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文档简介

dna的粗提取与鉴定 实验原理 dna在氯化钠溶液中的溶解度 是随着氯化钠的浓度的变化而改变的 当氯化钠的物质的量浓度为0 14mol l时 dna的溶解度最低 利用这个原理 可以使溶解在氯化钠溶液中的dna析出 dna不溶于酒精溶液 但是细胞中的某些物质可以溶于酒精 就可以进一步提取出含杂质较少的dna dna遇二苯胺 沸水浴 会染成蓝色 因此 二苯胺可以作为鉴定dna的试剂 材料 鸡血细胞液 5 10ml 体积分数为95 的酒精溶液 冷却 蒸馏水 质量浓度为0 1g ml的柠檬酸钠溶液 物质的量浓度分别为2mol l和0 015mol l的氯化钠溶液 二苯胺试剂 方法步骤 1 制备鸡血细胞液取质量浓度为0 1g ml的柠檬酸钠溶液 抗凝剂 100ml 置于烧杯中 将新鲜鸡血180ml注入 同时用玻璃棒搅拌 以免凝血 然后倒入离心管中用1000r min的离心机离心2min 此时 血细胞沉淀于离心管的底部 除去上清液 就可以得到鸡血细胞液 问 提取鸡血中的dna时 为什么要除去血液中的上清液 2 提取鸡血细胞的细胞核物质将制备好的鸡血细胞液5 10ml 注入烧杯中 加入蒸馏水20ml 同时用玻璃棒沿一个方向快速搅拌 使血细胞加速破裂 过滤 取其滤液 3 溶解细胞核内的dna将物质的量浓度为2mol l的氯化钠溶液40ml加入到滤液中 搅拌使其混合均匀 这时dna在溶液中呈溶解状态 4 析出含dna的黏稠物沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水 同时轻轻搅拌 这时会有丝状物出现 随着蒸馏水的加入逐渐增多 一直到氯化钠浓度约为0 14mol l时 不再继续增加 5 滤取含dna的黏稠物 6 将dna的黏稠物再溶解在烧杯中注入物质的量浓度为2mol l的氯化钠溶液20ml 使黏稠物尽量多溶解于溶液中 7 过滤含有dna的氯化钠用纱布过滤 取其滤液 dna溶于滤液中 8 提取含杂质较少的dna在溶液中加入冷却的酒精溶液50ml 溶液中出现杂质较少的丝状物 它的主要成分就是dna 9 dna的鉴定用二苯胺 沸水浴 鉴定 dna遇二苯胺会变蓝色 问 2和4过程中都有加入蒸馏水 两次加入的作用一样吗 为什么
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