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实验八 植物可溶性糖的测定 实验原理 糖在硫酸作用下生成糠醛 糠醛再与蒽酮作用生成绿色络合物 颜色的深浅与糖含量有关 在625nm波长下OD值与糖含量成正比 由于蒽酮试剂与糖反应的呈色强度随时间变化 故必须在反应后立即在同一时间内比色 实验材料 小麦干种子小麦萌发种子萝卜干种子萝卜萌发种子均为市售 萌发条件为25 下黑暗萌发3天 实验步骤 1可溶性糖的提取 分别取2粒干种子和萌发种子于研钵中 加80 乙醇少许 磨成匀浆 倒入大试管中 再用80 乙醇洗涤 水浴80 半小时 冷却后转移至10ml量筒 并用80 乙醇定容至10ml 过滤 所得的透明液体即为可溶性糖提取液 2显色及比色 吸取上述糖提取液1ml 加入5ml蒽酮试剂 沸水浴10min 冷却后于625nm处测OD值 从标线取得提取液中糖的浓度 3绘制标准曲线 取标准葡萄糖溶液将其稀释0 20 40 60 80 g mL系列浓度 按上述方法分别测其OD值 绘制标准曲线 计算 V为植物样品提取液的体积C为提取液糖的浓度W为植物样重或为颗粒数可溶性糖 CV W同一种子类型之间按每粒种子计算 实验结果 表1不同种子和同一种子萌发前后可溶性糖含量变化 注意事项 1定量实验 且涉及标准曲线绘制 分光光度计的使用 因此溶液配制 材料选取等方面必须精确 仔细 减少误差 2实验组 对照组步骤应同步 使结论准确 问题 1 应用此法测得的糖具体包括哪几种糖类 2 用此法测定时 什么样的材料需要用活性碳脱色 3 请设计一实验 用本实验获得的同一份提取液在测定可溶性糖含量的同时 一并测定蔗糖 葡萄糖和果糖 这种测定方法比分别测定有什么优点 同一份乙醇抽提液 蒽酮比色法测定可溶性总糖 预处理间苯二酚比色法测定蔗糖 不预处理间苯二酚比色法测定果糖 葡萄糖氧化酶法
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