高考生物 321精品系列 专题20 生物技术实践 .docVIP

2012版高考生物 3-2-1精品系列专题【专题知识框架】【考纲解读】考点考纲要求考察角度微生物的分离与培养微生物培养所需营养物质；利用选择培养基分离微生物的方法；微生物的培养过程微生物的鉴定及数量的测定微生物的鉴定方法；微生物的筛选原理；微生物的数量测定的原理和方法酶的应用酶的存在与简单制作方法；酶活力测定的一般原理与方法；酶在食品制造和洗涤方面的应用；制备和应用固定化酶传统发酵技术的应用果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作原理、实验流程及有关注意事项；检测视频中亚硝酸盐的含量的原理、过程植物有效成分的提取从植物材料中提取芳香油、胡萝卜素等有效成分的方法、原理及实验步骤dna与蛋白质的提取与分离dna提取的方法、步骤及注意事项；从血液中提取蛋白质的方法pcr技术及应用pcr技术的原理及应用【三年高考命题分析与命题趋势】 三年高考命题分析：酶的应用本专题内容主要有三个知识点：果胶酶在果汁生产中应用；加酶洗衣粉的洗涤效果探究；制备和应用固定化酶。在高考命题中，与必修1内容联系紧密。从近几年命题中看出，联系生产生活实际的考题较多。命题角度侧重从生产生活实际出发，侧重从社会现象，新的科学研究入手，利用酶的有关知识分析解决实际问题。考查形式以简答题为主。近几年各省市命题比重较小，选择题很少见。生物技术在食品加工及其他方面的应用从近几年新课标地区高考命题分析，本专题知识点考查主要体现在以下三个方面：（1）传统发酵技术的应用，果酒、果醋和腐乳的制作是考查的重点。（2）生物材料中特定成分的提取和蛋白质的分离在高考中也有体现。（3）pcr技术在高考中也有所涉及。命题角度：本专题与生产生活实际联系紧密，在考查时注重与实践、实验相结合。考查形式：在新课标地区以简答题形式为主，江苏、广东则简答、选择均有出现。命题趋势微生物的利用以理综形式考查的地区多以简答题形式综合考查微生物的培养、分离、纯化过程，注重与实践相结合。而单科命题的地区出了综合性简答题外，选择题多考察培养基制备、灭菌方法和平板划线法等基本技术，但简答题仍是主要命题形式。预计2013年各地命题仍以简答题形式为主，难度系数在0.75左右。酶的应用联系果汁饮料生产、新型洗涤产品等生活实际，考查酶的特性及其在生产中的应用，很可能以探究实践类型的题目出现，预计2013年各地命题可能性较大，难度适中，系数在0.65左右。生物技术在食品加工及其他方面的应用“传统发酵技术的应用”中“果酒、果醋、泡菜、腐乳的制作原理与技术流程”试题较多，为今后高考命题热点。但命题难度不会太大，难度系数一般在0.75左右。“生物材料中有效成分提取”将在今后高考命题中也有出现，但往往以选择题形式出现，难度系数也在0.75左右。【核心考点要点归纳】考点一、微生物的培养与应用1.培养基 （1）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对ph、特殊营养物质以及氧气的要求。（2）培养基类型 按培养基物理性质可分为固体培养基和液体培养基两种，其中固体培养基用于菌种分离、鉴定、菌落计数等。而液体培养基常用于科研或工业生产等。 按培养基的功能可分为选择培养基和鉴别培养基。按照人们对培养基中成分的了解程度可分为天然培养基和合成培养基两种。 说明代谢类型不同的微生物，对培养基营养成分的要求不同，如自养型微生物可以利用无机碳源，而异养型微生物则必须利用有机碳源。不论代谢类型如何，微生物对营养物质的要求都包括碳源、氮源、水、无机盐、生长因子五类。2.关于无菌技术 （1）实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌；常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒、化学药剂消毒。对不同的对象需采用不同的消毒或灭菌方法。（2）在微生物培养时，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括四方面的内容： 对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。 为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。3.菌种的纯化考点二、果酒、果醋、腐乳、泡菜制作的注意事项1.果酒、果醋制作的注意事项 （1）材料的选择与处理 选择新鲜的葡萄，榨汁前应先冲洗，再除去枝梗，以避免去除枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。（2）防止发酵液被污染需要从发酵制作的过程进行全面的考虑，因为操作的每一步都可能混入杂菌。为避免杂菌污染：榨汁机要洗净并晾干，发酵装置要洗净并用70%的酒精消毒；若用简易的发酵装置，每隔一定时间排气时只需拧松瓶盖，不要完全揭开瓶盖等。（3）控制发酵条件 果酒 果醋温度20左右，最适合繁殖；1825，酒精发酵 3035，最适合生长 氧气 前期通o2，然后控制无o2 氧气充足其他时间：1012天；ph:5.06.0 时间：约78天 2.腐乳制作的注意事项 （1）影响腐乳品质的条件：水、盐、酒、温度、发酵时间等。 水的控制：含水量约70%，用含水量过高的豆腐制腐乳，不易成形。 盐的控制：盐浓度过高，会影响腐乳的口味，浓度过低，腐乳易腐败变质。 酒的控制：酒精含量一般控制在12%左右。酒精含量过高，使腐乳成熟期延长。酒精含量过低，杂菌繁殖快，豆腐易腐败。 温度的控制：温度为1518,适合毛霉生长。