菌种质量控制体系.doc

学习资料收集于网络，仅供参考重庆品田农业发展有限公司食用菌菌种管理体系重庆品田农业发展有限公司食用菌菌种质量控制体系1、机构和人员1.1应具备省级人民政府农业行政主管部门考核合格的检验员1名以上，生产技术员2名以上；菌种组责任人1.2机构设置：品质管理员菌种销售员采购（同公司合并）菌种生产员设备管理员仓管（同公司合并）2、场地、厂房设置2.1场地选择2.1.1基本要求 地势高燥，通风良好。排水畅通，交通便利。2.1.2环境卫生要求 至少300m之内无禽畜舍，无垃圾（粪便）场，无污水和其他污染源（如大量扬尘的水泥厂、砖瓦厂、石灰厂、木材加工厂等）。2.2厂房设置 有各自隔离的摊晒场、原材料库、配料分装室（场）、灭菌室、冷却室、接种室、培养室、贮存室、菌种检验室。厂房建造从结构和功能上满足食用菌菌种生产的基本需要。2.2.1摊晒场 要求平坦高燥、通风良好、光照充足、空旷宽阔、远离火源。2.2.2原材料库 要求高燥、通风良好，防雨，远离火源。2.2.3配料分装室（场） 要求水电方便，空间充足。2.2.4灭菌室 要求水电安全方便，通风良好，空间充足，散热畅通。2.2.5冷却室 洁净、防尘、易散热2.2.6接种室 设缓冲间，防尘换气性能良好。内壁和屋顶光滑，经常清洗和消毒。做到空气洁净。2.2.7培养室和贮存室 内壁和屋顶光滑，便于清洗和消毒。培养室和贮存室墙壁要加后，利于控温。2.2.8菌种检验室 水电方便，利于装备相应的检验设备和仪器。3、设备设施3.1基本设备 磅称、天平、高压灭菌锅、接种箱、调温设备、除湿机、培养架、恒温箱、冰箱、显微镜及常规用具。3.2基本设施 配料、分装、灭菌、冷却、接种、培养等各环节的设施规模要配套。冷却室、接种室、培养室和贮存室都要有调温设施。4、采购控制 适用于从原辅材料采购、入库、检验、检查，到投产、回收、报废等全程受控。4.1原材料准备4.1.1采购人员应具备培养基原料质量、登记、卫生的知识和技能。4.1.2原辅材料来源要相对固定。工业副产品规格、质量应符合相关产品标准。培养基原料如：农业秸秆、壳皮、渣饼、糠麸、木屑类应来自非污染农田，应无虫无螨。化学合成类产品的原料，应选择食品级材料。不得在生产用培养基内加入有毒有害物质和致敏物质。4.1.3杀菌剂、杀虫剂、消毒剂、发酵剂、营养添加剂类，应采购有国家行业主管部门登记注册、有生产许可证或批号的企业生产的产品。严禁采购“三无”产品。4.1.4容器4.1.4.1母种 使用玻璃试管和棉塞，试管18mm180mm或20mm200mm，棉塞要使用梳棉，不应使用脱脂棉。4.1.4.2原种 使用650ml750ml，耐126高温的无色或近无色的玻璃菌种瓶，或850ml耐126高温白色半透明符合GB 9687卫生规定的塑料菌种瓶，或15cm28cm耐126高温符合GB 9688卫生规定的聚丙烯塑料袋。各类容器都应使用梳棉或能满足滤菌核透气要求的无棉塑料盖。4.1.4.3栽培种 使用符合4.1.4.2规定的容器，也可使用17cm35cm耐126高温符合GB 9688卫生规定的聚丙烯塑料袋。各类容器都应使用梳棉或能满足滤菌核透气要求的无棉塑料盖。4.1.4.4用水应符合GB 5749生活饮用水卫生标准。4.2贮存4.2.1原辅材料实行定点、分类、分区、分批存放，并有明显标识。对有温度、湿度及特殊要求的原辅材料应按规定条件储存；一般原辅材料的贮存场所或仓库，应地面平整，通风良好、干燥、清洁，具有防蝇防鼠设施。