乙型肝炎疫苗.doc

重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）外文名称Recombinant Hepatitis B Vaccine (Saccharomyces cerevisiae)剂 型注射剂批准文号S20100002药品类型生物制品规 格每1次人用剂量1.0 ml/60g目录1基本信息2成分和性状3接种对象4作用与用途5规格6免疫程序与剂量7不良反应8注意事项9贮藏10包装11有效期12执行标准13批准文号1基本信息为使更多的人群免受乙肝病毒的侵害，解决低无应答人群按常规免疫剂量接种乙肝疫苗后没有产生保护性抗体的问题，60g/1.0ml/支规格的重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）可用于低无应答人群的免疫预防。 2成分和性状本品系由重组酿酒酵母表达的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）经纯化，加氢氧化铝佐剂制成。为乳白色混悬液体，可因沉淀而分层，易摇散，不含任何防腐剂。有效成分：乙型肝炎病毒表面抗原。辅料：氢氧化铝、氯化钠。3接种对象本疫苗适用于对乙型肝炎疫苗常规免疫无应答的16岁及以上年龄的乙型肝炎易感者。以上所述“无应答者”系指按照常规免疫剂量和程序接种3剂乙型肝炎疫苗后，经采血确认其抗体水平未达到阳转者（10mIU/ml为阳转标准）。 4作用与用途接种本规格疫苗后，可刺激对常规剂量和程序接种无应答人群的机体产生抗乙型肝炎病毒的免疫力。用于预防乙型肝炎。2 5规格每支1.0 ml。每1次人用剂量1.0 ml，含HBsAg 60g。 6免疫程序与剂量（1）于上臂三角肌肌内注射。（2）根据目前临床研究结果，推荐无应答者接种1剂（60g），经采血确认其抗体水平仍未达到阳转者再考虑接种第2剂，两剂间隔至少4周以上。 7不良反应基于国内已完成的1105例16岁以上无应答者的临床试验结果汇总分析（详见【临床试验】），60g（445例）、30g（439例）和10g（221例）疫苗组不良反应总体发生率分别为33.03%、31.21%、29.86%。所观察到的不良反应均以1级不良反应为主，未发生3级以上不良反应，所有不良反应均在7日内恢复。常见不良反应：局部反应表现为注射局部疼痛、硬结、红斑、肿胀、皮疹、瘙痒等；全身反应表现为发热、头痛、疲倦乏力、变态反应、肌肉痛；偶见不良反应有恶心、呕吐、腹泻和咳嗽等。一般不需特殊处理，可自行缓解，必要时可对症治疗。尽管本疫苗临床试验中未发现以下罕见不良反应，但接种时应注意密切观察：过敏性休克、神经脱髓鞘病变、过敏性皮疹、血小板减少性紫癜、神经系统疾病、急性肾小球肾炎和肝、肾疾病。如出现以上未提及的不良反应，应及时与医生取得联系。 8注意事项（1）以下情况者慎用：家族和个人有惊厥史者、患慢性疾病者、有癫痫史者、过敏体质者。（2）对于处于乙型肝炎潜伏期的患者尚不明确接种本品能否预防乙型肝炎；本品不推荐用于暴露后的免疫预防（如针刺损伤等）。（3）由于皮内注射和臀部肌肉注射不能达到最佳免疫效果， 应避免这些途径接种；但因为肌肉注射可使血小板减少症和出血性疾病患者发生出血，在此例外情况下这些患者可皮下注射。本品在任何情况下都不能静脉注射。（4）注射前应充分摇匀；疫苗容器开启后应立即使用。（5）疫苗有摇不散的块状物、疫苗容器有裂纹、标签不清或过期失效者，均不得使用。（6）应备有肾上腺素等药物，以防偶有严重过敏反应发生时使用。接受注射者在注射后应在现场观察至少30分钟。（7）本品严禁冻结。（8）注射本品第1针后出现高热、惊厥等异常情况者，一般不再注射第2针。（9）特殊人群的使用：孕妇：目前尚无此人群的相关研究数据，应充分权衡利弊后决定是否使用本品。