发酵时间易控制在6个月左右。考点三、植物的组织培养技术1.植物组织培养原理 植物组织培养的原理是细胞的全能性。不同细胞的全能性不一样。生物体的所有细胞全能性大小比较如下： 受精卵生殖细胞体细胞；体细胞中：幼嫩植物组织（如芽尖）成熟组织细胞。2.植物组织培养技术和花药培养技术的异同植物组织培养技术 花药培养技术 相同点理论依据植物细胞的全能性基本过程无菌技术及接种操作基本相同 影响因素选材、营养、激素、ph、温度、光照等 不同点 选材体细胞生殖细胞（精子） 3.植物组织培养技术、微生物培养技术和无土栽培技术比较 植物组织培养技术 微生物培养技术 无土栽培技术 概念 在无菌条件下，将离体的植物体器官或组织接种在适当的培养基上进行培养，最终发育成完整植株 在无菌条件下，在适宜的营养和环境条件下对微生物的培养 将植物生长发育过程中所需各种矿质元素按一定比例配成营养液，并利用这种营养液栽培植物 培养基成分 水、矿质元素、蔗糖、维生素、有机添加物和植物激素等 水、无机盐、碳源、氮源等 水、必需矿质元素 特殊操作要求 严格控制无菌操作，在培养过程中要更换培养基，调节细胞分裂素和生长素的比例 严格控制无菌操作，整个培养过程无需更换培养基 适宜的环境条件，基质垫底并固定幼苗，不需要保证无菌条件 考点四、探究不同种类加酶洗衣粉的洗涤效果实验应注意的事项1.实验原理酶的催化作用具有专一性，复合酶洗衣粉加入的酶制剂种类较多，与单一加酶洗衣粉相比，对各种污渍都有较好的洗涤效果。2.实验变量(1)自变量：加酶洗衣粉。(2)无关变量：其他条件相同且适宜（如温度、 ph等）。3.实验步骤步骤烧杯编号注入自来水500 ml500 ml500 ml加入物质（等量）奶渍布奶渍布奶渍布控制水温373737加入洗衣粉（等量）蛋白酶洗衣粉复合酶洗衣粉脂肪酶洗衣粉用玻璃捧搅拌5 min5 min5 min观察实验现象4.实验时注意事项（1）在比较普通洗衣粉和加酶洗衣粉的洗涤效果的实验中，自变量为洗衣粉的种类，设计时应遵循单一变量原则、对照原则，有效控制其他变量，如水的用量、污染物的量、所用实验的布的质地和大小、两种洗衣粉的用量、搅拌及洗涤时间等。（2）在使用加酶洗衣粉时不但要考虑最佳洗涤效果的条件，如最适温度、ph，还要考虑衣物的承受力，如蛋白酶洗衣粉不能洗涤丝绸类衣物；也要考虑洗涤成本问题，因污渍的成分比较复杂，一般选择复合加酶洗衣粉，以减少用量。（3）该实验探究多种加酶洗衣粉对同一污渍的洗涤效果，也可以探究同一种加酶洗衣粉对于不同污渍的洗涤效果。考点五、固定化酶与固定化细胞注：酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定，而细胞多采用包埋法固定。这是因为细胞个大，而酶分子很小，个大的细胞难以被吸附或结合，而个小的酶容易从包埋材料中漏出。3.固定化细胞常用的载体材料 常用的载体有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等。4.固定化酶的优点：（1）易接触；（2）易分离；（3）反复利用。考点六、dna的粗提取与鉴定1.原理、方法和目的基本原理方法目的dna在不同浓度的nacl溶液中的溶解度不同，在0.14 mol/l的nacl溶液中的溶解度最低溶于nacl溶液中并稀释nacl溶液为2 mol/l时，dna溶解，而部分蛋白质发生盐析而生成沉淀，通过过滤可除去部分蛋白质及不溶于nacl溶液的杂质当nacl溶液稀释至0.14 mol/l时，dna析出，过滤可除去溶于nacl中的部分蛋白质和其他杂质dna不被蛋白酶所水解加入嫩肉粉嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白质dna不溶于酒精溶液加入冷却酒精（95%）dna析出，除去溶于酒精的蛋白质dna可被二苯胺染成蓝色加入二苯胺，并沸水浴鉴定dna2.实验材料（1）动物（2）植物：新鲜菜花、蒜黄、菠菜等。 人和哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核,也没有dna，不适于作dna提取的材料，但却是提取血红蛋白的理想材料。 3.鉴定 比较加入物质结果图示实验组均加入：4 ml二苯胺试剂2 mol/lnacl溶液5 ml丝状物(dna)溶液逐渐变蓝对照组不变蓝 4.注意事项制备鸡血细胞液时，要在取鸡血的同时加入柠檬酸钠，静置后上层是血清，下层为所需要的血细胞。两次加蒸馏水的目的不同。鉴定dna时需沸水浴加热。 考点七 pcr扩增技术和dna复制的比较 dna复制pcr扩增技术场所细胞核内生物体外原理碱基互补配对碱基互补配对酶dna聚合酶、解旋酶耐热的dna聚合酶（taq酶）条件模板、atp、引物链（rna）、常温模板、atp、引物链（dna及rna片段）、温度变化（909555607075）原料四种脱氧核苷酸四种脱氧核苷酸特点形成的是整个dna分子，一个细胞周期只复制一次短时间内形成大量目的基因dna片段，呈指数增长2n 考点八、血红蛋白的提取和分离1.蛋白质分离的依据 蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等，可以用来提取和分离不同种类的蛋白质。 2.方法及原理（1）凝胶色谱法原理 蛋白质比较相对分子质量大相对分子质量小凝胶内部不能进入能进入运动方式垂直向下垂直向下和无规则扩散运动经过路程较短较长洗脱次序先流出后流出 凝胶色谱柱的直径大小不影响分离效果，但直径过大造成洗脱液体积大，样品稀释度大；凝胶色谱柱的高度与分离度有关。