仓库内应经常清扫，定期消毒，保持清洁。4.2.2存放物品应离地离墙，并与屋顶保持一定的距离。垛与垛之间也应有适当的距离。4.2.3原辅材料场地和仓库管理人员，要定期检查质量和卫生情况，按时清扫、消毒、通风换气。4.2.4确定原辅材料的储存期，采用先进先出的原则。对不合格或过期原辅材料应加注标识并及早处理。及时挑出变质发霉或不符合质量和卫生标准的材料，防止污染。4.2.5原辅材料购进后对来源、规格、包装情况进行初步检查，按验收制度的规定填写入库单，入库后应向质检部申请取样检验。4.2.6原辅材料的使用实行领用登记制，做好出库记录。5、产品标识和可追溯性的控制5.1目的5.1.1设立产品的标识程序，通过对产品生产全过程实施标识控制，防止不合格品误用、不同规格产品混装、混用。5.1.2通过标识，明确原料、半成品及成品的身份，以保证需要时，能够对质量、原因及责任等相关问题进行追溯，并能追回不合格产品。5.2范围 适用于仪器、设备、工具和原辅材料采购、菌菇生产、贮存到交付的全过程，也适用于需要追溯的任何场合。5.3职责5.3.1仓管部门或人员负责库存原辅材料（容器、外协件、外购件）和产品的标识；5.3.2生产部门或人员负责生产过程的标识；5.3.3品管部门（质检部）或人员负责对质量问题进行追溯、检验标识状态、标识维护；5.3.4销售部负责贮存、交付过程的标识；5.3.5各相关部门负责各自生产阶段产品标识的监督。5.4控制程序5.4.1标识的方法5.4.1.1采购的物料送达后，由质检员检验合格后作状态标识，仓库管理员放置于特定区域。5.4.1.2经检验不合格品的物料由质检员作状态标识后，由仓库管理员负责放置在不合格区域。5.4.1.3待检区域内产品，未经检测确认，不得放行出库。5.4.1.4在采购的原辅材料包装或堆放处以标签注明来料的名称、日期、登记、数量或重量。5.4.2过程控制的标识 食用菌物菌培养的特点，使质量检验不能逐一进行，而采用抽样检查，因此培养过程中抽样检验，批量标识非常重要。检查后，过程中检验的不合格品，应存放在相应的不合格区域中，防止流入下一道工序，生产现场设定不合格品存放区或做标识牌并标识清楚。返工品由生产技术员（品管员）负责状态标识，生产班长安排相关人员放置于规定区域。5.4.3成品的标识和可追溯性5.4.3.1成品检验合格后，应归类区分摆放，同时挂上标识卡。标识卡应注明商品明、规格型号、生产日期、批号、数量、检验员等。5.4.3.2成品检验不合格，由品管员或质检员做状态标识，安排相关人员放置于规定区域内。5.4.3.3成品库所有成品要标识清楚，防止过期菌种流进栽培袋生产环节。5.5追溯程序 当有追溯要求时，菌种制作中心可根据入库记录、出库记录等追溯到生产记录、检验记录，直至原料和种源得出结论。6、过程控制6.1制定生产技术文件6.1.1生产技术文件见公司食用菌菌种生产技术规程6.1.2生产工艺规程按公司食用菌菌种生产技术规程执行，生产工艺规程要求张贴明示，便于操作执行。6.1.3岗位操作规程按公司相关岗位操作规程执行，所有具体操作要求以贴挂墙上的方式明示。6.1.4制种工艺流程 按公司食用菌菌种生产技术规程的要求执行。6.1.5培养基制备工艺 按公司食用菌菌种生产技术规程的要求执行。6.2生产过程的负责人是专职人员，具备食用菌或相关专业大专以上或相应学历，并具实践经验，能够按照公司食用菌菌种生产技术规程的要求组织生产，有能力对食用菌菌种生产中出现的实际问题做出正确的判断和处理。