人教版高中生物选修一知识清单(高三一轮、二轮复习专用).doc

专题一、传统发酵技术1、比较传统发酵技术类型果酒制作果醋制作腐乳泡菜菌种酵母菌乳酸菌（常见种类 ）分类真核生物代谢类型生殖方式适宜：出芽生殖恶劣：孢子生殖发酵条件温度最适繁殖温度：最适发酵温度：氧气前期需要：进行有氧呼吸有利于 ；后期不需（缺氧呈酸性）：无氧条件下进行酒精发酵反应式有氧呼吸：氧气糖源充足时:注意：充气口插至发酵瓶底部;排气口离发酵液一段距离将葡萄汁装人发酵瓶，要留大约 的空间毛霉等产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质分解成 、脂肪酶讲脂肪分解成 反应式：酒精发酵：缺少糖源时：乙醇（ ） 醋酸；反应式：2、 传统发酵技术通常 （是/否）需要严格的灭菌。3、 果酒果醋制作流程：挑选葡萄冲洗榨汁酒精发酵果酒醋酸发酵果醋若为自然发酵，不能反复冲洗，防止 。 选择新鲜优质的葡萄，是先冲洗再去梗，还是先去枝梗再冲洗？为什么？葡萄酒呈现深红色原因？ 用带盖子的瓶子制作葡萄酒时，适时拧松、拧紧瓶盖的目的分别是什么？ 使用左侧装置时，充气口排气口的作用分别是？制作果酒、果醋充气口的打开情况分别为?排气后要连接长而弯的胶管（开口向 ） 的原因？酒精和醋酸发酵过程中，由于分别产生了 和 ，使PH下降。酒精发酵旺盛时，加醋酸菌能否变成醋酸？果汁发酵后酒精的检验:酒精+（酸性） 颜色由（ 色）（ 色）4、腐乳制作原理和流程图:p7让豆腐长出 加 腌制加 装瓶密封腌制选择豆腐的含水量约为 ，过高 ；过低 。白色菌丝，可分为 菌丝（白毛）和 菌丝（腐乳外部的皮儿）。加盐腌制：逐层加盐，随层数加高而 ，接近瓶口表面的盐要 。目的：a析出豆腐中的 ，使豆腐块变硬，以免过早酥烂；b ，避免豆腐块腐败变质。盐的控制：盐浓度过高会 ，浓度过低会 。卤汤由 和 组成。酒的控制：含量一般在 左右。酒精含量过高，使成熟时间 。酒精含量过低 ，导致食物腐败。用 对瓶口灭菌后密封腌制。红方加入了 ；糟方加入了 ；青方不加辅料。4、 泡菜制作原理和流程图:加入调味料装坛密封发酵成品选择新鲜原料修整、洗涤、晾晒、切分成条状或片状配置盐水（水：盐= ）经过 煮沸目的：a、 b、出去 。冷却目的：避免温度过高杀死微生物，保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响。坛沿注满水保证坛内乳酸菌所需的 环境。泡菜坛要选择透气性差的容器，以创造无氧环境，有利于乳酸菌发酵，防止蔬菜腐烂。5、 膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健康，绝大部分亚硝酸盐随尿排出。只有在特定的条件下（温度适宜和一定微生物，如胃中胃酸、硝酸还原菌）才会转变成致癌物 。6、 检测亚硝酸盐的原理和方法p10a、 原理：在 条件下，亚硝酸盐与 发生重氮化反应，与 结合形成玫 色 产物。提取剂：氯化镉、氯化 溶液，用盐酸调节pH至1。作用 。氢氧化铝乳液作用 氢氧化钠溶液 。b、 方法： （将标准显色液与样品处理液进行比较，以确定显色液中亚硝酸盐的含量）。7、 为什么泡菜坛内有时会长一层白膜，这层白膜时怎么形成的？8、 为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是 。9、 泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有 、 和 等。 10、 泡菜腌制中乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的变化专题二、微生物的培养与应用1、 人们按照微生物对_的不同需求，配制出供其 的营养基质叫培养基。2、 分类物理性质划分：a、液体培养基（不需要加凝固剂）：通常用于扩大培养，增加菌液浓度。通常需要振荡培养，这样微生物生长速度快，原因是能提高培养液 的含量，同时可以是菌体与培养液充分接触，提高 的利用率。b、固体培养基（需要加凝固剂，常使用 44下凝固，常规培养条件下呈固态）：通常用于分离、计数、鉴定。