气相色谱简单应用SOP教案.doc

气相色谱的应用与实际操作一、 气相色谱法简介样品气相色谱是一种利用物质的沸点、极性及吸附过程的差异来实现混合物分离的一种技术，其过程如图1-1所示。 载气进样汽化色谱柱分离检测器信号记录 图1-1 GC分析流程图二、 气相色谱的简单应用1、定性鉴定对于简单样品，可以通过对照标准物质来定性。即在相同的色谱条件下，分别注射标准样品和实际样品，根据保留值即可确定色谱图上的峰是何种物质。2、定量分析 常用的色谱定量方法有峰面积百分比法、归一化法、内标法、外标法和标准加入法。此处以6种含磷有机物为例，采用外标法进行定量分析。三、 实验准备1. 实验试剂试剂名称试剂信息丙酮色谱纯正己烷色谱纯1 : 1丙酮：正己烷V : V对氧P100 ppm对SP100 ppmO,P-DDT100 ppmP,P-DDT100 ppm马拉硫磷100 ppm水胺硫磷100 ppm 2.实验器材器材名称规格或型号一次性吸管1 mL定量小管1 mLGC进样瓶2 mL，棕色进样针5L均质器ika T18，USA移液枪10L气相色谱仪Agilent 6890，美国四、 实验操作1、混标的配制分别移取浓度为100ppm的对氧P、对SP、马拉硫磷、水胺硫磷、P,P-DDT和O,P-DDT六种含磷有机物的标准品各10L于同一定量管中，用1:1丙酮：正己烷（V : V）定容至1mL，转移至进样瓶内。2、单标的配制分别移取浓度100ppm的对氧P、对SP、马拉硫磷、水胺硫磷、P,P-DDT和O,P-DDT六种含磷有机物的标准品各10L于不同定量管中，用1:1丙酮：正己烷（V : V）各自定容至1mL，转移至进样瓶内。3、气相色谱的使用（1）仪器操作流程仪器打开顺序：氮气总阀 气相色谱仪开关 计算机开关 打开软件 烘烤分离柱排出杂质 设置各项参数及升温程序 进样 气相色谱图 数据分析 长时间未使用时，需设置烘烤程序，待色谱柱中的水分及其他杂质被排除完毕后，基线降低至1000以下时，方可进样。（2）软件操作流程在线实验操作1.进入主界面ECD检测器2.打开参数编辑器，设定炉升温程序，烘烤分离柱，将残留水分与杂质排出。 3.待柱子烘烤完毕后，检测器与进样器进行升温，选择不分流模式，同时以氮气作为载气，并填写进样器的温度，压力和流速。4.选择进样的模式为恒流，进样器和检测器的类型分别选择前进样器和前检测器。此处界面可查看分离柱的相关信息（柱长，内径和涂层厚度），同时可设置载气的压力和流速。 5.设计分离的升温程序并保存方法，右界面可查看最高炉温。6.待基线将至1000以下后，调取已保存的升温程序。在Sample Info填写样品名称，选择保存地址，保存样品信息后，开始进样。文件位置文件名离线数据分析 （3）进样及数据分析Pre Run 进样针吸取2L的样品快速注入进样器 STAR 出峰 数据分析 进样时，进样针须先用色谱纯的正己烷清洗三遍，再用标准品或样品润洗三遍，排出进样针中的气泡后（抽吸一定量的溶液，迅速按压排出），吸取2L标准品或样品进行进样。进样后，进样针须再用色谱纯的丙酮再清洗三遍。 （4）数据分析 1）定性分析先后将配制好的混标，和各个单标分别进样。混标的色谱图中除溶剂峰外，响应较大的峰数目理论上应与单标的数目相同，若有出入，可能为混合标准品配制失误或升温程序不够合理，导致目标物未能较好地分离。在确保混标配制无误的情况下，出峰数少于混合标准物种的目标物数目时，则应适当调整升温程序，降低升温速度，使各物质气化时间间隔拉长，从而增大出峰时间间隔。混标中各峰的出峰时间若与单标如物质A1的出峰时间一致，即可判定在此处出峰的物质为A1，由此可一一对混标所出的各峰进行定性分析，同时也可排除混合标准物中所存在的杂质峰。操作步骤 1.打开离线软件，调取混标数据和各个单标数据。对SP对OP文字删除按钮对SP对OP2.用删除文字按钮删除各个样品的文字信息，将单标的出峰位置与混标进行比对，对混标所出的峰所对应的物质进行定性。如图所示，在10.62处的峰所对应的物质为对SP，而在9.94处出峰的物质为对OP。一一调出单标所出的峰和混标的各峰进行对照，即可知哪些峰为目标物，哪些峰为杂质峰。经分析，6种含磷有机物及其保留时间如下：样品名D-OPMLLLD-SPSALLO,P-DDTP,P-DDTtR/min9.93610.52410.61410.96714.31515.2182)定量分析将不同浓度的混合标准品分别进样，对不同浓度的各个目标物所出峰进行面积积分，建立峰面积关于目标物浓度的标准曲线（标准曲线的相关系数R20.995）。待测样品进样后，根据出峰位置进行定性，同时根据各峰的峰面积及其标准曲线即可计算出各种目标物的浓度。操作步骤 1.打开样品出峰数据，选择积分模式，删除文字信息后，选择积分按钮对各个目标物所出峰进行面积积分（由峰底部的积分起点画一条积分线指向积分终点），选择New Calibration Table建立标准曲线，将各物质的第一个浓度（此处为200ppb）与其峰面积作为标准曲线的第一个点。积分终点积分起点积分按钮积分模式保留时间与峰面积信息建立新标线填写浓度200ppb积分区间添加标准品浓度调整积分位置，填写各峰所对应的物质的名称。2.调取第二个梯度浓度，同样对各个目标物的出峰进行积分后，选择Add Level，增加新的浓度400ppb，作为标线的第二个点。显示初步的标准曲线，同样修改积分区间，使积分更加准确。标准曲线及相关系数R2同样再添加一个浓度为800ppb的样品，得出各个目标物由三个浓度而构成的峰面积关于浓度的标准曲线（若要得到更准确的标准曲线，可适当增加24个点）。如图所示，由三个浓度得出