抗人球蛋白微柱凝胶法和凝聚胺法交叉配血敏感性分析.doc

抗人球蛋白微柱凝胶法和凝聚胺法交叉配血敏感性分析?126?JournalofClinicalandExperimentalMedicineVo1.6,No.7July.2007抗人球蛋白微柱凝胶法和凝聚胺法交叉配血敏感性分析张强(南京市江宁区中医院检验科江苏南京210000)随着临床输血技术的不断发展,近年来出现了抗人球蛋白微柱凝胶卡式交叉配血的新技术(以下简称卡式配血).我院较早地开展了此项技术,本文报告卡式交叉配血1000例,出现98例阳性结果,对阳性标本再进行凝聚胺方法交叉配血,比较两种方法的敏感性与可靠性.1材料与方法1.1材料微柱凝胶配血卡及其配套离心机和孵育器均选用瑞士达亚美公司生产的产品.配血卡批号:50531.01.45.凝聚胺交叉配血试剂选用中国台湾Beso公司生产的产品.试剂盒批号:B21042.1.2方法进行卡式配血和凝聚胺法配血,两种方法均按照各自产品说明书严格执行操作.将反应强度一个+以上的标本判定为阳性标本,对卡式配血次侧反应阳性的标本,加用患者自身红细胞作对照试验,以判断患者体内有无致敏红细胞的存在.2结果结果判读按照各自的产品说明书,卡式配血结果的判断标准如图,所示.图1卡式配血结果的判定标准1000例卡式配血中主侧有2例阳性,强度为2+.次侧有96例阳性,其中74例反应强度为1+,其余22例反应强度为2+.聚凝胺法对照结果显示仅有25例次侧阳性结果与卡式配血次侧结果一致.两种方法阳性标本对照见表1.表198例卡式配血与聚凝胺结果对照(例)对卡式配血次侧阳性的96例标本做患者自身红细胞对照,有62例对照阳性.用来判断致敏红细胞的来源.3讨论卡式配血的原理是在包含试验需要的各种抗体的特定凝胶柱中加样本红细胞悬液和血浆,进行温育后离心,红细胞若凝集成块不能通过凝胶间隙,留在凝胶上端为阳性结果,反之,为阴性结果.本文1000例卡式配血结果中有2例主侧凝集,说明患者体内可能存在抗供血者红细胞的抗体,我们对其进行抗体筛查试验,试验结果证实患者有lgG类不完全血型抗体的存在,这类IgG抗体可以来源于ABO血型系统也可来源于非ABO的其他血型系统.我们知道,绝大多数不完全抗体是经过妊娠或反复输血后产生,这两例患者都是血液病患者,有反复输血史,其体内已经产生不完全抗体,所以此结果也符合其病史.这两例标本在用凝聚胺法配血时结果是阴性,说明由于凝聚胺法仍是介质配血法,并不能检出所有lgG类血型抗体的存在.卡式配血法帮助我们避免了两例可能发生的输血反应.卡式配血次侧结果阳性的原因比较复杂,主要有两方面的原因,一种是患者体内含有自身抗体或已产生红细胞抗体,可能致敏体内红细胞,所以用其自身红细胞单独作对照试验结果呈阳性.另一种原因是由于供血者体内存在抗受血者红细胞的抗体.所以,当遇到卡式配血次侧结果阳性时,先作患者自身红细胞对照试验,来区别造成阳性结果的两种原因.本文卡式配血96例次侧阳性中有62例患者自身红细胞对照试验是阳性且凝集强度小于2+,可根据交叉配血原则,次侧凝集强度小于2+时,可给予少于200ml的血液.另有34例自身红细胞对照试验是阴性,ABO血型相符,考虑献血员可能存在免疫抗体,但是其凝集强度小于2+,献血员血浆输入患者体内后被稀释,出现输血反应的可能性较小,因此也可给予少于200ml的血液.如果自身红细胞对照试验是阴性,且凝集强度大于2+时,则需考虑更换献血员进行交叉配血,在有条件的地区,还应为献血员做抗体筛查试验.在传统的配血方法中,盐水法只能检出lgM类血型抗体,不能检出lgG类血型抗体,可靠性差.凝聚胺法虽能检出lgG类不完全血型抗体,但其本质仍是介质法,所以对lgG类血型抗体的敏感性远不如卡式配血法.在表1中可看到,凝聚胺法只测出25例阳性,而卡式配血法发现98例不同程度阳性.因此,在临床上常规开展卡式配血可大大提高lgG类血型抗体的检出率,有效地保证了临床安全输血.卡式配血还克服了传统抗人球蛋白法需多次洗涤,试验时间长等不足之处.在操作程序上更加标准临床和实验医学杂志2007年7月第6卷第7期?127?高渗性非酮症高血糖昏迷12例误诊分析李合玲(济源市人民医院综合内科河南济源454650)高渗性非酮症高血糖昏迷(HONK)是糖尿病的一种严重急性并发症.