焦糖色素中氨氮检测方法.doc

检测中心文件-方法研究报告焦糖色素中氨氮检测方法验证报告【前言】焦糖色素通常为棕黑色至黑色的液体或固体，有一种烧焦的糖的气味，并有某种苦味。其原料多为果糖、葡萄糖、转化糖、蔗糖和淀粉的水解产物或部分水解的产物。焦糖色素通常是一种复杂的混合型化合物，其中有些是以胶体聚集体形式存在，可通过加热碳水化合物单独制成或者在食用的酸、碱、盐参与下合成。一般认为，焦糖反应有两种类型：一类是在有胺伴随下的美德拉反应；另一类是纯焦糖化反应（单纯地加热葡萄糖的焦化反应），即在相当高的高温下（约200）使碳水化合物反应产生醛类，然后缩合成染色成份。两类反应都能产生醛类和二羰基化合物，但美拉德反应含氨成份。食品安全国家标准GB 8817-2001食品添加剂 焦糖色中焦糖色素的氨氮的测定方法是目前最经典也是最准确的方法，根据公司年度计划的要求，检测中心拟根据GB 8817-2001建立焦糖色素中氨氮的检测方法。1实验原理将样品进行蒸馏，使游离的氨逸出，用硼酸吸收后，再用盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量来计算样品中氨氮的含量。2仪器与试剂：2.1试剂实验中所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682 规定的三级水。2.1.1 硼酸（GB/T 628）：2%溶液。2.1.2 甲基红-溴甲酚绿混合指示液：5份0.2%溴甲酚绿乙醇溶液与1份0.2%甲基红乙醇溶液混合。2.1.3 氧化镁（HGB 1294）。2.1.4 盐酸（GB/T 622）0.1mol/L溶液，按GB/T 602配制和标定。2.2 仪器 2.2.1 电子天平：FA20042.2.2 双光束紫外可见分光光度计：TU-19013. 实验步骤：3.1样品吸光度的测定 称取样品0.5g（精确至0.002g）。用水定容至500mL容量瓶中，用1cm比色皿，在610nm处用紫外分光光度计测定其吸光度。3.2样品蒸馏：称取焦糖色素样品约5g（0.001g），移入干燥的500mL全玻璃蒸馏器中，再加入2.0g氧化镁和180mL纯净水，以直火蒸馏。蒸馏液吸收于加有混合指示液5滴的5mL2%硼酸溶液中，至蒸馏液约100mL时，停止蒸馏。3.3样品测定 将蒸馏液以0.1mol/L的盐酸进行滴定，当溶液呈灰红色时即为滴定终点，记录下盐酸消耗的体积。3.4 结果计算：X =（V1 - V0 ）* c * 0.017 * 100 * 0.1/(m * A610)式中 X样品中氨氮的含量，以NH3计，%；V1样品滴定消耗盐酸标准溶液的体积，mL；V0空白滴定消耗盐酸标准溶液的体积，mL；c 盐酸标准滴定溶液浓度，mol/L；m 样品的质量，g；0.017与1.00mL1.000mol/L的盐酸溶液相当的氮的克数，g；A610样品在610nm处的吸光度。4重复性试验 精密称取5克左右焦糖色素样品加入全玻璃蒸馏器中，然后按3.1和3.2方法进行蒸馏和测定，同一样品平行检测6次，测定样品中的氨氮含量，计算检测结果的RSD值，具体结果如下：编号123456平均值RSD，%氨氮含量，%0.07370.07320.07220.07410.07350.07440.07351.055回收率试验精密称取5克左右焦糖色素样品加入全玻璃蒸馏器中，并准确加入0.01到0.02克左右氯化铵，然后按3.1和3.2方法进行蒸馏和测定，同一样品平行检测6次，测定样品中的氨氮含量，计算检测结果的RSD值，具体结果如下：编号12345平均值样品质量，g4.74424.79604.94824.82415.1606空白样品氨氮含量，%0.07350.07350.07350.07350.0735NH4Cl添加量，g0.01130.01130.02820.02600.0154样品中氨氮添加浓度，g0.0035730.0035730.0089180.0082220.00487氨氮检测浓度，%0.1410.1420.2330.2210.155回收率 ，%89.9691.7189.0487.3387.2289.056检测总结6.1通过重复性试验和回收率试验结果表明：重复性试验结果为1.05%，回收率试验结果为89.05%，均符合要求。6.2实验过程中发现公司自制焦糖色素样品为无氨法制得，通过实验测定的氨氮含量极低，故另购买氨法生产的焦糖色素样品进行实验，实验结果满意。6.3通过以上重复性和回收率试验结果说明，此方法适合于检测焦糖色素中氨氮的测定。7注意事项7.1硼酸溶液的温度不应超过40，否则氨吸收减弱，造成检测结果偏低。如果