（2）凝胶电泳法原理凝胶电泳法的原理是不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同，在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。 考点九、蒸馏、压榨和萃取三种方法的比较提取方法水蒸气蒸馏压榨法有机溶剂萃取实验原理利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来通过机械加压,压榨出果皮中的芳香油使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发溶剂后就可获得芳香油方法步骤（1）水蒸气蒸馏（2）分离油层（3）除水过滤（1）石灰水浸泡、漂洗（2）压榨、过滤、静置（3）再次过滤（1）粉碎、干燥（2）萃取、过滤（3）浓缩适用范围适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取适用范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分浸泡在有机溶液中优点简单易行，便于分离生产成本低，易保持原料原有的结构和功能出油率高，易分离局限性水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解等问题分离较为困难，出油率相对较低使用的有机溶剂处理不当会影响芳香油的质量 注： 水蒸气蒸馏要适当延长蒸馏时间，温度不能太高。用于萃取的有机溶剂必须事先精制，除去杂质。压榨时原料必须要浸透，这样压榨时不会滑脱，出油率高，不堵塞筛眼；使用石灰水充分浸泡原料，破坏细胞结构，分解果胶，防止橘皮压榨时滑脱，提高出油率。【2012高考真题之生物技术实践】1.（2012江苏卷）17下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，错误的是a从酶的固定方式看，吸附法比化学结合法对酶活性影响小b作为消化酶使用时，蛋白酶制剂以口服方式给药c尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用d将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，目的是洗去cacl2和杂菌2（2012江苏）16下列关于“探究加本系洗衣粉和普通洗衣粉的洗涤效果”的叙述，合理的是a先用热水溶解洗衣粉，再将水温调节到最适温度b实验的观察指标可以是相同洗涤时间内污渍的残留程度c相同ph时加酶洗衣粉洗涤效果好于普通洗衣粉d衣物质地和洗衣粉用量不会影响实验结果【答案】b【解析】a项先用热水可能会影响酶的活性，所以不妥；只有在最适ph值时使用加酶洗衣粉效果才会好于普通洗衣粉，不同质地的衣物会影响实验结果，所以答案b。【考点定位】考查加酶洗衣粉使用条件，属于对理解、应用层次的考查。3.（2012江苏）18下列关于“dna粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是a洗涤剂能瓦解细胞膜并增加dna在nacl溶液中的溶解度b将dna丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝c常温下菜花匀浆中有些酶类会影响dna的提取d用玻棒缓慢搅拌滤液会导致dna获得量减少【答案】c【解析】dna溶解度与洗涤剂无关，dna与二苯胺水浴加热变蓝，不需要冷却；用玻璃棒搅拌，使dna吸附在玻璃棒上，且dna量不会减少。所以答案c。 【考点定位】本题考查dna提取和鉴定，属于对识记、理解层次的考查。4.（2012江苏卷）21下列关于制作果酒、果醋和腐乳的叙述，合理的是a在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长b条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸c果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小d将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量【答案】abc【解析】在果酒发酵后期，由于瓶中的营养物质减少，单位时间内产生的co2的量减少，所以拧开瓶盖的间隔时间可以延长，a正确；在糖源、氧气充足的条件下，醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸，b正确；果酒发酵过程中，营养物质消耗，并且有水的生成，密度会逐渐减小，c正确；将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，要分层加盐，加盐量要随着层数的加高而增加 ，近瓶口表面的盐要铺厚一些，但底层不需要大量用盐，d错误。【考点定位】考查果酒、果醋和腐乳制作的相关知识，属于对识记层次的考查。5.（2012全国理综大纲）5.关于细菌的叙述中，正确的是a.不同种类细菌的生长均需要相同碳源b.常用液体培养基分离获得细菌单菌落c.细菌大量培养过程中，芽孢形成于细菌生长的调整期d.培养基中含有高浓度nacl有利于金黄色葡萄球菌的筛选【答案】d【解析】自养型微生物需要无机碳源，异养型微生物需要的是有机碳源，a错误。菌落只能在固体培养基上形成，b错误。芽孢是帮助细菌度过不良环境的结构，在稳定期形成。【考点定位】本题考查微生物的培养与增长的有关知识，属于对识记、理解层次的考查。6.