现将我院自20002006年共收治的l2例HONK误诊情况报告如下,并做简要分析如下.1临床资料1.1一般资料本组HONK患者l2例,男性7例,女性5例,年龄6282岁,平均73岁,5例为2型糖尿病,7例为糖尿病史.1.2临床表现反应迟钝,嗜睡5例,浅昏迷6例,深昏迷1例;轻度脱水6例,中度脱水4例,重度脱水2例;多尿6例,少尿5例,无尿1例;休克2例.1.3实验室检查血糖33.866.0mmol/L,血钾3.55.2mmol/L,血钠145160mmol/L,血氯92117mmol/L,二氧化碳结合率16.823.5mmol/L,尿素氮9.630.8mmol/L,血浆有效渗透压330400mmo/L,尿糖均(+)尿酮体(+)(+)2例,余均阴性.1.4误诊误治情况3例因发热,头痛,鼻塞,咽喉痛起病,静滴5%葡萄糖,抗生素等渐出现意识不清,误诊为脑炎收住神经科;3例脑梗死,1例脑出血并轻度血糖增高患者,给予降颅压,利尿,输10%高渗葡萄糖后28天意识障碍加重,误诊为脑卒中进展转入我院;1例因心肌梗死起病早期未关注血糖出现昏迷休克;1例因左眼疼痛,热敷出现左眼球坏死及左颜面额部皮肤软组织损伤,渐昏迷,误诊为颅内感染收住神经科,3例以恶心,呕吐,腹痛,腹泻,发热起病,误诊为急性胃肠炎2例,急性胰腺炎1例.1.5治疗与转归本组病例一经确认即给予补液,降糖,抗感染及对症支持治疗,总补液量按脱水程度或按体重的10%15%补充,第一个2h补液量15002000ml,24h补液量达610L,生理盐水静脉滴注补充总液体量的1/2,剩余1/2由胃肠道补充,以46U/h速度静滴胰岛素,使血糖每小时下降3.35.6mmol/L,当血糖降至13.916.9mmol/L时改为5%葡萄糖静滴,每2h检测血糖,电解质,尿素氮,并计算血浆渗透压,有2例曾同时行透析治疗,经积极抢救,7例脱水纠正,血浆渗透压恢复正常,意识逐渐改善,生命体征稳定.1例患者死于重症感染,循环衰竭,1例死于多脏器功能衰竭,1例死于低血容量休克急性肾衰,1例死于急性心肌梗死,心源性休克,1例脑出血患者因延误治疗死亡,死亡率4l%.2讨论HONK是一种内科急症,常因原发病诊治不当和各科急危重症诱发,治疗复杂,误诊率及病死率相当高J.分析本组病例误诊原因,HONK起病隐匿,临床表现不典型,常被诱发疾病所掩盖.合并急危重症疾病时常被误诊为应激性高血糖,而不及早降血糖.本病多见于老年患者,常合并心,脑,肾重要脏器病变,病情复杂,而且不能详细提供病史及病情.临床医生不重视既往史收集,询问病史欠全面,体检不仔细,满足已有诊断,缺乏实验室检查,治疗不及时,或操之过急.所以对老年患者不论有无糖尿病史,我们都要及时检查血糖电解质肾功,肝功,心电图等,全面评估病情及诊断治疗.HONK特点是严重高血糖,脱水和血浆渗透压升高,常有意识障碍或昏迷,但起病较慢,患者在发病前数天数周,常有糖尿病症状逐渐加重的临床表现,反映血糖及血浆渗透压的逐渐升高.早期症状包括烦渴,多饮,多尿,乏力,头晕,食欲不振及呕吐等,发展到昏迷要12周.因此提高对HONK认识是能够做到早期诊断的,也可以避免医源性加速病情的发展,甚至可以防止本症的发生.恰当地应用胰岛素及合理补液是治疗本病的关键,若直接输入低渗常溶液可致血浆渗透压下降较快,可能诱发脑水肿病可出现溶血.抢救成功的关键在于尽早平稳降血糖,血钠,血浆渗透压,采用生理盐水补充1/2失水量,辅以胃肠道补充l/2失水量,以及小剂量胰岛素持续静滴降血糖是简便安全而有效的方法j,被多数文献报道及临床实践所证实.此方法避免了大量迅速输注生理盐水及快速降血糖可能诱发的心衰,肺水肿及脑水肿等出现,我们用此方法成功救治了大部分的患者.参考文献1邢荣珠.联合胃肠补液治疗糖尿病高渗性非酮症昏迷体会J.临床和实验医学杂志,2006,5(8):1173.2史轶蘩,王妲,吴从愿.协和内分泌和代谢学M.北京:北京科学出版社,2000:1384,13901392.(收稿日期:20070319)化,加样量精确到微升,孵育时间,离心速度和时间都进行了标准化设置,克服了许多因人为因素造成的误差,因而大大提高了实验结果的可重复性.与其他交叉配血方法一样,卡式配血也有一些影响结果的干扰因素.患者红细胞自凝,由于操作中需37E孵育,一般不考虑是冷凝,多是由于某些疾病如多发性骨髓瘤或是输注了某些药物而造成患者红细胞膜电位改变在低离子溶液中即可呈肉眼可见的凝集.患者标本未作抗凝处理,有纤维蛋白的存在,在试验中其可吸附包裹红细胞成团块,造成假阳性结果.一些血液病患者如巨幼红细胞贫血,患者红细胞变形能力下降,不能全部通过凝胶间隙,也可造成假阳性.此外,红细胞浓度过高,不适合的低离子溶液以及错误的操作步骤如先加血浆等都会对试验结果造成影响.总之,