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文档简介
1 2基因工程的基本操作程序 第一课时 1 如何获取目的基因 2 如何将目的基因连接到运载体上 3 如何将目的基因导入受体细胞 4 导入受体细胞后 是否可以稳定维持和表达其遗传特性呢 学习目标 1 简述基因工程的四个操作步骤 2 理解 目的基因的获取 基因表达载体的构建 学习重点 理解 目的基因的获取 基因表达载体的构建 学习难点 1 从基因文库中获取目的基因 2 利用pcr技术扩增目的基因 思考与讨论 组内合作讨论共同完成 1 为什么要构建基因文库 直接从含目的基因的生物体内提取不行吗 三组 六组侧重 2 如何构建基因组文库 五组侧重 如何构建cdna文库 二组侧重 3 如何从基因文库中获取目的基因 4 如何利用pcr技术扩增目的基因 八组 九组侧重 5 作为基因工程表达载体 是不是只需含有目的基因就可以完成任务呢 为什么 七组侧重 6 基因表达载体的构建过程是怎样的 若a和b具有相同的粘性末端 现由足够多的a和b两种dna片段来构建基因的表达载体 会获得哪几种重组dna分子 一 四组侧重 依据 目的基因已知的部分核苷酸序列 将目的基因已知的核苷酸序列用放射性同位素进行标记 作为探针 配制成探针液 是一段带有检测标记且序列已知的与目的基因互补的单链dna序列 将硝酸纤维膜盖在培养有该种基因文库菌落的培养基上 将菌落转移到硝酸纤维膜上 然后使dna暴露 变性成单链固定在膜上 经过处理使dna暴露变性成单链固定在膜上 将第一步准备好的探针和其混合 让两种dna链杂交 将x光片放在膜上 让其放射自显影 经过冲洗这时有放射性的部位x光片上会出现的黑斑 将第一步准备好的探针和其混合 让两种dna链杂交 将x光片放在膜上 让其放射自显影 经过冲洗这时有放射性的部位x光片上会出现的黑斑 将第一步准备好的探针和其混合 让两种dna链杂交 将x光片放在膜上 让其放射自显影 经过冲洗这时有放射性的部位x光片上会出现的黑斑 根据这个黑斑对应的位置就可以找到培养基中的菌落 然后从该菌落中提取目的基因就可以 将目的基因已知的部分核苷酸序列用放射性同位素进行标记 作为探针 将硝酸纤维膜盖在培养有该种基因文库菌落的培养基上 将菌落转移到硝酸纤维膜上 然后使dna暴露 变性成单链固定在膜上 将第一步准备好的探针和其混合 让两种dna链杂交 将x光片放在膜上 让其放射自显影 经过冲洗这时有放射性的部位x光片上会出现的黑斑 根据这个黑斑对应的位置就可以找到培养基中的菌落 然后从该菌落中提取目的基因就可以 思考题三 如何从基因文库中获取目的基因 思考与讨论 组内合作讨论共同完成 1 为什么要构建基因文库 直接从含目的基因的生物体内提取不行吗 三组 六组侧重 2 如何构建基因组文库 五组侧重 如何构建cdna文库 二组侧重 3 如何从基因文库中获取目的基因 4 如何利用pcr技术扩增目的基因 八组 九组侧重 5 作为基因工程表达载体 是不是只需含有目的基因就可以完成任务呢 为什么 七组侧重 6 基因表达载体的构建过程是怎样的 若a和b具有相同的粘性末端 现由足够多的a和b两种dna片段来构建基因的表达载体 会获得哪几种重组dna分子 一 四组侧重 最佳表现小组 3月份累积 教师寄语 用汗水织就实力 用毅力成就梦想
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