（2012上海卷）9酶在大规模产业化应用中的核心问题是固定化技术，而酶固定化所依据的基本原理在于酶具有a热稳定性 b催化高效性 c催化特异性 d可反复使用性7.（2012全国卷新课标版）39（15分）为了探究6-ba和iaa对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响，某研究小组在培养基中加入6-ba和iaa，配制成四种培养基（见下表），灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体，在适宜条件下培养一段时间后，统计再生丛芽外植体的比率（m），以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数（n），结果如下表。回答下列问题：（）按照植物的需求量，培养基中无机盐的元素可分为和两类。上述培养基中，6-ba属于类生长调节剂。（）在该实验中，自变量是 ，因变量是 ，自变量的取值范围是 。（）从实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是号培养基。（）为了诱导该菊花试管苗生根，培养基中一般不加入（填“6-ba”或“iaa”）。【答案】（1）大量元素 微量元素 细胞分裂素（2）iaa的浓度 菊花再生丛芽外植体的比率和外植体上的丛芽平均数 00.5mg.l-1 (3)1 （4）6-ba【解析】（1）根据植物的需求量，元素可以分为大量元素和微量元素，6-ba属于细胞分裂素类的生长调节剂。（2）根据实验目的和实验中的步骤中的数据，可以看出iaa的浓度是自变量，菊花再生丛芽外植体的比率和外植体上的丛芽平均数是因变量；由图表数据可以看出iaa的浓度范围是00.5mg.l-1。（3）再生丛芽的外植体数乘以外植体上丛芽平均数即为丛芽总数，所以最少的是1号培养基。（4）诱导试管苗生根需要生长素用量和细胞分裂素用量的比值比较高，所以培养基中不需要加6-ba。【考点定位】本题考查植物组织培养的有关知识，属于对识记层次的考查。8.（2012山东卷）34（8分）【生物生物技术实践】辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。（1）图中和分别表示辣椒组织培养中细胞的_和_过程。（2）图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是_。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值_（填“高”或“低”）时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采用的灭菌方法是_。（3）图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是_。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是_和纤维素酶。（4）提取辣椒素过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是_。 9. （2012海南卷）30回答下列关于腐乳制作的问题：（1）腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品。多种微生物参与了该发酵过程，其中起主要作用的微生物是 ，其产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为 和 ；其产生的 能将豆腐中的脂肪水解为 和 。（2）发酵完成后需加盐腌制，加盐还可以抑制 生长。（3）腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配置而成的卤汤。卤汤具有一定的防腐作用外，还能使腐乳具有独特的 。（2）发酵过程中加盐腌制，不仅可以调制风味，而且能够抑制杂菌等其他微生物（3）腐乳制作后期加入卤汤，卤汤不仅可以防腐，还可以使腐乳具有独特的风味（或香味）。【答案】 (15分) （1）毛霉 肽 氨基酸 脂肪酶 甘油 脂肪酸（每空2分，共12分） （2）微生物（2分） （3）风味（1分，其他合理答案也给分）【解析】（1）酵过程中起作用的微生物有多种，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解成多肽和氨基酸，产生的脂肪酶能够将豆腐中的脂肪水解为甘油和脂肪酸。（2）发酵过程中加盐腌制，不仅可以调制风味，而且能够抑制杂菌等其他微生物（3）腐乳制作后期加入卤汤，卤汤不仅可以防腐，还可以使腐乳具有独特的风味（或香味）。【考点定位】本题考查腐乳制作的原理和流程，设计到具体操作过程的作用和意义，均为课本上理解识记内容。10.（2012上海卷）(四)回答下列关于微生物和酶的问题。(10分)高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图15所示。44过程称为_，过程是为了_。45号培养基称为_(按功能分)；该培养基中除了加入淀粉外，还需加入另一种重要的营养成分_。 a琼脂 b葡萄糖 c硝酸铵 d碳酸氢钠46一般对配制的培养基采用高压灭菌，其中“高压”是为了_。在高温淀粉酶运用到工业生产前，需对该酶的最佳温度范围进行测定。图16中的曲线表示酶在各种温度下酶活性相对最高酶活性的百分比。将酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，由此得到的数据为酶的热稳定性数据，即图16中的曲线。47根据图中的数据，判断该酶使用的最佳温度范围是_。