按化学成分划分：a、天然培养基（化学成分不明确）b、合成培养基（化学成分明确）按功能（用途）划分：a、选择培养基：添加（或缺少）某种化学物质，作用是多种微生物中选出需要的种类。例：以尿素为唯一氮源的培养基上筛选出尿素分解菌。b、鉴别培养基：添加某种指示剂或化学药剂，用于判定某一微生物的存在。例：大肠杆菌在伊红美蓝培养基上菌落呈现 。3、 培养基成分： 、 、水和 、生长因子（维生素、氨基酸、碱基等）。注：含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源；异养型微生物通常不能利用CO2作为碳源；蛋白质既可以作碳源，也可以做氮源；不是所有碳源都能作为能源，无机碳不能作为能源；NaHCO3既能提供碳源，又能作为无机盐；无机氮源也能提供能量，如NH3能为硝化细菌提供能量；在提供上述营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物对PH、特殊营养物质以及氧气的要求，霉菌需要将ph调制酸性，细菌的ph为中性或微碱性。牛肉膏提供的营养成分有 、蛋白胨提供的营养成分有 。（p15）4、 无菌技术概念：泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。获得纯净培养物的关键:防止外来杂菌的入侵。5、 无菌技术分类条件结果常用方法应用范围消毒（活体空间）较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的部分微生物煮沸消毒法（100，5-6min）日常用品巴氏消毒法（70-75，30min或80，15min。）不耐高温的液体（如可杀死牛奶中微生物并使 不被破坏）化学药剂消毒法用酒精（70）擦拭双手，用氯气消毒水源紫外线消毒法接种室、接种箱、或超净工作台灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌法接种环（针）、金属用具、试管口和瓶口干热灭菌法（160-170，1-2h）玻璃器皿高压蒸汽灭菌法（气压100Kpa、温度121，15-30min）培养基及容器注：高压蒸汽灭菌时，须加热煮沸锅内的水,彻底排出冷空气，否则会出现压强为气压100Kpa、温度却 121。（p14） 技术除了可以用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效避免 自身被微生物感染。（p15旁栏）使用后的培养基丢弃前一定要进行 处理，以免污染环境。（p15旁栏）6、 常见的培养基类型及适用对象牛肉膏蛋白胨培养基（又称肉汤培养基）以及LB培养基（培养 ）MS培养基（用于 ）麦芽汁琼脂培养基（用于培养 ）伊红美蓝培养基（用于检测 ）马铃薯琼脂培养基，及查氏培养基，分别用于培养真菌，霉菌（p83）7、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤： 注：牛肉膏和蛋白胨都易吸潮，称取时动作要_，称后及时_溶化时牛肉膏连同 一同放入烧杯；溶化过程中不断用玻璃棒搅拌，防止 。待培养基冷却至_左右时，在_附近倒平板。等平板冷却凝固后，将平板_，原因是既可使培养基表面水分更好的挥发，又可防止皿盖上的 落入培养基，造成污染。在灭菌前, 用牛皮纸包紧锥形瓶的目的灭菌时能避免水蒸汽凝结时浸湿棉塞；取出培养基锥形瓶时也能起到隔绝空气中杂菌污染的作用。8、分离纯化大肠杆菌纯化培养的原理:设法在培养基上得到由_繁殖而来的肉眼可见的菌落（概念）。在无菌条件将微生物接入培养基过程叫做接种。常见的接种方法有： 法和 法（看书了解其详细过程）。微生物的接种还包括斜面接种和 。核心是防止杂菌污染，保证培养物纯度。（p18旁栏）9、回答下列问题a、如图所示接种方法为 ， （能/否）计数需灼烧接种环 次。灼烧接种环后为什么待其冷却才能划线？第二次及其后的划线操作时为何总从上次划线的末端开始划线？怎样检测该平板灭菌是否合格？b、另一种接种方法使用接种工具为 ，其灭菌方法是 ，待酒精燃尽后冷却8-10s。（p19）每克样品的军落数等于C/V*M。另一种计数方法为显微镜直接计数法。