主要生产人员应在职业资格培训和岗位培训合格后上岗。6.3培养基制备6.3.1专人负责母种、原种、栽培种培养基的配制。6.3.2配制培养基时，必须严格按照规定的配方和技术规程配制，并做好生产记录。6.3.3填写培养基档案资料。6.3.4培养基配制员应对原料做最终检查，不合格原料不得使用。6.4灭菌操作6.4.1母种和原种培养基灭菌应采用高压蒸汽灭菌。应按规定程序操作灭菌，注意对灭菌锅的维护保养，确保其处于正常工作状态。6.4.2尽量缩短从配制培养基到灭菌的时间，不得超过食用菌菌种生产技术规程要求的时间限度。从培养基配制到进锅最长间隔不要超过6小时。6.4.3灭菌物品要正确摆放。各级菌种培养基灭菌都不可直接叠压。6.4.4升压前要排尽锅内冷空气，使被灭菌物品处于饱和蒸汽状态，冷却降压要缓慢，压力归零前不可排汽。6.4.5要按要求准确控制灭菌时间和灭菌压力，要保持灭菌过程蒸汽的平稳，进气压力和流量不能波动太大。若出现供汽不足或暂停等情况应做应急处理，并做好记录。容量大和高温高湿期应酌情延长灭菌时间。6.4.6制备一定的棉塞，随锅灭菌，以备灭菌后替换被蒸汽打湿的棉塞。6.4.7应准确填写高压灭菌锅巡查记录表6.4.8灭菌出锅的培养基要及时转移到专用的洁净区（室）或冷却室摆斜面，冷却降温。6.5菌种要求6.5.1要严格执行公司食用菌菌种生产技术规程，从具相应资质的供种单位引种，使用经省级以上食用菌（农作物）品种认定委员会登记的品种，使用品种的生物学性状、遗传学特性、农艺性状明确和稳定。各级种源要菌龄适宜。6.5.2专人定期检查并填写菌种资源列表。6.6接种6.6.1接种应严格按照无菌操作规程进行。接种前认真核对菌种标签。6.6.2接种箱（室）坚持使用前后及时消毒，以确保洁净。接完种后的接种箱要用消毒剂擦洗。6.6.3棉塞应小心旋转拔出并捏握在手，不得放置在桌面上。其内端口不得触碰任何物品，且在塞回前应在酒精灯火焰上快速烧烤。浸湿的棉塞要更换。6.6.4接种动作要快捷、轻盈、稳健、准确，切剖菌种和接种钩不能触碰任何物体。每次接种后接种钩均要在火焰上灼烧灭菌，待冷却后再行下次接种。6.6.5接种时要严格按技术要领操作。控制好接种部位、接种块大小和扩大培养倍数，要严格执行公司食用菌菌种生产技术规程的相关规定。6.6.6不同品种要分箱、分批接种，以防混淆。6.6.7菌种的老种块和表层或上端老化菌丝必须耙除。6.6.8接种完毕后要及时填写接种情况记录表6.7培养6.7.1培养室使用前必须预先消毒，通风13天后才能使用。6.7.2培养基接上菌种后应分批、分类地排放在培养室内，尽量将不同品种排放于不同的培养架上。培养时菌袋（瓶）不可堆叠，应单层放于床架上。6.7.3培养室的温度应保持恒定，控制在适宜菌丝生长的温度范围。6.7.4培养室内应保持黑暗，相对湿度控制在50%75%。6.7.5定期检查并填写菌种培养室观测记录表，及时剔除污染和异常个体。6.7.6菌丝生长满之前应做23次检查，使用前再重新逐个检查。母种接种后2448小时进行首次检查，7296小时进行第二次检查，长至斜面50%70%时进行第三次检查，长满前做最后成品检查。6.7.7菌丝长满培养基后应及时移到储存室入库保管。7、设备管理控制7.1目的 按规定验收、验证、使用、检修和维护生产设备，包括生产工器具，保证生产设备符合使用要求，并处于正常工作状态，以控制生产过程和产品质量。