a40一50 b50一60 c60一70 d70-8048 据图判断下列叙述错误的是_。a该酶只能在最佳温度范围内测出活性 b曲线35数据点是在80时测得的c曲线表明80是该酶活性最高的温度d曲线表明该酶的热稳定性在70之后急剧下降【2011高考真题之生物技术实践】1、(2011江苏卷)下列果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是a腐乳制作所需要的适宜温度最高b果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵c使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌d使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、dna和rna答案：d解析：果酒制作酵母菌繁殖适宜温度20度左右，酒精发酵时适宜温度在1825度，果醋制作适宜温度3035度，腐乳制作适宜温度15度18度，所以a选项错误；醋酸菌为好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，所以b选项错误；果酒、果醋和腐乳制作使用的菌种分别是是酵母菌、醋酸菌、毛霉等。所以c选项错误；d选项正确。2.（2011江苏卷）下列有关酶的制备和应用的叙述，正确的是a酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶b透析、电泳和酸解等方法常用于酶的分离与纯化c棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤d多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层答案：a解析：酶解法去除细胞壁，吸水涨破法使细胞破裂释放出胞内酶，所以a选项正确；酶的分离和纯化不可以用酸解法，所以b选项错误；纤维素酶本身不能去除衣物上的污垢，它的作用主要是去除棉纺织品表面的浮毛以及表面附着的沉积性顽渍，同时可以使纤维的结构变得蓬松，从而使渗入到纤维深处的尘土和污垢能够与洗衣粉充分接触，从而达到更好的去污效果，所以c选项是错误的；蛋白酶在胃液中发挥作用，应在多酶片的最外层，所以d选项错误。3.（2011江苏卷）下列有关植物组织培养的叙述，正确的是a愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞b二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株c用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子d植物耐盐突变体可通过添加适量nacl的培养基培养筛选而获得答案：d解析：愈伤组织是处于未分化的状态，所以没有特定结构和功能，所以a选项错误；二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到的植株是单倍体，高度不育，所以b选项错误；人工种子就是以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子，所以c选项错误；可通过添加适量nacl的培养基培养淘汰不耐盐个体，筛选出耐盐个体，所以d选项正确。4、（2011江苏卷）在利用鸡血进行“dna的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是a用蒸馏水将nacl溶液浓度调至0.14mol/l，滤去析出物b调节nacl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质c将丝状物溶解在2mol/nacl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色d用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同答案：b解析：用蒸馏水将nacl溶液浓度调至0.14mol/l，析出物就是dna，不能滤去，所以a选项错误；b选项正确；将丝状物溶解在2mol/nacl溶液中，加入二苯胺试剂后需水浴加热才呈蓝色，所以c选项错误；鸡血细胞可直接加入蒸馏水使细胞破裂释放dna，而菜花做材料时需加入洗涤剂溶解细胞膜，使dna释放，所以d选项错误。5.（2011广东卷）以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的是a.洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂b.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少c.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测d.在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢6.（2011山东卷）研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。（1）柚皮易焦糊，宜采用_法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过_除去其中的固体杂质。（2）筛选乳酸菌a时可选用平板划线法或_接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是_。