10、菌种保藏a、临时保藏：适用于频繁使用的菌种，需将菌种接种到试管的 上，4冰箱保藏。缺点，保存时间不长，菌种容易被 或 。b、甘油管藏：适用于长期保存的菌种，温度为 。11、筛选菌种原理：人为提供有利于 生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时 其他微生物生长。（p21）启示（依据）：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到_中去寻找。12、微生物的计数方法：a、显微镜直接计数：特点：计数菌体本身；不能区分死菌与活菌；b、稀释涂布平板法（间接计数），又叫活菌计数法：该接种方法用于计数时结果通常偏 ，原因是 。（p22）涂布平板前需要对培养液进行多次稀释（梯度稀释）的原因是：聚集在一起的微生物易于分散成单个细胞。注：计数时一般选用菌落数为 的平板进行计数；同一稀释度加到 或以上的平皿中，经涂布培养后计算出菌落平均数，提高计数准确度；每克样品的菌落数等于C/V*M（C代表某一稀释度下平板上生长的 数，V代表涂布平板时所用的稀释液的 (ml)，M代表稀释 ）。c、滤膜法测定细菌的数目（大肠杆菌为例）：方法：将已知体积的水过滤后，将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养。结果：在该培养基上计数出现黑色菌落的数目即计算出大肠杆菌的数量（p26旁栏）13、土壤中分解尿素的细菌的分离和计数流程：土壤取样制备培养基样品的稀释取样涂布微生物的培养与观察菌落鉴定计数注： 具有微生物的天然培养就之称，绝大多数微生物生活在距离地表 cm的土壤层；菌落特征包含菌落的 、大小，隆起程度和 等，可作为菌种鉴定的重要依据；（p24）取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。制备选择培养基（尿素为唯一 ）时还要制备牛肉膏蛋白胨培养基作对照的原因用来判断选择培养基是否起到了选择作用,即相同的菌液，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显 （填多于或少于）选择培养基上的数目；尿素分解菌的鉴定原理 酶催化尿素分解成 （反应式：CO(NH2)2+H2O2NH3+CO2）培养基碱性增强 指示剂变红脲酶阳性。14、纤维素是一种由 首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质，是 细胞壁重要组成成分。纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即 酶(外切酶)、 酶(内切酶)和 酶，前两种酶使纤维素分解成 ，第三种酶将纤维二糖分解成 。15、筛选纤维素分解菌的方法是_。筛选原理是：刚果红可以与纤维素形成 色复合物，当纤维素被 分解后，复合物无法形成，出现以 为中心的 ，我们可以通过 来筛选纤维素分解菌。（p28）16、实验流程：土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上（鉴别培养基）挑选产生透明圈的菌落（纯化）进一步鉴定注：土壤取样时树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶、还可以将 埋在土壤里（埋入土壤10cm经30d左右的腐烂时间）等，将其埋在土壤中的作用使纤维素分解菌相对集中，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境；选择培养目的是增加纤维素分解菌的 ，以确保能够从样品中分离到 （p29），该过程用到的选择培养基为 体培养基；鉴别纤维素分解菌方法有两种：先培养微生物再加入刚果红，缺点操作繁琐，是刚果红会使菌落之间发生 在倒平板时加入刚果红，优点操作简便，不存在菌落混杂问题，缺点是a.产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈b.