由专人负责制定各种仪器设备、零配件的采购计划和日常维护、校对、校检。7.2设备管理控制要点7.2.1设备验收7.2.1.1生产使用的工器具、机器设备及其他辅助设备必须满足使用的相关要求，同时必须用无毒、易清洗消毒、耐腐蚀、坚硬的材料制作，对生产和菌种不具危害性。7.2.1.2大型设备要有制造商派出的技术员现场调试并试运行。经验收合格的设备才能投入生产。设备验收合格后应及时作验收记录。7.2.2设备技术性能验证7.2.2.1要对关键控制点的主要设备，如灭菌锅（温度探头及温度分布）、洁净生产车间（微生物检测）进行验证。7.2.2.2对杀菌或灭菌设备内温度的均一性、可重复性等定期做可靠性验证，对温度、压力等监测仪器做定期校检。7.2.3设备的使用管理7.2.3.1生产工人应熟悉所操作的设备与工器具的性能，使用前要按规定检查其工作状态，只使用正常状态的生产设备与器具。7.2.3.2生产工人应严格按操作程序和操作规范使用生产设备。7.2.4设备检修7.2.4.1禁止使用有故障的生产设备。生产过程中出现故障时，应立即停机，并通知检修人员维修。检修合格的设备才能继续使用，并做好检修记录。7.2.4.2损坏的生产设备无法立即修复时，应挂上“禁用”标志。7.2.4.3压力容器应每年定期送（报）检。7.2.5设备维护保养7.2.5.1简单生产设备和工器具由使用人员负责日常检查维护，重要生产设备（锅炉、灭菌锅、空调、拌料机等）专人负责维护保养。7.2.5.2竹木器具、棉麻制品、培养架等应保持清洁干燥，无虫蛀，不生霉。8、不合格品控制8.1目的 对生产与交付过程中形成的或可能形成的不合格品进行控制，防止接收、自用和销售。8.2控制要点8.2.1所有不合格品应控制在发现工序，不能进入下一个工序，同时对生产的原因进行分析并及时采取纠正措施。8.2.2原辅材料购入时经检验不合格，必须退回，不得用于生产。生产设备和工器具购入时经检验不合格，原则上作退货处理。生产过程中的不合格品应做返工或销毁处理。灭菌不彻底的原种或栽培种培养基可再利用。8.2.3因灭菌设备故障、操作失误或停电、停水等可能导致灭菌不彻底时，必须重新灭菌。二次灭菌的培养基应做标记，以便生产重点跟踪检查。发现灭菌有可能偏差或灭菌操作失误时，应将有问题的产品隔离，作不合格产品标识，并按照规范对灭菌记录进行分析和评估。如果判定该产品没有达到灭菌要求，应重新灭菌或做原料再利用。判定过程、判断结果和处理方法都要作详细记录。菌种瓶（袋）的棉塞曾脱落过，均视作不合格品处理，并予以标识。8.2.4接种后检出菌丝未定植的培养基，在确定非培养基或菌种污染原因而使菌丝未定植，应及时查明原因，重新接种。8.2.5培养期间检出的轻度污染菌种要妥善挖除污染，余料可再次利用，严重污染者要先做灭菌处理，然后远离厂区。 有链孢霉孢子长出的污染菌种，应装入塑料袋带出培养室，远离菌种厂烧毁或填埋，决不可随意丢弃；若发现螨害，应对整个培养室进行热杀死处理或药物防治，并对邻近培养室菌种进行仔细监控，采取预防措施。8.2.6菌瓶（袋）有裂缝、伤口、棉塞脱落、杂菌、拮抗线、高温线等现象时，均视作不合格品。8.2.7在工序检验和最终检验中发现的批量不合格品，检验员出具不合格品通知单，按问题性质分别作焚毁、填埋、作原料重复利用等处理。8.2.8连续多次出现批量不合格品时应停产，进行技术审核、评估分析，有可行的解决方案后再恢复生产。