流式细胞术在风湿免疫病中的应用.课件

流式细胞术风湿免疫病 北京协和医院风湿免疫科赵丽丹 常用的流式细胞仪与流式分析软件 BD FACSDivaFlowJoCellQuestWinMdiFCSExpressCFlowSamplerAnalysis AccuriC6FlowCytometer ModFitLT 增殖分析 骨髓和器官移植 基础医学 流式细胞仪的临床应用 免疫病 血液病 肿瘤性疾病 感染性疾病 外周血淋巴细胞 T淋巴细胞 NK细胞 外周血免疫细胞亚群 CD16 CD56 T辅助细胞 CD3 CD19 T8细胞 B淋巴细胞 CD4 CD8 Na veT CD45RA CD45RO MemoryT CD45RA CD45RO CD95DRCD38 活化标志 细胞毒T细胞 抑制型T细胞 CD28 CD28 增殖标志 Ki 67 DC细胞 pDC 抑制型T细胞 CD11c CD123high CD11c CD123low 免疫细胞的性质 吞噬能力 分泌细胞因子的能力 免疫调节功能 发育 分化和成熟 迁移和趋化能力 增殖与凋亡 表型和数量 流式细胞仪在免疫病中的应用 1 2 3 4 了解体内免疫功能状态 细胞亚群分析 细胞免疫 T细胞 na veT 活化T 体液免疫 B细胞 辅助疾病诊断 HLA B27 HLA B5 HLA DR4 探索疾病的发病机理 病程 预后 Th17 Treg BR3 TACI BCMA 血清中多种细胞因子 监测指导临床治疗方案 美罗华 B细胞 Belimumab B细胞 预防性抗PCP 流式细胞术在免疫学中的应用 免疫学研究中常用的流式方法 细胞表面染色荧光选择与配伍避免交叉污染调节补偿 胞内分子及细胞因子染色破膜 固定剂同时测定多种细胞因子PMA Ionomycin Golgi阻断剂 CD4荧光的选择 细胞增殖及凋亡分析CFSE增殖分析DNA分析PI Annexin Casepase检测 细胞分选 流式细胞术对免疫细胞亚群测定的范例 Anti CD20不同发育阶段B细胞的影响 临床应用 抗CD20单抗治疗中监测淋巴细胞亚群的临床意义 初始治疗B细胞显著增多 应用价值 CD4 T细胞显著减少 应用风险 治疗中的监测B细胞清除效应 预测治疗效果 临床效果与B细胞清除相关 长寿命浆细胞 随访中的病情监测B细胞恢复 病情复发 强化治疗 感染风险评估 细胞免疫功能与机会性感染 指导临床治疗 加强免疫抑制治疗vs经验性抗感染治疗CD4 CD8 参考值1 2 2 细胞免疫功能过度活跃 1 病毒感染 恶性肿瘤CD4 200 PCP 隐球菌 分支杆菌感染的风险 Na veT CD28 的CD4减少易发生机会性感染 免疫缺陷病的诊断和定位 X连锁无丙种球蛋白血症XLA外周血和淋巴组织中B细胞减少或缺失 Ig缺乏男性婴幼儿 6 9月发病 反复化脓性感染普通变异性免疫缺陷病CVIDIgG显著低下 B细胞减少或正常 na veT减少青壮年 反复化脓性呼吸道感染选择性IgA缺陷 选择性IgG亚类缺陷高IgM综合征 X连锁重症联合免疫缺陷SCIDT细胞和NK细胞减少 B细胞可正常新生儿 婴幼儿 病毒 PCP 念珠菌 败血症 Molecularsastherapeutictarget 5 6 Rituximab ocrelizumab 2 Anti CD40L 3 Atacicept Belimumab Bcelltolerogen Abetimussodium 5 Abatacept 6 Epratuzumab FC对于基础研究的重要性 细胞分选细胞增殖基因研究 GFP标签高通量的细胞因子测定 CBA Scienceishard Flowcytometryshouldbeeasy CFSE HC SLE CD4 T CDI 0 98CDI 1 72CDI 5 25 CFSE细胞增殖的流式测定 CBA CytometricBeadArray assay TerasawaHetal ClinCancerRes2002 8 41 53 细胞凋亡的流式测定 本实验室近期工作的相关文章 1 ZhaoLD LiY SmithMFJr WangJS ZhangW TangFL TianXP ZhangFC ZhangX ExpressionsofBAFF BAFFreceptorsandtheircorrelationwithdiseaseactivityinChineseSLEpatients Lupus 2010Nov 19 13 1534 49 SCI 2 586 2 YueC YouX ZhaoL WangH TangF ZhangF ZhangX HeW TheeffectsofadalimumabandmethotrexatetreatmentonperipheralTh17cellsandIL 17 IL 6secretioninrheumatoidarthritispatients RheumatolInt 2010Nov 30 12 1553 7 SCI 1 493 3 YangHX ZhangW ZhaoLD LiY ZhangFC TangFL HeW ZhangX AreCD4 CD25 Foxp3 cellsinuntreatednew onsetlupuspatientsregulatoryTcells ArthritisResTher 2009 11 5 R153 SCI 4 271 4 ZhangB ZhangX TangFL ZhuLP LiuY LipskyPE ClinicalsignificanceofincreasedCD4 CD25 Foxp3 Tcellsinpatientswithnew onsetsystemiclupuserythematosus AnnRheumDis2008 67 7 1037 40 SCI6 411 5 ZhangB ZhangX TangF ZhuL LiuY Reductionofforkheadbox