有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈；进一步鉴定时，为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行 实验，纤维素酶的发酵方法有 发酵和 发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的 含量进行定量测定。（p30）专题六、植物有效成分的提取1、 植物芳香油的特点：挥发性强，易溶于有机溶剂化学本质:主要为 化合物及其衍生物植物芳香油的常用提取方法：蒸馏、压榨、萃取，采用哪种方法要根据 来决定。2、 水蒸气蒸馏法：分类（根据原料放置位置）：水中蒸馏、水上蒸馏、水气蒸馏原理：利用水蒸气将 较强的植物芳香油携带出来，形成 ，冷却后，油水混合物又重新分出 。适用范围：挥发性强，化学性质稳定3、 压榨法：适用范围：易焦糊和含油量高的原料提取，如柑橘，柠檬，其不宜采用水中蒸馏原因是 。4、 萃取法：不适于蒸馏法的原料，可以考虑使用此方法。是将粉粹、干燥的植物原料用有机溶剂浸泡，使芳香油溶解在有机溶剂当中的方法。局限性：有机溶剂必须事先 ，除去杂质，否则会影响芳香油的 。（p73）5、 玫瑰精油的提取：玫瑰精油性质：化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一起蒸馏；方法：水蒸气蒸馏法实验流程：鲜玫瑰花+清水（比例： ）水蒸气蒸馏油水混合物分离油层(+NaCl)除水（+无水Na2SO4）（过滤）玫瑰精油注：a、加入NaCl作用：增加乳浊液中盐浓度，促进油水分层。b、用 工具分离油层和水层。关于蒸馏装置：a、安装仪器时一般按自下而上，从左到右的顺序，拆卸仪器的顺序与安装时相反。保证冷凝管下进上出。b、蒸馏开始时，先通冷水后加热；蒸馏完毕时，先撤热源后停止通水。6、橘皮精油的提取：性质：无色透明，具有橘香味，主要成分是 。实验流程：石灰水浸泡漂洗压榨过滤静置再次过滤橘皮油注：a、石灰水浸泡的作用 。b、浸泡后用 漂洗的目的是 。c、为了使橘皮油 ，要分别加入相当于橘皮质量0.25%NaHCO3和5%的Na2SO4，并调节PH至7-8。（p75）d、关于两次过滤：初次过滤：先用 过滤去除 ，然后 进一步去除质量较小的残留固体物。再用分液漏斗或吸管将上层的橘皮油分离出来。此时的橘皮精油还含有少量的水和果蜡，需在5 10 下静置57 d，让杂质沉淀。再次过滤：1、用吸管吸出上层澄清的油层，其余部分 过滤。7、胡萝卜素的提取概念：胡萝卜素是从胡萝卜中提取出的 色物质，包括多种结构类似物。种类：划分依据为双键数目，分为、三类，最主要的组成成分是 。功能：一分子的-胡萝卜素在人或动物的小肠、肝脏等器官可被氧化成两分子的 用途：a治疗因缺乏维生素A而引起的各种疾病；b广泛地用作 ；c使 细胞恢复成正常细胞。性质：胡萝卜素是橘黄色结晶，化学性质较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于 等有机溶剂。提取方法：a从 中提取；b从大面积养殖的 中获得；c利用微生物发酵生产。8、萃取剂的选择：（1）萃取剂的分类：水溶性有机溶剂：乙醇、丙酮；水不溶性有机溶剂：石油醚、乙酸乙酯、乙醚、苯、四氯化碳。（2）萃取剂的选择原则：具有 的沸点，能够充分 胡萝卜素，且不与水混溶；还要考虑萃取效率、对人的毒性、是否易燃，有机溶剂是否能从产品中完全除去，会不会影响产品质量等问题。综合分析以上原则，本实验最好选用 作为萃取剂。（3）影响萃取的因素及解决方法影响因素解决方法萃取剂的性质（主要）选择沸点高、水不溶性、无毒的有机溶剂萃取剂的使用量（主要）实验探究最适用量原料颗粒的大小、紧密程度将胡萝卜粉碎含水量将粉碎的胡萝卜干燥萃取温度适当提高萃取温度萃取时间延长萃取时间9、实验流程：胡萝卜 粉碎 干燥 萃取 过滤 浓缩 胡萝卜素（1） 干燥时温度不能 ，时间不能 ，否则会导致胡萝卜素分解。（2） 萃取时水浴加热原因 ，烧瓶需安装 装置，目的是 。（3） 过滤：过滤 ，除去固体物质；（4） 浓缩：按上图A所示安装蒸馏装置，对萃取液进行浓缩，以挥发掉 ，最终留在蒸馏烧瓶中的是 （填石油醚或胡萝卜素）10、胡萝卜素的鉴定1 鉴定方法： 法。