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第四章临床输血学检查 王梅临床检验与输血学教研室江苏大学医学院 主要内容 一 血型系统二 交叉配血三 新生儿溶血病四 输血不良反应五 输血性传染病 一 血型系统 血型是人体血液的一种遗传性状 各种血液成分包括红细胞 白细胞 血小板及某些血浆蛋白在个体之间均具有抗原成分的差异 受独立的遗传基因控制 血型抗原分类1 红细胞血型抗原 ABO Rh MNS等2 白细胞血型抗原 CD HLA等3 血小板血型抗原 HPA等4 其他血型抗原 血型抗原 完全抗体 completeantibody 在血型抗原物质刺激下可形成 与红细胞生理盐水悬液混合后能引起红细胞凝集的特异性抗体 血型抗体 不完全抗体 low orderantibody 只可使红细胞致敏而不能使红细胞凝集的抗体 血型抗体与红细胞的表面抗原结合后 产生血管内或血管外溶血 血型抗体 Bloodgroupantibody 在血型抗原物质刺激下可形成的免疫球蛋白 红细胞血型抗体可分为完全抗体和不完全抗体 红细胞血型 红细胞上的遗传性标志 包括ABO Rh MNS P Lutheran Kell等 1 ABO血型系统 1901年 Landsteiner发现了人类的第一个血型系统 ABO血型系统 含抗原成分不同将人的红细胞分成A B O和AB四种血型 ABABO ABO血型合成 ABO血型系统独特的性质 1 血清存在反应强的抗体 2 组织细胞及各种体液中存在着ABH物质 ABO血型的遗传 ABO血型的A抗原亚型 1 A1亚型红细胞上具有A1和A抗原 血清中含抗B抗体2 A2亚型红细胞上具有A抗原 血清中含抗B和少量抗A1抗体 1 正向定型2 反向定型 ABO血型鉴定 3 结果判定 2 Rh血型系统 概述抗Rh抗体一般指抗 D Rh血型抗原及抗体1 Rh抗原 含D C E c和e五种 D抗原性最强 2 Rh抗体 主要通过输血或妊娠免疫而产生 Rh抗体临床意义 引起输血反应或新生儿溶血病 Rh血型鉴定 原理 1 单克隆混合试剂检测法用Rh各抗血清 IgM IgG型 试剂通过凝集反应对红细胞上Rh抗原进行鉴定 2 酶介质检测法酶介质可破坏红细胞表面的唾液酸 降低红细胞表面负电荷 减少细胞间的静电排斥力 使细胞间的距离缩小 有利于IgG型小分子特异性Rh血型抗体与红细胞上的Rh抗原反应 形成肉眼可见的凝集 白细胞血型 1 包括红细胞血型抗原2 白细胞本身所特有的血型抗原3 人类白细胞抗原 HLA 一 HLA系统基因 抗原结构 HLA基因型 位于6号染色体短臂6p21 3区域 HLA抗原 分为HLA 类分子 HLA 类分子 HLA抗原临床应用 HLA多态性的研究 器官和骨髓移植前组织相容性配型 亲子鉴定 HLA与某些疾病的关联 遗传学方面 二 HLA系统抗原的检测方法 HLA血清学技术 微量淋巴细胞毒试验 分型血清中含有的抗特定HLA抗原的细胞毒抗体与待检淋巴细胞膜表面的HLA抗原结合后 在补体的参与下损伤细胞膜 经伊红或台盼蓝染色后 观察细胞是否被染色 了解细胞损伤 死亡的情况 二 HLA系统抗原的检测方法 HLA的分子生物学检测 PCR SSP PCR序列特异性引物 PCR RFLP PCR限制性片段长度多态性 PCR SBT PCR 直接测序分型 血小板血型 1 包括非特异抗原2 本身所特有的特异抗原 HPA 3 血小板抗体包括同种抗体和自身抗体 血小板同种抗体 同种血小板抗体一般由输血 妊娠或骨髓移植等免疫刺激而产生 最常见的抗体是HRA lb和5b抗体 这和相应HPA抗原在群体中的分布频率有关 1 新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜2 输血后紫癜3 血小板输注无效 二 交叉配血实验 概念是指将受血者与供血者的红细胞和血清 浆 交叉混合 观察有无凝集或溶血等现象的试验 分类1 主侧 配血2 次侧 配血3 自身对照 交叉配血实验技术 1 盐水介质法2 酶介质法3 抗人球蛋白介质法 4 凝聚胺法5 微柱凝胶免疫技术 三 新生儿溶血病 HDN 是指母亲与胎儿血型不合引起血型抗原免疫所致的一种溶血疾病 我国最多见的是ABO血型系统所引起的溶血病 其次是Rh系统引起 一 ABO新生儿溶血病 ABO HDN是由于母婴血型不合 母体的IgG抗A B 经过胎盘进入胎儿血循环破坏胎儿红细胞所引起 二 Rh血型引起的新生儿溶血 实验室检查 直接抗人球蛋白试验游离试验 是检测新生儿血清中的血型抗体 释放试验 与直接抗球蛋白相同 也是检测新生儿红细胞上是否存在免疫抗体 四 输血不良反应 概念 输血过程中或输血后 因输注血液或血液制品而发生的输血前不能预期的不良反应 分类 按输血反应发生的时间 输血不良反应可分为急性反应和迟发性反应 按输血反应发生的机制 输血不良反应可分为免疫性反应和非免疫性反应 常见输血不良反应 1 溶血反应 1 急性溶血性输血反应 AHTR 2 迟发性溶血性输血反应 DHTR 2 非溶血性发热性输血反应 FNHTR 3 过敏反应4 输血相关性移植物抗宿主病 TA GVHD 5 输血相关性急性肺损伤 TRALI 五 输血传播疾病 病毒性疾病 1 病毒性