8.2.9菌种检验员负责监督不合格品的处理。9、检验和试验控制9.1目的 设置检验点，进行预先试验，尽早发现问题，防止不合格菌种和原料用于生产，防止不合格品转入下一道工序或交付使用。9.2控制要点9.2.1原辅材料检验 原辅材料入库前必须经专人检验，确认合格后入库和投产。9.2.2菌种检验9.2.2.1食用菌菌种品质管理部门的负责人必须是专职人员，应具有与食用菌或微生物专业相适应的大专以上或相应的学历，能够按本规范的要求组织检验，有能力对食用菌菌种检验中出现的实际问题做出正确的判断和处理。9.2.2.2菌种检验员必须具有高中以上的学历，应熟悉各种食用菌菌种特征及其生物学特性，准确识别食用菌菌种、杂菌、细菌及其他有害生物。9.2.2.3检验员应熟练掌握检验设备的使用操作规程，正确使用检验设备，掌握相关标准规定的检验方法。9.2.2.4对使用种源应有充分的了解、完整的手续和全面的资料，投产前进行栽培试验，验证种性，保证其质量与种性安全可靠。9.2.3过程检验9.2.3.1生产过程各工序阶段产品都要经检验合格后才能转入下一生产流程。过程检验均在线进行。9.2.3.2日常检查内容还应包括菌种标签、标识、摆放及培养条件。发现标签、标识与菌种不符或可疑者以及排放错误，应及时报告并记录。9.2.3.3菌种检查出现偏差失准时，检查员应及时停止检查，上报相关负责人员，对以前检验过的产品逆行逐批追溯检查，并提出报告意见。9.2.4互检 下道工序操作者应对上道工序转来的产品进行检验，合格后方能继续生产。9.2.5巡回监控 生产过程中，专职检验员应对操作者的自检和互检进行监督，认真检查操作者的作业方法、使用的设备、辅具等是否正确；根据需要进行抽检，填写抽检记录表，并将结果及时反馈给操作者；发现的不合格品应按本规范规定处理。9.2.6最终检验9.2.6.1所有菌种使用或出售前均要进行最终检验。检验员根据标准要求进行成品的最终检验。9.2.6.2最终检验项目为感官检验，个别需要时可抽样做商业无菌检验。检验员做检验记录。对所有最终检验都已实施且检验结果都合格的产品，出具合格证，最终检验后的产品凭检验合格报告单登记入库准备菌袋生产。9.2.7栽培试验9.2.7.1提供母种的单位，母种投入生产扩大繁殖前，必须进行一定规模的栽培试验，以检验保藏或复壮菌种是否保持原有遗传性状和农艺性状，只有与标准菌株无显著差异才可使用。9.2.7.2栽培试验设计应科学、合理、规范，应按公司食用菌菌种生产技术规程进行，使用的培养基配方、培养条件和栽培条件均应与生产实际相一致。9.2.7.3栽培试验时应按公司食用菌菌种生产技术规程详细记录菌种的农艺性状。10、环境卫生控制10.1目的 搞好厂区及车间内的环境卫生，做好废水、废料的处理，减少病虫害和杂菌污染，保证产品的质量。10.2控制要点10.2.1要求周边环境清洁卫生，要给、排水方便，通风良好，交通便利，无污染源。10.2.2每天清扫楼道、接种室、卫生间，保持生产区整洁干净；每周用消毒液拖擦培养室、楼道、车间地板一次；每月清洗门窗、冰箱、恒温箱一次；每年清洗空调一次；每月对接种室、培养室和楼道全面喷洒杀虫剂和消毒剂，消灭环境害虫和杂菌；10.2.3灭菌锅每次用完后，应排尽剩余废水。机械设备每天用完后，应清洗干净；培养室每次使用完毕，应在再次使用前用甲醛熏蒸消毒。使用的容器和堆放的场所要按规定进行清洗消毒，消毒液的浓度要求在150200毫升/千克有效氯；10.2.4经常疏通临时拌料场周围沟道，保持畅通，无淤积，不散发异味，不孳生蚊蝇。