2 鉴定原因：不同色素在 中的 不同，随层析液在 上的扩散速度不同，通过比较萃取样品和标准样品层析的结果，可以判断萃取样品的纯度。3 鉴定步骤： 量做基线：在1830滤纸下端距底边 处做一基线，在基线上取A、B、C、 D四点。 对照点样：A、D点点标准样品，B、C点点萃取样品 干燥层析：吹干滤纸上的溶剂，放入色谱容器中层析 对比观察：对比观察样品色素点与标准色素点的异同注:a层析时没有选择干净的滤纸，导致实验现象不明显。为了防止操作过程中对滤纸的污染，应尽量避免用手直接接触滤纸，可以戴手套进行操作；b点样时点样圆点太大（直径大于2mm），导致最终在滤纸上形成一条线，无法辨认被提取的色素。点样圆点的直径应为2mm；c将点好样的滤纸卷成筒状，卷纸时不能将滤纸两边相互接触，避免由于毛细现象导致溶剂沿滤纸两边的移动加快，溶剂前沿不齐，影响结果；d层析液不可没及样品原点，以免 ，使鉴定失败；e没有设置标准样品作对照。萃取液中是否提取到胡萝卜素，可通过与标准样品中的-胡萝卜素作对比予以确认。专题四、酶的研究与应用（一）、果胶和果胶酶以及影响酶活性的因素1.果胶(1)成分：由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物。(2)特点：不溶于水。(3)作用：是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一。2.果胶酶(1)种类：多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶等。(2)作用瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得更容易。把果胶分解为可溶性的半乳糖醛酸，使浑浊的果汁变得澄清。3.酶的活性与影响酶活性的因素(1)酶的活性概念：酶催化一定化学反应的能力。表示方法：用在一定条件下，酶所催化的某一化学反应的反应速度来表示。酶反应速度的表示方法：单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量。(2)影响酶活性的因素：温度、pH和酶的抑制剂等。4.酶的用量酶用量过多，会导致酶的浪费；酶用量过少，会限制酶促反应的速度。因此要得到适宜的酶用量，需通过设计实验进行探究。5、(1)从果胶是植物细胞壁以及胞间层的成分方面思考，果胶对果汁生产有哪些不利影响？答案果胶会影响出汁率；果胶还会使果汁浑浊。(2)果胶酶是否特指分解果胶的一种酶？该酶的化学本质是什么？答案否，果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶酯酶、果胶分解酶等果胶酶的化学本质是蛋白质。(3)果胶酶的作用原理：果胶酶能分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使得浑浊的果汁变得澄清，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸。6、影响酶活性的因素：影响酶促反应速度的外界因素有温度、pH、酶抑制剂、酶的用量、底物浓度等。注：温度、pH和酶抑制剂能通过改变酶的结构而影响酶的活性，但酶的用量和底物浓度只影响反应速度，并不影响酶的活性。（二）、探讨加酶洗衣粉的洗涤效果1.加酶洗衣粉(1)概念：指含有 的洗衣粉。(2)种类:酶制剂的种类：常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶。应用最广泛、效果最明显的是 和 。根据加入洗衣粉中酶制剂的不同，将其分为两种类型：单一型加酶洗衣粉和复合型加酶洗衣粉。前者是只加入一种酶制剂的洗衣粉，又分为蛋白酶洗衣粉、脂肪酶洗衣粉、淀粉酶洗衣粉等。后者是加入了多种酶制剂的洗衣粉。(3)影响洗涤效果的因素：温度、酸碱度和表面活性剂。2.生产方法:利用基因工程的方法生产出能够耐酸、耐碱、忍受表面活性剂和较高温度的酶。3.优点:加酶洗衣粉降低了表面活性剂和三聚磷酸钠用量，使洗涤剂朝低磷、无磷的方向发展，减少了对环境的污染。4、回答下列问题（1）从酶的特性角度分析含蛋白酶的洗衣粉能否洗涤羊毛、蚕丝类衣物。