实验前需对超净工作台进行_处理。（3）培养基中的尿素可为乳酸菌a生长提供_。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度_。（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的_来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。7.（2011新课标全国卷）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从含原油的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的固体培养基土，从功能上讲，该培养基属于 培养基。（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈说明该菌株的降解能力 。（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。无菌技术要求试验操作应在酒精灯 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。答案：（1）原油 选择 （2）平板划线法 稀释涂布平板法 （3）强（4）干热灭菌 高压蒸汽灭菌 火焰解析：本题综合考查了微生物的培养、筛选等相关知识。（1）选择培养基是在培养基中加入某一化学物质或改变某一理化性质，使某一微生物正常生长，而其他微生物则被杀灭或抑制，从而选出所需要的微生物；本小题就是利用该细菌能高效降解原油的特性，用选择培养基将其筛选出来的。（2）纯化菌种的方法包括平板划线法和稀释涂布平板法。（3）（4）见答案。【2010高考真题之生物技术实践】1、（10广东卷）小李尝试制作果酒，他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行试验（见图10），恰当的做法是a加入适量的酵母菌 b一直打开阀b通气c一直关紧阀a，偶尔打开阀b几秒钟d把发酵装置放到4冰箱中进行试验【答案】ac【解析】本题主要考查学生的理解能力。果酒的制备过程中先让酵母菌在有氧条件下迅速扩增，再让酵母菌在无氧条件下发酵产生酒精。2、（10江苏卷）右图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程，下列叙述正确的是a.过程和都只能发生在缺氧条件下b.过程和都只发生在酵母细胞的线粒体中c.过程和都需要氧气的参与d.过程所需的最适温度基本相同【答案】c【解析】本题考查果酒果醋制作过程的反应条件等的区别。过程有氧无氧条件均可以发生，过程只能发生在无氧条件下，a项错误。在酵母菌细胞质基质中进行，在酵母菌线粒体内进行，b项错误。为有氧呼吸第二、三阶段，需要氧气参与，需要氧气参与，c项错误。过程、为酵母菌的呼吸作用，最适宜温度约为20c左右；的最适宜温度为3035c，d项错误。3、（10北京卷）在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，正确的操作是让发酵装置接受光照 给发酵装置适时排气向发酵装置通入空气 酵母菌装置放在45处【答案】b【解析】本题考查果酒制作的知识。此考点在高考中出现的次数较少。在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵，发酵装置不需要接受光照，发酵时也不能通入空气，一般将发酵温度控制在1825。4、（2010山东高考理综）生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物m产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。用于生产生物柴油的植物油不易发挥，宜选用_、_方法从油料作物中提取。（2）筛选产脂肪酶的微生物m时，选择培养基中的添加的植物油为微生物生长提供_，培养基灭菌采用的最适方法是_法。（3）测定培养液中微生物数量，可选用_法直接计数；从微生物m分离提取的脂肪酶通常需要检测_，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产技术，可利用_技术使脂肪酶能够重复使用。（4）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热dna聚合酶催化的_技术。【答案】（1）压榨；萃取。（注：两空顺序无先后）（2）碳源；高压蒸汽灭菌（3）显微镜直接计数；酶活性（或：酶活力） 固定化梅（或：固定化细胞）（4）pcr（或：多聚酶链式反应，聚合酶链式反应）【解析】(1）因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，应用压榨法或萃取法提取。（2）植物油中不含矿质元素，只为微生物提供碳源。培养基适合用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。（3）测定微生物的数量，可以用显微镜直接计数。分离出的脂肪酶要对其活性进行检测，以确定其实用价值。可以利用酶固定技术重复使用脂肪酶。（4）利用pcr技术可以扩增基因。5、（10海南卷）葡萄发酵可产生葡萄酒，请利用相关的知识回答问题：（1）利用葡萄制作葡萄酒的过程中，发挥作用的微生物是。（2）该微生物通过无氧呼吸可分解，产生的终产物是和。