暴雨天气应加强卫生控制；10.2.5生产、质量管理人员应严格按照一般生产区与洁净区的不同要求，搞好个人清洁卫生。工作服应经常换洗，定期消毒。用于洁净区的工作服、鞋、帽等必须严格清洗、消毒，定期更换，并且只能在该区使用；10.2.6应保持接种区清洁。接种工不得将与生产无关的物品带入接种室，进接种室前必须洗手、消毒，穿戴整洁的工作服、帽、鞋，离开接种室时应更换工作服、帽、鞋；接种箱或无菌操作台每次用完后，应用消毒液擦拭干净。每天接种完毕清扫接种室、缓冲室。每周应用甲醛熏蒸消毒接种箱一次。每月应用甲醛熏蒸消毒接种室、缓冲室一次。接种室内严禁吸烟、进食。10.2.7杂物、不合格品、污染物及过期报废菌种等报废物的处理应以不影响环境卫生为原则，采取集中处理的原则，在远离车间的废料区集中堆放，每天清理出场。11、菌种贮存11.1目的 采取有效保护措施，防止产品在搬运、贮存、使用过程中丢失或损坏。11.2控制要点11.2.1编制仓库管理制度，规范仓库规定。菌种应有贮存期限要求，要明确标识有效期，保证先进先出。11.2.2仓库应保持清洁干燥，并采取措施防止有害生物的入侵。仓库配置适当的设备（如消防设备等），以保持安全适宜环境。11.2.3菌种贮存室应保持洁净，非相关人员未经批准不得擅自进出贮存室。11.2.4菌种贮存时应根据产品标准确定适宜的温度、空气湿度并避光，保持贮存室内空气新鲜。11.2.5菌种质量检验员根据产品标准负责监控母种、原种、栽培种的贮存条件。贮存菌种每周至少检查一次，检出不合格品。11.2.6不合格品种用于出菇的应于菌丝满袋后立即转移到栽培室。11.2.7超过标准规定的使用期限的菌种应及时清出。11.2.8建立仓库的出入制度和台帐，定期盘点，保持帐、卡、物一致。仓管员应经常查看库存菌种，发现异常及时通知质检人员确认、处理。12、文件和记录12.1目的 正确记录菌种生产、贮藏和使用情况是目标管理的重要辅助手段。12.2控制要点12.2.1保存菌种使用档案和出菇检验试验档案。12.2.2所有生产菌种须建立菌种保藏档案、生产档案。12.2.3按品种建立菌种保藏档案。应记录菌种来源、主要固有性状，以及保藏方法、生长条件、时间、转管次数、生产试验结果、复壮及出菇试验情况。同时，按品种和生产批号留样。12.2.4建立母种、原种、栽培种三级菌种生产档案12.2.5菌种生产档案应记录菌种来源、生产时间、基质、条件、数量、质量、技术负责人、检验记录、菌种流向等内容。12.2.6菌种使用档案应记录菌种名称、类别、编号、生产与使用时间、数量、质量、领用人等内容。12.2.7菌种档案记录使用规定的格式，应用签字笔填写，要真实、准确、及时、规范、字迹清晰，不得随意涂改，确属填写错误需要更正的需要他人确认签字。12.2.8指定专人填写菌种档案。12.2.9分类、分时间段整理记录归档。每类记录在包装上注明记录名称和记录时间等。必要时，管理员应编制目录，方便查阅。归档前应有填写人、技术负责人、部门负责人签名确认。12.2.10菌种档案由档案室（或公司办公室）统一保管。为了工作方便，菌种检验记录设批号完成培养、成品合格入库后，整理归档。菌种保藏档案为永久性档案。菌种生产档案保存至菌种使用后1年。菌种使用档案、菌种生产档案保存至菌种使用后1年。12.2.11菌种档案应保存于专门的文件柜内，须防虫、防霉、防潮、防丢失。