答案:不能。因为羊毛、蚕丝类衣物的主要成分是蛋白质，蛋白酶能分解蛋白质而损坏衣物。（2）从影响酶活性因素的角度，分析不同条件下的加酶洗衣粉的洗涤效果是否一定大于普通洗衣粉。答案:不一定。酶活性受温度、pH等影响，在低温等不利于酶活性发挥的条件下，加酶洗衣粉的洗涤效果不一定好于普通洗衣粉。（3）酶能直接添加到洗衣粉中吗？为什么？科学家是如何解决这一难题的？答案不能；因为洗衣粉中的表面活性物质会降低酶的活性；将基因工程生产出的酶用特殊水溶性物质包裹起来，与洗衣粉的其他成分隔离开来。注：a使用加酶洗衣粉时，必须注意洗涤用水的温度。碱性蛋白酶在3550 时活性最强，在低温下或70 以上就会失效。b添加了碱性蛋白酶的洗衣粉可以分解人体皮肤表面蛋白质，而使人患过敏性皮炎、湿疹等，因此，应避免与这类洗衣粉长时间接触。155、普通洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤效果的区别(1)对照实验：同种污渍(2)自变量：洗衣粉的种类。(3)无关变量：水温、水量、水质、洗衣粉的用量、衣物的材质和大小、洗涤方式和时间等。6、探究使用加酶洗衣粉的最适温度(1)对照实验：不同温度的实验组之间形成相互对照。(2)自变量：温度。(3)设置温度梯度时要考虑实际生活中的具体情况。7、添加不同种类的酶的洗衣粉的洗涤效果的区别(1)对照实验同种污渍不同种类的洗衣粉同种洗衣粉不同污渍(2)自变量：洗衣粉的种类和污渍的种类。8、洗涤效果的判断比较污染物的残留状况，如已消失、颜色变浅、面积缩小等。相同时间内比较污渍的洗涤状况，如污渍颜色变浅的程度、面积缩小的范围等；相同污渍时也可比较彻底清除所需要的时间的长短。（三）固定化酶和固定化细胞技术1、固定化酶的应用实例生产高果糖浆(1)反应原理：葡萄糖果糖。(2)生产过程（p49图片）2、固定化酶和固定化细胞技术(1)概念：利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术。(2)方法及适用范围化学结合法：多适用于酶的固定化(3)优点固定化酶：酶既能与反应物接触，又能与产物分离，酶不会进入产物中，从而提高产品质量；可以反复利用，降低成本。固定化细胞：与固定化酶技术相比，固定化细胞制备的成本更低，操作更容易。3、固定化酶和固定化细胞的原理(1)根据教材“高果糖浆的生产”分析固定化酶依据的原理与其优点分别是什么？答案：将酶固定在不溶于水的载体上，使酶既能与反应物接触，又能与产物分离；同时，固定在载体上的酶还可以被反复利用。(2)固定化细胞多采用哪种方法？该方法的原理与优点是什么？答案：包埋法。包埋法的原理是：将微生物细胞包埋在不溶于水的多孔性载体中。与固定化酶技术相比较，该方法成本更低，操作更容易。(3)固定化细胞与固定化酶所固定的酶种类有何区别？答案固定化细胞中含有多种酶，能催化一系列生化反应，而固定化酶中只含有一种酶，只能催化一种生化反应。(4)如果反应物是大分子，能否采用固定化细胞技术？为什么？答案不能。因为大分子难以通过细胞膜进入细胞，不能与细胞内的酶接触而发生反应，因此不能用固定化细胞技术，应该用固定化酶技术。(5)固定化酶和固定化细胞活性的维持需要的条件有何异同？答案都需要适宜的温度和pH等影响酶活性的条件，但固定化细胞还需要提供溶解氧和营养物质。注：固定化酶和固定化细胞：在实际应用中，酶更适用化学结合法和物理吸附法固定，原因是酶分子小，容易被多孔性物质吸附，更适合与化学物质结合，但容易从包埋材料中漏出。细胞体积大难以吸附或结合，因而多采用包埋法固定。4、制备固定化酵母细胞(1)固定方法：包埋法。(2)常用载体：一些不溶于水的多孔性载体，如明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等。