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生物膜系统及细胞工程 复习15 一 生物膜系统 生物膜的组成 细胞膜 核膜以及由膜围成的细胞器组成的连续统一的膜系统 生物膜的结构 蛋白质 脂质 多糖功能 均具有一定的流动性及选择透过性作用 物质运输 信息传递 能量转变 细胞识别 1 直接联系的膜 2 间接联系的膜 膜的转变依赖于膜的一定的流动性 同位素标记法 32p标记磷脂 内质网 其它膜结构 突触小泡 分泌小泡 吞噬小泡 验证膜具有连续性 分泌蛋白的合成及分泌过程 氨基酸 核糖体 内质网 高尔基体 细胞膜 体现了生物膜在功能上的连续性 明确分工 紧密联系 跨膜层数 指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法 通过某种工程学手段 在细胞整体水平或细胞器水平上 按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术 植物细胞工程 动物细胞工程 细胞工程 1 动物细胞培养2 动物细胞融合3 单克隆抗体4 胚胎 分割 移植5 核移植 1 植物组织培养2 植物体细胞杂交 技术手段 植物细胞工程 动物细胞工程 细胞工程 1 定义 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性 2 基础 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质 都有发育成为完整个体所必需的全部基因 3 大小 4 实现条件 离体 一定的营养物质 激素 其他外界条件 受精卵 生殖细胞 体细胞分化程度低的细胞 分化程度高的细胞植物体细胞 动物体细胞 不易表达 二 细胞的全能性 三 1 植物组织培养 离体的植物器官 组织或细胞 高度分化了的 愈伤组织 细胞团 根 芽 胚状体 植物体 外植体 脱分化 再分化 离体的植物器官 组织或细胞 脱分化 再分化 三 1 植物组织培养 1 植物组织培养过程 2 培养条件 含有全部营养成分的培养基 一定的温度 空气 无菌环境 适合的ph 适合的光照等 外植体 举例 花药离体培养基因工程培育的抗棉铃虫的棉花植株细胞工程中培育的 番茄 马铃薯 杂种植株 过程 动物胚胎或幼龄动物的组织 器官 胰蛋白酶 分解弹性纤维 10代细胞 传代培养 无限传代 遗传物质未改变 遗传物质改变 三 2 动物细胞培养 植物组织培养和动物细胞培养的比较 均需适宜的外界条件 ph 温度 营养及 无菌 无毒环境 固体 营养物质 蔗糖 植物激素 培养成植株 液体 营养物质 葡萄糖 动物血清 培育成细胞系或细胞株 1 生产蛋白质制品 如病毒疫苗 干扰素 单克隆抗体 动物激素 2 用于某些器官移植 1 试管苗的快速繁殖 2 无病毒植物的培育 3 生产药物等 4 人工种子 5 转基因植物的培育 融合细胞 杂种细胞 去壁的常用方法 原生质体融合方法 四 1 植物体细胞杂交 融合成功的标志 人工诱导 筛选 物理法 化学法 灭活的仙台病毒 四 2 动物细胞融合 过程 制备单克隆抗体 主要用于制备单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理 化学方法 同左 生物 灭活的病毒 物理 离心 振荡 电刺激 化学 peg 诱导方法 使细胞分散后诱导细胞融合 去除细胞壁后诱导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合的比较 特点 产量低 特异性差 纯度低 反应不够灵敏 五 单克隆抗体 1 常规抗体制备 一个b淋巴细胞 只分泌一种特异性抗体 2 单克隆抗体 杂交瘤细胞 小鼠骨髓瘤细胞 能无限增殖 融合 抗原注入小鼠体内 已免疫的b淋巴细胞 骨髓瘤细胞 筛选出杂交瘤细胞 筛选出能产生特异性抗体的细胞群 从培养液中提取 从小鼠腹水中提取 细胞融合 动物细胞培养 单克隆抗体的制备 特定的选择培养基 主要用于疾病的诊断 治疗和预防 若在单抗上带上抗癌药物制成 生物导弹 将药物定向带到癌细胞所在部位 既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞 特点 与常规抗体相比 具有特异性强 灵敏度高 化学性质单一的优点 单克隆抗体的应用 单克隆抗体是指 杂交瘤细胞产生的单一抗体 哺乳动物的胚胎移植 受精卵 幼体动物 2 用途 加快优良种畜的繁殖速度 解决哺乳动物妊娠时间长 产子数少 繁殖速度慢的问题 1 过程 细胞核移植 多莉羊的培育过程 核移植 动物细胞核有全能性 例 06江苏 下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图 1 技术是单克隆抗体技术的基础 2 根据培养基的用途分类 图中hat培养基属于 培养基 3 单克隆抗体与常规的血清抗体相比 最大的优越性是 4 动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外 还可以采用 5 选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的 特点 又具备淋巴细胞的 特点 6 淋巴细胞是由动物体 中的 细胞分化 发育而来 7 杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖 氨基酸的主要方式是 动物细胞培养 选择 特异性强 灵敏度高 灭活的病毒 在体外大量增殖 分泌特异性抗体 骨髓 造血干细胞 主动运输 1 科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合 得到杂交细胞 经培养可产生大量的单克隆抗体 与骨髓疤细胞融合的是 a 经过免疫的b淋巴细胞b 没经过免疫的t淋巴细胞c 经过免疫的t淋巴细胞d 没经过免疫的 淋巴细胞 a 2 用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织 其主要原因是这样的组织细胞 a 容易产生各种变异b 具有更强的全能性c 取材十分方便d 分裂增殖的能力强 d 3 动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于 a 培养基不同 b 动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 c 动物细胞可以传代培养 而植物细胞不能 d 动物细胞能够大量培养 而植物细胞只能培养成植株 a 4 动物细胞融合和植物原生质体融合比较 在动物细胞融合中有特殊性的是 c a 融合的原理b 融合的优点c 融合的诱导手段d 融合的过程5 单克隆抗体制备过程中 骨髓瘤细胞和b淋巴细胞诱导融合后 要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞 在这种培养基上不能存活 增殖的细胞是 c b淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 b淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞a b c d 6 基因型为aabb的水稻 具有24条染色体 的花粉通过无菌操作 接入试管后 在一定条件下形成试管苗的育种过程 1 愈伤组织是花粉细胞不断分裂后的形成的不规则细胞团 愈伤组织形成中 必须从培养基中获得 2 要促进花粉细胞分裂生长 培养基中应有 和 两类激素 3 愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根 再由芽发育成叶和茎 这一过程必须给予光照 其原因是 利用光照制造有机物 供试管苗生长

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