哺乳期妇女：目前尚无此人群的相关研究数据，应充分权衡利弊后决定是否使用本品。（10）药物的相互作用：与其他疫苗同时接种：本品尚未进行同期（先、后或同时）接种其他疫苗对本疫苗免疫原性影响的临床研究。目前没有数据可以评估本品与其他疫苗同时接种的影响。免疫抑制药物：包括免疫抑制剂、化疗药、抗代谢药物、烷化剂、细胞毒素类药物、皮质类固醇类药物等，可能会降低机体对本品的免疫应答。正在接受治疗的患者：为避免可能的药物间相互作用，建议咨询医生。9贮藏于28下避光保存和运输。10包装玻璃安瓿（2支/盒或12支/盒）；预填充注射器（1支/盒、2支/盒或20支/盒）。 11有效期36个月 12执行标准国家药品标准YBS00512011 13批准文号国药准字S201000022 【成分和性状】本品系由重组醮酒酵母表达的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg)经纯化，加人铝佐剂制成.为乳白色混悬液体，WW沉淀而分层，易摇散，不含任何防腐剂。有效成分：乙型肝炎病毒表面抗原。辅料：应列出全部批准的辅料成分。【接种对象】本疫苗适用于乙型肝炎易感者，尤其是下列人员：(1) 新生儿，特别是母亲为HBsAg、 HBeAg阳性者。(2) 从事医疗工作的医护人员及接触血液的实验人员，【作用与用途】接种本疫苗后，可刺激机体产生抗乙型肝炎病毒的免疫力。用于预防乙型肝炎.【规格】 每瓶0.5ml或1.0ml,每1次人用剂量0. 5ml,含HBsAg 5 g 或l O g ; 或每1 次人用剂貴1.0ml,含HBsAg 10(ig。【免疫程序和剂量】 (1)于上臂三角肌肌内注射。(2)基础免疫程序为3针，分别在0、 1、 6月接种.新生儿第1针在出生后24小时内注射。16岁以下人群每1次剂量为5叫，16岁或以上人群每1次剂量为lOg,【不良反应】常见不良反应：一般接种疫苗后24小时内，在注射部位可出现疼痛和触痛，多数情况下于23天内自行消失。罕见不良反应：(1) 一般接种疫苗后72小时内，可能出现一过性发热反应，一般持续12天后可自行缓解接种部位轻、中度的红肿、疼痛，一般持续12天后可自行缓解，不黹处理。(3) 接种部位可出现硬结，一般1 2个月可S行吸收.极罕见不良反应-(1) 局部无菌性化脓：一般要用注射器反复抽出脓液，严*时（如出现破St) S扩创淸除坏死组织，病时较长，最后可吸收愈合。(2) 过敏反应：过敏性皮疹、阿瑟反应。阿瑟反应一般出现在接种后10天左右，局部红肿持续时长.可用固醇类药物进行全身和局部治疗。(4) 过敏性休克：一般在接种疫苗后1小时内发生，应及时注射肾上腺素等抢救措施进行治疗。【禁忌】 （1已知对该疫苗所含任何成分，包括辅料以及甲醛过敏者，(2) 患急性疾病、严重慢性疾病、慢性疾病的急性发作期和发热者.(3) 妊娠期妇女。(4) 患未控制的癍痫和其他进行性神经系统疾病者.【注意事项】 （1)以下情况者慎用：家族和个人有惊厥史者、患慢性疾病者、有癞痫史者、过敏体质者。(2) 使用时应充分摇匀，如疫苗瓶有裂纹、标签不清或失效者、疫苗瓶内有异物者均不得使用，(3) 疫苗瓶开启后应立即使用。(4) 应备有肾上腺素等药物，以备偶有发生严重过敏反应时急救用接受注射者在注射后应在现场观察至少30分钟，(5) 注射第1针后出现高热、惊厥等异常情况者，般不再注射第2针。对于母婴阻断的嬰儿，如注射第2、3针应遵照医嘱，(6) 严禁冻结。【有效期】36个月。重组乙型肝炎疫苗（CHO细胞）Chongzu Yixing Ganyan Yimiao (CHO Xibao)Recombinant Hepatitis B Vaccine(CHO Cell)本品系由重组CHO细胞表达的乙型肝炎（简称乙肝）病毒表面抗原（HBsAg)经纯化，加人氢氧化铝佐剂制成。用于预防乙型肝炎。