江苏省启东市高中生物专题5多聚酶链式反应扩增DNA片段第1课时PCR的反应过程基础知识练习.docx

基础知识：PCR的反应过程1 在PCR反应中，只有一个DNA的片段作为模板，经过一次循环后，含引物的DNA单链占DNA总链数的()A1/2 B.1/4 C.1 D.1/82 多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。请回答下列问题：(1)DNA的两条链是反向平行的，通常将 的末端称为5，端，当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的 开始延伸DNA链。(2)PCR利用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题，但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代，科学家从一种Taq细菌中分离到 ，它的发现和应用解决了上述问题。要将Taq细菌从其它普通的微生物中分离出来。所用的培养基叫 。(3)PCR的每次循环可以分为 三步。假设在PCR反应中，只有一个DNA片段作为模板，请计算在5次循拜后，反应物中大约有 个这样的DNA片段。(4)简述PCR技术的主要应用(要求答2项)_。3 在PCR扩增循环过程中，下列说法正确的是（）A在每次循环中，变性所用的时间是一样多的B在每次循环中，复性所用的时间是一样多的C在每次循环中，延伸所用的时间是一样多的D以上说法都不正确4 PCR技术的操作步骤依次是（）A高温变性、中温延伸、低温退火B高温变性、低温退火、中温延伸C中温延伸、高温变性、低温退火D中温延伸、低温退火、高温变性5 分离血红蛋白溶液时，离心后试管的溶液分四层，血红蛋白在第()层。A一 B二C三 D四6 在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是()A防止血红蛋白被氧化B血红蛋白是一种两性物质，需要酸中和C磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程D让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能7 在PCR的实验操作中,下列说法正确的是()PCR所用的缓冲液和酶要在常温下储存离心管的盖子一定要盖严用手指轻弹离心管壁离心的目的是使反应液集中在离心管的底部A B. C. D.8 PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比,主要有两点不同,它们是()PCR过程需要的引物是人工合成的单链DNA或RNAPCR过程不需要DNA聚合酶PCR过程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通过对反应温度的控制来实现的PCR过程中,DNA不需要解旋,直接以双链DNA为模板进行复制A B. C. D.9 PCR技术的操作步骤依次是（ ）A高温变性、中温延伸、低温复性 B. 高温变性、低温复性、中温延伸C中温延伸、高温变性、低温复性 D. 中温延伸、低温复性、高温变性10 关于DNA粗提取与鉴定实验的有关说法正确的是（ ） 充分溶解DNA的盐溶液是0.14mol/L的NaCl溶液 实验中提取较纯净的DNA利用了DNA不溶于酒精的特点 对最后提取出DNA用二苯胺试剂鉴定时需用酒精灯直接加热 实验操作过程中先后两次加入蒸馏水的作用相同参考答案：1 答案： B解析： 经过一次循环后，DNA单链共4条，含引物的DNA单链只有1条。2 答案： 磷酸基团 3端 耐高温的TaqDNA聚合酶 选择培养基 变性、复性和延伸 32 遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等（要求答2项）解析： 本题考查PCR技术有关知识。DNA的两条链是反向平行的，通常将含有游离的磷酸基团的末端称为5，端，而DNA聚合酶从引物的3开始延伸DNA链；在体外扩增DNA时不用解旋酶而是用热变性处理的方法打开DNA双链，因此需要使用耐高温的DNA聚合酶；PCR的每次循环可以分为变性、复性和延伸三个步骤，五次循环后得到25个DNA片段。PCR技术有广泛的应用，可以用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、克隆基因等方面。3 答案： D解析： 4 答案： B解析： PCR技术的操作步骤依次是：高温变性、低温退火、中温延伸。5 答案： C解析： 分离血红蛋白溶液时，离心后可明显观察到试管中液体分四层，从上向下数依次为：无色透明的甲苯层，白色薄层固体(脂溶性物质的沉淀层)、红色透明液体(血红蛋白水溶液)、暗红色沉淀物(其他杂质)，故血红蛋白分布于第三层。6 答案： D解析： 利用磷酸缓冲液模拟细胞内pH环境，保证血红蛋白的正常结构和功能，便于分离观察和研究。7 答案： C解析： PCR所用的缓冲液和酶需装成小份,并在-20储存;盖严离心管口的盖子,防止实验中外源DNA污染;用手指轻轻弹击管的侧壁,使反应液混合均匀;离心的目的是使反应液集中在离心管的底部,提高反应效果。8 答案： C解析： PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比较,主要有两点