（3）甲、乙、丙三位同学将葡萄榨成汁后分别装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵，如图所示。发酵过程中，每隔一段时间均需排气一次。据图分析，甲和丙同学的操作有误，其中甲同学的错误是，导致发酵中出现的主要异常现象是。丙同学的错误是，导致发酵中出现的主要异常现象是。上述发酵过程结束后，甲、乙、丙同学实际得到的发酵产品依次是、。（4）在上述制作葡萄酒的过程中，假设乙同学的某一步骤操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲开，该操作错误是。6、（10江苏卷）右图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图下列叙述正确的是 a剐溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液- b图1中x溶液为溶液，其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠 c图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触 d图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中7、（10新课标）下列是与芳香油提取相关的问题，请回答：（1）玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，其理由是玫瑰精油具有 的性质。蒸馏时收集的蒸馏液 (是、不是)纯的玫瑰精油，原因是 。（2）当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过程中，影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和 。当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸馏时间的变化趋势是 。（3）如果蒸馏过程中不进行冷却，则精油提取量会 ，原因是 。（4）密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好存放在温度 的地方，目的是 。（5）某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如图所示。提取精油时采摘花的最合适时间为 天左右。(6)从薄荷叶中提取薄荷油时 (能、不能)采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，理由是 。【答案】易挥发、难溶于水、化学性质稳定 ；不是；玫瑰精油随水蒸气一起蒸馏出来，所得到的是油水混合物；（2）蒸馏温度 在一定时间内提取量随蒸馏时间的延长而增加，一定时间后提取量不再增加；（3）下降 部分精油会随水蒸气挥发而流失；（4）较低 减少挥发；（5）a；（6）能 薄荷油和玫瑰精油的化学性质相似【解析】本题以曲线图为信息载体，考查植物芳香油的提取方法及影响出油率的因素，及识记、理解、分析判断、应用和获取有效信息的能力。从图形中能获取有效信息、能运用所学知识解答实际问题是正确解答该题的关键。（1）植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等，具体采用哪种方法要根据植物原料的特点来决定。而水蒸气蒸馏法是植物芳香油提取的常用方法，它的原理是利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油层和水层。玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏，所以运用水蒸气蒸馏法提取，收集到的蒸馏液为油水混合物。（2）蒸馏时许多因素都会影响产品的品质，如蒸馏温度、时间等。在一定范围内随着蒸馏时间的延长，精油的提取量会增加，但因原料量等条件一定，故超过一定时间后，提取量不再增加。(3)蒸馏过程中要冷却，让混合物重新分出油层和水层。若不冷却则会有部分玫瑰精油随水蒸气挥发而流失，使精油提取量下降。（4）因玫瑰精油易挥发，故密封不严的瓶装玫瑰油玫瑰油应存放在温度较低的地方，以减少玫瑰精油的挥发。（5）提取精油时采摘花的最适时间为花中精油的相对含量最高的时间，即a天左右。（6）因薄荷油和玫瑰精油的化学性质相似，易挥发、难溶于水等；故也可用于玫瑰精油相同的方法提取。8、（10浙江自选模块）题号：17 科目：生物“生物技术实践”模块（10分）请在标有序号的空白处填空，并将序号及相应答案写在答题纸上，每空1分，共10分。某同学进行苹果汁制作实验，工艺如下图所示。 （1）图中用的溶液浸泡苹果的目的是_。黑曲霉提取液中含有的_可水解果胶，从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过_方式将酶固定化，酶被固定在用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去_。（2）实验中，操作流程a和b的先后顺序为_。在苹果汁澄清过程中，应关闭的流速调节阀是_。要测定从固定化柱流出的苹果汁中式否还有果胶，可取一定量的果汁与等量的_混合，如果出现_现象，说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解，应将流速调_。 试验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被_使用。9.