2 制造2.1生产用细胞2.1.1细胞名称及来源生产用细胞为DNA重组技术获得的表达HBsAg的C H O 细胞株。2.1.2细胞库的建立及传代应符合生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程规定。G株主细胞库细胞代次应不超过第21代，工作细胞库细胞代次应不超过第26代，生产疫苗的最终细胞代次应不超过第33代。2.1. 3主细胞库及工作细胞库细胞的检定应符合生物制品生产检定用动物细胞基质制备及检定规程规定。2.1.3.1细胞外源因子检査细菌和真菌、支原体、细胞病毒外源因子检査均应为阴性。2.1.3.2细胞鉴别试验应用同工酶分析、生物化学方法、免疫学、细胞学和遗传标记物等任何方法进行鉴别，应为典型CHO细胞。(1) 细胞染色体检査用染色体分析法进行检测，染色体应为20条。目的蛋白鉴别采用酶联免疫法检査，应证明为HBsAg。2.1.3. 3 HBsAg表达量主细胞库及工作细胞库细胞HBsAg表达量应不低于原始细胞库的表达量2.1.4保存细胞库细胞应保存于液氮中。2 . 2 原液2. 2.1细胞制备取工作细胞库细胞，苏培养后，经胰蛋白酶消化，置适宜条件下培养。2.2.2培养液培养液为含有适量灭能新生牛血淸的DMEM液。新生牛血清的质量应符合要求（附彔31 D ) .2.2.3细胞收获 培养适宜天数后，弃去培养辩，换维持液继续培养，当细胞表达HBsAg达到1.0mg/L以上时收获培养上清液。根据细胞生长情况，可换以维持液继续培养，进行多次收获。应按规定的收获次数进行收获。每次收获物应逐瓶进行无菌检査。收获物应于281C保存。2.2.4对照细胞病毒外源因子检査依法检査（附录C),应符合规定。2.2.5收获物合并来源于同一细胞批的收获物经无菌检査合格后可进行合并。2.2.6纯化合并的收获物经澄清过滤，采用柱色谱法进行纯化，脱盐，除菌过滤后即为纯化产物。2.2.7纯化产物检定按3.1项进行。2.2.8纯化产物保存过3个月。2.2.9纯化产物合并同一细胞批来源的HBsAg纯化产物检定合格后，经除菌过滤后可进行合并。2.2.10甲醛处理合并后的HBsAg纯化产物中按终浓度为20(Vg/ml）加人甲醛，置37TC保温72小时，2. 2.11除菌过滤甲醛处理后的HBsAg经超滤、浓縮、除菌过滤后即为原液（亦可在甲醛处理前进行除菌过滤）。2.2.12原液检定按3 . 2项进行。2 . 3 半成品2.3.1配制按最终蛋白质含量为lOftg/ml或2(Vg/ml进行配制。加人氢氧化铝佐剂吸附后，可加人适量硫柳汞作为防腐剂，即为半成品。2.3.2半成品检定按3 . 3项进行。2 . 4 成品2.4.1分批应符合生物制品分批规程规定。2.4.2分装应符合生物制品分装和冻干规程规定，2.4.3规格每瓶0.5ml或1.0ml。每1次人用剂！:为0. 5ml,含HBsAg 10Mg;每1次人用剂量为1.0ml,含HBsAg 10g或20雄。2.4.4包装符合生物制品包装规程规定。3 检定3.1纯化产物检定3.1.1蛋白质含量应为100 (附录W B第二法），3.1.2特异蛋白带采用还原型SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法（附录IVC),分离胶胶浓度15%,浓縮胶胶浓度5%，上样量为5Mg,银染法染色。应有分子质量23kl)、 27kD蛋白带，可有30kD蛋白带及HBsAg多聚体蛋A带。3.1.3纯度采用高效液相色谱法（附录IE B ) 测定， 用S E C -HPLC法：亲水树脂体积排阻色谱柱，排阻极限1000kD,孔径100nm，粒度17戶，直径7. 5mm，长30cm;流动相为O.05mol/L PBS (pH6.8);检測波长280nm，上样量100fJ 积归一化法计算HBsAg纯度，应不低干95.0%。