 细胞膜融合 细胞核融合 形成单核杂种细胞 动物细胞融合 杂种细胞 愈伤组织 杂种植株 植物细胞A 植物细胞B 原生质体A 原生质体B 植物体细胞杂交 去壁 原生质体融合 植物组织培养 物理法 化学法 生物法 灭活的病毒 常用方法 4 原理 膜的流动性 5 最有价值的应用 制备单克隆抗体 3 过程 不同DNA的两个细胞 灭活的病毒 PEG 杂交细胞 细胞融合完成的标志 细胞核融合成一个核 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理 化学方法 同左 灭活的病毒 物理 离心 振荡 电激 化学 聚乙二醇 诱导方法 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 膜的流动性 膜的流动性 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 植物 动物细胞融合的比较 1 能使动物细胞融合的特有的诱导方法是A 离心B 灭活的病毒C 电刺激D 振动 B 2 动物细胞融合的目的中最重要的是A 克服远源杂交不亲和B 制备单克隆抗体C 培育新物种D 生产杂种细胞 B 原始的方法获得抗体 特异性差 纯度低 想获得单一抗体 必须用单个B淋巴细胞进行无性繁殖 通过克隆形成细胞群 问题 体外培养的条件下 一个B淋巴细胞是不可能无限增值的 如何使单个淋巴细胞增殖呢 单克隆抗体的制备 设计方案 一个B淋巴细胞 只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞 能无限增殖 杂种细胞 1 单克隆抗体制备过程 细胞融合 筛选 足够数量的 能产生特定抗体的细胞群 单克隆抗体 诱导其融合的方法有哪些 1 为什么用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合 思考 因为B淋巴细胞具有分泌特异性抗体的能力 而骨髓瘤细胞具有在体外培养条件下大量增殖的本领 所以由某种B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合产生的杂交瘤细胞 能够在体外大量繁殖 并且产生特定的单克隆抗体 2 单克隆抗体制备过程中应用哪些细胞工程技术手段 动物细胞融合技术动物细胞培养技术 抗原 效应B细胞 筛选 筛选 杂交瘤细胞 3 制备过程为何要经过两次筛选 堂堂清 1 单克隆抗体的优点是 特异性强 灵敏度高 可大量制备 2 单克隆抗体具有特异性强 灵敏度高的原因是 每一种B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体 3 产生抗体的细胞是 产生单克隆抗体的细胞是 效应B细胞 浆细胞 杂交瘤细胞 4 杂交瘤细胞的特点 既能无限增殖 又能分泌特异性抗体 5 首次筛选是为了获得 第二次筛选时为了获得 杂交瘤细胞 既能无限增殖 又能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞 第一步 从一只小鼠体内提取T淋巴细胞 然后与骨髓瘤细胞诱导融合 第二步 再用普通培养基进行筛选 在该培养基上 未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死去 第三步 对上述经选择性培养的杂交瘤细胞直接在体外条件下做大规模培养 这样从细胞培养液中就可以提出破伤风杆菌单克隆抗体 实验评价 1 已注入过灭活破伤风杆菌的小鼠 2 B淋巴细胞 3 选择培养基 4 必须经过专一抗体阳性检验 下面是某同学根据单克隆抗体技术的方法 设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案 指出不足之处 单克隆抗体在诊断的应用上 具有准确 高效 简易 快速的优点 1 作为诊断试剂 2 用于治疗疾病和运载药物 疗效高 毒副作用小的新型药物 生物导弹 应用 生物导弹 4 科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合 得到杂交细胞 经培养可产生大量的单克隆抗体 与骨髓疤细胞融合的是 A 经过免疫的B淋巴细胞B 没经过免疫的T淋巴细胞C 经过免疫的T淋巴细胞D 没经过免疫的 淋巴细胞 A 5 单克隆抗体制备过程中 骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后 要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞 在这种培养基上不能存活 增殖的细胞是 B淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞A B C D A 6下图是单克隆抗体制备过程示意图 据图回答 1 图中A过程是从小鼠的脾脏中取得 细胞 该细胞能够产生 从小鼠体内提取分离该细胞之前 应给小鼠注射 类物质 2 B过程是一个 过程 该过程的进行需要灭活的 或 的诱导 效应B 抗体 抗原 细胞融合 病毒 聚乙二醇 7 右图为某同学根据杂交瘤技术的方法 设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案 据图回答 1 该方案能达到预期效果吗 原因是 2 图中 为过程 常用作为诱导剂 该细胞继承了 因此不仅能分泌 还有本领 3 该方案的目的是 不能 没有将抗原注入小鼠体内 无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞的遗传物质 特异性抗体 在体外培养条件下大量增殖 制备单克隆抗体 7 下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图 1 技术是单克隆抗体技术的基础 2 根据培养基的用途分类 图中HAT培养基属于 培养基 3 单克隆抗体与常规的血清抗体相比 最大的优越性是 4 动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外 还可以采用 5 选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的 特点 又具备淋巴细胞的