(2010江苏卷)某生物兴趣小组开展dna粗提取的相关探究活动。具体步骤如下： 材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份l0g。剪碎后分成两组，一组置于20、另一组置于一20条件下保存24 h。dna粗提取： 第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入l5 ml研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤。取滤液备用。第二步：先向6只小烧杯中分别注入10ml滤液，再加入20 ml体积分数为95的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。第三步：取6支试管，分别加入等量的2 moll nacl溶液溶解上述絮状物。dna检测：在上述试管中各加入4 ml二苯胺试剂。混合均匀后，置于沸水中加热5 min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表。材料保存温度花菜辣椒蒜黄20+ + + +-20+ + + + + + +分析上述实验过程，回答下列问题：(1)该探究性实验课题名称是 。(2)第二步中”缓缓地”搅拌，这是为了减少 。(3)根据实验结果，得出结论并分析。 结论1：与20相比，相同实验材料在-20条件下保存，dna的提取量较多。 结论2： 。 针对结论i请提出合理的解释： 。(4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和dna均不相溶，且对dna影响极小。为了进一步提高dna纯度，依据氯仿的特性在dna粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是： ，然后用体积分数为95的冷酒精溶液使dna析出。【答案】（1）探究不同材料和不同保存温度对dna提取量的影响 （2）dna断裂 （3）等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄提取的dna量最多 低温抑制了相关酶的活性，dna降解速度慢 （4）将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混和，静置一段时间，吸取上清液【解析】本题以实验过程和结果为载体，考查dna粗提取与鉴定的基本原理、过程及实验的分析能力。熟记实验原理、能从表格中获取准确信息是正确解答该题的关键。（1）从表格可以看出，该实验有两个自变量：材料和温度。所以该探究性实验课题名称为探究不同材料和不同温度对dna提取量的影响。低温抑制了相关酶的活性，dna降解速度慢，提取的dna较多。（2）第二步中用玻璃棒搅拌的目的是获取dna絮状物，所以若速度快，易造成dna断裂。（3）本实验的结论可从两个方面来考虑：相同材料在不同温度下的结论；不同材料在相同温度下的结论。（4）氯仿能使蛋白质变性，而对dna影响极小，所以可将第三步获得的溶液与氯仿混合，又氯仿密度大于水，所以蛋白质沉淀位于溶液下部，dna位于上清液中。【2012最新模拟题之生物技术实践】1. （2012届江苏省南师大附中高三模拟）下列关于生物技术实践的叙述中，错误的是()a蛋白质纯化过程中采用透析法可去除溶液中的小分子杂质b加入洗涤剂和水后植物细胞的细胞壁分解，dna从植物细胞释放出来c利用pcr技术扩增目的基因时，引物和引物的碱基序列不能互补d腐乳制作过程中，添加料酒、香辛料和盐，均可以抑制杂菌的生长【答案】b【解析】洗涤剂能够瓦解细胞膜，不能分解细胞壁。由于细胞壁的可塑性，加水后细胞不能裂解，dna不能释放出来。2. （2012届江苏省淮安市高三第四次调研）下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是 （ ）a在无氧条件下，醋酸杆菌能够将酒精发酵成醋酸b使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌c在发酵过程中都需要保持在恒定的温度条件下d使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、dna和rna【答案】d【解析】制作果酒的菌种是酵母菌，制作果醋的菌种是醋酸菌，制作腐乳的菌种是毛霉，三者都有细胞壁、核糖体、dna和rna。3. （2012届吉林省扶余一中下学期期中）固定化细胞常用包埋法固定化，原因是a包埋法固定化操作最简便b包埋法对酶活性的影响最小c包埋法固定化具有普遍性d细胞体积大，难以被吸附或结合【答案】d【解析】由于细胞体积大，难以被吸附或结合，所以采用包埋法固定化细胞。4.(2012黄山模拟)实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触)，将平板置于37 条件下恒温培养3天，结果如图所示。从实验结果分析，以下叙述不正确的是( )a链霉素能阻止结核菌的生长b链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效c链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效d链霉素可以用于治疗伤寒病人6.（2012届江苏省泰州中学下学期期中考试）某组织培养实验室的愈伤组织被真菌污染，为查找污染原因工作人员设计了4个实验，实验条件除变量外其他因素均相同，图示为实验结果，由此得出的初步结论中错误的是a污染主要不是培养