3.1.4细菌内毒素检査每lOptg蛋白质应小于10EU (附录M E凝胶限度试验3.2原液检定3.2.1无菌检査依法检査（附录XI A),应符合规定。3. 2.2支原体检査依法检査（附录M B),应符合规定。3.2.3蛋白质含量应在100200ng/ml (附录M B第二法），3.2.4特异蛋白带按3.1.2项进行.3.2.5牛血淸白蛋白残留景应不髙于50ng/剂（附录W 1)。3.2.6纯度按3.1.3项进行。3.2.7 CHO细胞DNA残留量应不高于10pg/剂（附录K B第一法)。3.2.8 CHO细胞蛋白质残留量采用酶联免疫法測定，应不高于总蛋白质含量的。.05%。3.2.9细菌内毒索检査每10蛋白质应小于10EU (附录M E凝胶限度试验。3. 2.10 N端氨基酸序列（每年至少测定1次）用氨基酸序列分析仪测定，N端氨基酸序列应为：Met-Glu-Asn-ThrAla-SeiGlyPhe-Leu-Gly-Pro-1-euleu-Val-Ieu,3.3半成品检定3.3.1无菌检査依法检査（附录M A),应符合规定。3.3.2细菌内毒素检査应小于10 EU/剂（附录M E凝胶限度试验)。3-4成品检定3.4.1鉴别试验采用酶联免疫法检査，应证明含有HBsAg。3 . 4 . 2 外观应为乳白色混悬液体，可因沉淀而分层，易摇散，不应有摇不散的块状物，3 . 4 . 3 装i t依法检査（附录I A)，应不低于标示量。3.4.4化学检定3. 4. 4. 1 p H值应为5.56.8 (附录V A ) .3.4.4.2铝含量应不高于0.43mg/ml (附录I F )。3.4.4.3琉柳汞含量如加硫柳汞，应不髙于60pg/ml (附录I B ) .3-4.4.4游离甲醛含量应不高于50(xg/ml (附录M L ) .3.4.5效价测定将疫苗连续稀释，每个稀释度接种4 龄未孕雌性NIH或BALB/c小鼠20只，每只腹腔注射1. 0 m l ,用参考疫苗做平行对照，4 嗨联免疫法或其他适宜方法測定抗-HBs,计算EDso,供试品Efto(稀释度）/参考疫苗EDb (稀释度）之值应不低于1. 0。3. 4.6无菌检査依法检査（附录M A),应符合规定。3.4.7异常毒性检査依法检査（附录M F),应符合规定，3.4.8细菌内毒素检査应小于10EU/剂（附录M E凝胶限度试验)。3.4.9抗生索残留量生产过程中加人抗生素的应进行该项检査。采用酶联免疫法检测，应不高于50ng/剂。4 保存、运输及有效期于28t避光保存和运输。自生产之日起，按批准的有效期执行。5 使用说明应符合生物制品包装规程规定和批准的内容。重组乙型肝炎疫苗（汉逊酵母）Chongzu Yixing Ganyan Yimiao(Hanxun Jiaomu)Recombinant Hepatitis B Vaccine(Hansenula polymorpha)本品系由重组汉逊酵母表达的乙型肝炎（简称乙肝）病毒表面抗原（HBsAg经纯化，加人铝佐剂制成于预防乙型肝炎。1 基本要求生产和检定ffl设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合凡例的有关要求。2 制造2.1生产用菌种2.1.1名称及来源以DNA重组技术构建的表达HBsAg的重组汉逊酵母工程菌株。菌种号为HBsAgU35-16-9或其他批准的重组汉逊酵母工程菌株。2.1.2种子批的建立应符合生物制品生产检定用菌毒种管理规程规定。原始种子批HBsAgU35-16-9在酵母完全培养基上连续扩增2代为主种子批.主种子批连续扩增2代为工作种子批.2.1.3种子批菌种的检定主种子批及工作种子批应进行以下全面检定，2.1.3.1 HBsAg基丙序列测定HBsAg基因序列应与原始种子批保持致。2.1. 