waters tof 飞行时间质谱技术及应用.ppt

Waters飞行时间质谱技术及应用 WatersQ Tof质谱的历史 1996 世界上第一台Q Tof质谱1998 Q Tof22000 Q TofmicroandQ TofUltima2004 Q TofPremier2007 HDMS HighDefinitionMassSpectrometer 主题 分辨率及准确质量数定性分析动态范围定量分析灵敏度检测限 为什么需要准确质量数 每一个元素都有一个特有的质量数化合物由不同的元素组成 也具有特有的质量数及特有的物化性质质谱 检测化合物质量数如果某一化合物质量数测量得足够准确 那么就能推断出一个唯一的元素组成 C 12 0000H 1 0078O 15 9949N 14 0031 为什么需要准确质量数 formaterialswithmolecularweightsbelow1000 themeasuredmassshouldgenerallyagreeto5ppmorbetter withthecalculatedmass NoticetoAuthorsofPapers J Am Chem Soc 1999 121 1 7A 12A 简单的例子 分子量 28 CO 27 9949N2 28 0061C2H4 28 0313这些分子的整质量数相同 但是准确质量不同单靠整质量数不能判定组成需要尽量准确的质量数才能尽量准确的判断 简单的例子 分辨率 注 FWHM 半峰宽 高分辨 准确质量 质量准度 真实质量 400 0000测量质量 400 0020偏差 0 0020 高 低分辨率的差异 准确质量带来的差异 assumingelementsC50H100N5O5S2 标称质量 Nominalmass 谱图 如用四极杆或离子阱得到的数据 50ppmtolerance m z311 081437种可能性 准确质量带来的差异 usingelementsC50H100N5O5S2 准确质量 ExactMass 谱图 如飞行时间得到的数据 3ppmtolerance m z311 08143PossibleResults 不同分辨性能对液质分析的影响 ZSpraySource LockSpray专利技术使精确质量测定能简单实现使得不必过分依赖于实验室环境和条件的稳定 每次采集都同时用一个已知的 确定的质量数进行校正LockSpray是Waters飞行时间质谱产品所独有的 而且是标准配置 LockSprayTM简单实现精确质量测定 液相的样品通路不会影响参比路的离子化 Reference SampleTIC SampleUV LockSpray正负离子化模式切换 LockSpray正负切换试验 分析样品 Raffinose 棉子糖 M Na 527 1588M H 503 1612参比样品 Leucineenkephalin 亮氨酸脑啡肽 M H 556 2771M H 554 2615 正负离子化模式切换 正负离子化模式切换在300毫秒之内对未知物分析鉴别非常适用同样也能用LockSpray得到准确质量数 Q TofPremier结构简图 V模式分辨率 Bovineinsulin 牛胰岛素 Resolution 11 000 W模式分辨率 Bovineinsulin Resolution 22 000 应用实例 贝雷拉唑代谢物分析 质量差 36mDa MSn怎么办 准确质量的选择离子质量色谱图 W模式的灵敏度是否比V模式低 相同量的reserpineW模式与v模式 灵敏度相同 准确质量数是否足够 SummaryConclusionHighmassaccuracy 95 offalsecandidatesFinalQuote Assumingthationspeciesarefullyresolved eitherbychromatographyorbyhighresolutionmassspectrometry weconcludethatamassspectrometercapableof3ppmmassaccuracyand2 errorforisotopicabundancepatternsoutperformsmassspectrometerswithlessthan1ppmmassaccuracyorevenhypotheticalmassspectrometerswith0 1ppmmassaccuracythatdonotincludeisotopeinformationinthecalculationofmolecularformulae 同位素模型 实例 标称质量数作组成推断 Nominalmassmeasurementdoesn tprovidedataspecificityAtm z609 with0 1Daerroraroundmass 2214possiblecombinationsUsingwiderangeofelements C500H1000N20O20S10Cl10Br10 实例 不开启i FIT过滤功能 5ppm Atm z609 with5ppmerroraroundmass 134possiblecombinationsUsingwiderangeofelements C500H1000N20O20S10Cl10Br10 实例 不开启i FIT过滤功能 3ppm Atm z609 with3ppmerroraroundmass 81possiblecombinationsUsingwiderangeofelements C500H1000N20O20S10Cl10Br10 实例 开启i FIT过滤功能 5ppm Atm z609 with3ppmerroraroundmass andiFitfilters only1possiblecombinationUsingwiderangeofelements C500H1000N20O20S10Cl10Br10IsotopeFiltersturnedon3 instrumenterrorCarbonrange 3 i FIT的重要性 精确质量和同位素模型 i fit 处理 为元素组成确证提供了强有力的工具Watersoa Tof均具有i fit功能 动态范围 DynamicRange ADC与TDC对分辨率的响应 TDC time to digitalconvertor TDCsvsADCs analogue to digitalconvertors atlowm zvalues 混合物 8种化合物 准确质量分析 RMSppmError 1 6 分辨率 m z609 11400FWHM 分辨率 m z380 11500FWHM 分辨率 m z152 11300FWHM DynamicRangeEnhancement DRE 动态范围增强 1 未使用DRE功能 2 使用DRE功能 动态范围能到达4个数量级 DRE Sulphadimethoxine 1 10000pg uL r2 0 998 体内药物代谢物研究 灵敏度 EDC EDC EnhancedDutyCycle增强检测灵敏度 EDC m z347 112 Q TofPremier 普通模式 EDC模式 SynaptTM HDMS 增加了一维分离 离子迁移率 离子淌度 IonMobility Tri Wave HDMS结构简图 Tof质谱的应用领域