(3)实验操作酵母细胞的 配制0.05 mol/L的CaCl2溶液 配制海藻酸钠溶液 海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 固定化酵母细胞5、用固定化酵母细胞发酵将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗23次 将150 mL质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到锥形瓶中 加入固定好的酵母细胞(凝胶珠) 置于25 下发酵24 h 观察是否有气泡产生，闻闻是否有酒味注：a海藻酸钠浓度过高不易形成凝胶珠（不呈圆形或椭圆形）；浓度过低细胞容易漏出，形成的凝胶珠内包埋的细胞过少（凝胶珠颜色过浅、呈白色）。b配制海藻酸钠时小火或间断加热并不断搅拌的目的是防止加热过程中海藻酸钠焦糊。c要等海藻酸钠溶液冷却后才能加入酵母细胞的原因是固定的酵母细胞必须保持活性才能发挥作用，冷却后加入酵母细胞的原因是防止高温杀死酵母细胞。d利用固定的酵母细胞发酵产生酒精时，当观察到产生很多气泡，同时闻到酒味，则证明实验获得成功。e加入酵母细胞的海藻酸钠溶液缓慢“滴入”CaCl2溶液中，使刚形成的凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30min左右，CaCl2溶液作用是凝胶形成稳定的结构(CaCl2浓度不宜过大，否则凝胶珠机械强度过大，通透性降低。)f将固定好的酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗23次原因：洗去凝胶珠表面多于的CaCl2溶液专题五：血红蛋白的提取和分离一、关于血红蛋白 血红蛋白是 动物红细胞的主要组成成分，负责血液中 的运输。 血液由 组成，其中 细胞最多。在红细胞的组成中，除水分以外，约90%是血红蛋白。血红蛋白由四条肽链组成，包括两条a-肽链和两条-肽链。其中每条肽链环绕一个 基团，此基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳。血红蛋白因含有 而呈现红色。二、关于蛋白质的分离 不同的蛋白质，其分子的 、所带电荷 、 、吸附性质和对其他分子的 等特性存在差异，可利用这些差异来分离不同种类的蛋白质。 1、凝胶色谱法 凝胶色谱法也称做分配色谱法，是根据相对 分离蛋白质的有效方法。所用的凝胶实际上是一些微小的 球体，这些小球体大多数是由多糖类化合物构成的，如葡聚糖或琼脂糖。在小球体内部有许多贯穿的通道，当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较 的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较 ，移动速度较慢:而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较 ，移动速度较 。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。思考1、有部分小分子蛋白质没有进入凝胶内，在凝胶外移动，导致分离的蛋白质 。若需要得到纯度更高的蛋白质，可用凝胶色谱法进行 。 2、电泳 电泳是指 。许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上 ，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷 的电极移动。电泳利用了待分离样品中各种分子 以及 ，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。 电泳和 电泳是两种常用的电泳方法。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于 以及 等因素。思考1、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳可使蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率只取决于它的分子大小，其原理是？分析:SDS的作用:SDS能使蛋自质发生完全变性，解聚成 ；SDS能与各种蛋白质(肽链)形成 ，SDS所带负电荷的量大大超过蛋白质(多肽)分子所带的电荷，因而可掩盖不同种蛋白质间的 ，使电泳迁移率完全取决于 。思考2、SDS-聚丙烯酰胺凝胶