3.2 HBsAg外源基因和酵母MOX基因的检定扩增得2 条P C R 产物的D N A 电泳条带长度应为：H B s A g 外源基因D N A 7 6 1 b p , 酵母M O X 基因DNA 2072bp。2.1. 3. 3外源基因整合于宿主染色体中的检定种子批菌种基因组DNA应无游离质粒DNA电泳条带,扩增的PCR产物中应有HBsAg外源基H DNA电泳条带。2-1.3.4 HBsAg外源基丙拷贝数检定种子批菌种采用杂交法检测，整合HBsAg外源基因拷W数应在30个以上。2.1.3.5整合基因稳定性试验种子批菌种培养160小时，应符合2.1. 3. 4项要求。2.1.3.6培养物纯度将菌种接种至酵母完全培养基中，于33培养1418小时后，将培养物分别接种于胰酪胨大豆肉汤培养基与液体琉乙醉酸盐培养基，于3035 养7天，应无细菌和其他真菌检出。2.1-4菌种保存种T批应于液缀中保存，工作种子批于-701C保存时应不超过6个月2.2.1发酵取工作种子批菌种，于适宜温度和时间，经锥形瓶、种子雉和生产讎进行三级发酵，收获汉逊酵母。2.2.2培养物的检定2.2. 2.1 HBsAg外源基因拷贝数检定按2.1. 3. 4项进行。2.2.2.2培养物纯度将培养物分别接种于胰酪胨大豆肉汤培养基与液体硫乙醇酸盐培养基，于30 养7天，应无细菌和其他真菌检出。2 . 2 . 3 纯化采用适宜的方法破碎汉逊酵母，离心除去细胞碎片，用硅胶吸附.柱色谱法和漠化钾密度梯度离心法或其他适宜方法纯化HBsAg后，进行除菌过滤，即为原液。2.2.4原液检定按3.1项进行。2.2.5原液保存应不超过3个月。2 . 3 半成品2. 3.1甲醛处理原液中按终浓度为10(Vg/ml加人甲醛，于371C保温适宜时间。2.3.2铝吸附将蛋白质和铝剂以一定比例混合，置适宜温度下吸附一定时间，经洗涤后即为铝吸附产物。2.3.3配制用无菌生理氣化钠溶液按最终蛋白质含量为ZOpg/ml稀释铝吸附产物，可加人适宜浓度的硫柳汞防腐剂，即为半成品。2. 3.4半成品检定按3. 2项进行。2 . 4 成品2 . 4 . 1 分批应符合生物制品分批规程规定。2.4.2分装应符合生物制品分装和冻千规程规定。2.4.3规格0.5ml,每1 JJcAffl剂量0.5ml.含HBsAg 10pg。2.4.4包装应符合生物制品包装规程规定。3 检定3.1原液检定3.1.1无|S检査依法检杏（附录M A),应符合规定。3.1.2蛋白质含量应为100 (附录VI B第二法）。3.1.3特异蛋白带采用还原型SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（附录V C ) ,分离胶胶浓度15%,上样量为O.Sg.银染法染色。应有分子质量为2025kD的蛋白带；可有多聚体蛋白带。3.1.4纯度采用分子排阻色谱法（附录ID D),亲水甲基丙烯酸树脂体积排阻色谱柱；排阻极限lOOOOkD;孔径lOOnm;粒度17fmM流动相为含0.05%叠氮钠的lmmol/L PBS(pH7. 0),上样量10fJ:检测波长280nm，按面积归一化法计箅，HBsAg含ft应不低于99.0%3.1.5细菌内毒索检査应小于5EU/ml (附录M E凝胶限度试验）3.1.6宿主细胞DNA残留量应不髙于lOng,/剂（附录K B第-法）。3.1.7宿主细胞蛋白质残留量应不超过总蛋白质含量的1.0% (附录1XE3. 1.8 N端氨基酸序列测定（每年至少测定1次）用氨基酸序列分析仪测定，N端氨基酸序列应为：(Met)-Glu-Asn-Ile-Thi-SeK;irPhLeii-Gly-Pro-Leu-Leu-Val-Leu3.1.9聚山梨酯20残留量应不高于lOpgZZOfig蛋白质（附录W H )。3.2半成品检定3. 2.1无菌检査依法检査（附录SI