12.2.12菌种档案属于公司的技术和商业机密，处于受控状态，对保存的档案实行分级查阅管理。工作人员查阅需经档案部门负责人或公司主管领导审批。12.2.13过期档案经技术负责人和部门负责人确认无保藏价值后，经相关领导批准后，由保存员销毁，并作销毁记录。13、培训13.1目的 提高员工素质，保证菌种生产规范的贯彻执行，切实提高菌种质量、服务质量。13.2控制要点13.2.1菌菇中心每年初根据实际制定员工培训计划。按计划组织实施培训工作。13.2.2所有员工上岗前应接受质量管理理论的培训，包括质量管理体系、规章制度、岗位责任等。13.2.3实行定期轮训制。生产和管理人员每年度应进行一次以上的专业技术培训，包括食用菌专业基础理论和实际生产操作技能的培训，以及新工艺、新技术的推广实施。13.2.4母种生产技术骨干及菌种检验人员应具备高级以上专业技术工人资格。原种生产技术骨干应具备中级以上专业技术工人资格。栽培种生产技术骨干应具备初级以上专业技术工人资格。13.2.5具有专业技术资格（含技师）的生产和管理人员应参与继续教育培训，并取得国家菌类园艺工职业资格证书。13.2.6菌菇中心负责人、品质管理部门负责人应接受省级以上食用菌管理部门有关的专业培训，并取得合格证书。13.2.7生产技术骨干、管理人员、检验员以及销售业务员应掌握各品种的主要生物学特性、农艺性状和栽培技术要点。13.2.8新员工必须经上岗前培训才能独立操作。培训内容包括质量管理理论、食用菌专业基础理论和实际生产操作技能。13.2.9要对生产骨干和操作员工进行岗前培训及设备性能、使用、维护的培训，并适时考核。13.2.10员工培训应作详细记录，实施考试的应保存试卷，实施考核的应记录考核结果。培训记录整理归档。13.2.11国家或地方劳动人事部门组织的培训或委托外部机构培训的，应记录培训内容、成绩及专业技术资格晋升情况。13.2.12培训记录应保存到员工退休或离开公司。14、安全控制14.1目的 加强全员安全意识，确保安全生产。14.2管理规范14.2.1安全设施、消防设施、器具齐全、完备，消防通道畅通。14.2.2各项生产设施应符合国家有关安全要求，并经常检查，有安全隐患的应停止使用直至解除隐患。14.2.3专人负责安全管理并有防盗设施。14.3安全措施14.3.1加强员工安全意识教育，教会员工使用消防器材。14.3.2定期进行安全检查。节、假日和休息日应检查安全工作落实情况，并安排人员值班巡视。14.3.3发现险情应及时报警并采取适当应急措施。14.3.4不得于菌场内进行病虫害接种试验。14.3.5从外单位引进菌种应进行病虫害检疫、防止引入危险性病虫害。14.3.6正确使用生产设施，避免人员伤亡和财产损失。重庆品田农业有限公司食用菌菌种生产技术规程1、菌种引进1.1 菌种引进由菌菇中心按公司安排的生产计划提出所需菌种的引种申请，经公司审批同意后在具备母种和原种食用菌菌种生产经营许可证的单位引进菌种；1.2 引进的菌种经验收合格后予以登记（见菌种资源登记表）；1.3菌种验收主要检验菌种的包装、标签、标志、种性、活力、纯度六个方面的内容；1.3.1 包装1.3.1.1母种外包装采用木盒或有足够强度的纸材制作的纸箱，内部用棉花、碎纸、报纸等具有缓冲作用的轻质材料填满；1.3.1.2原种、栽培种外包装采用有足够强度的纸材制作的纸箱，内部用碎纸、报纸等具有缓冲作用的轻质材料填满。纸箱上部和底部用8厘米宽的胶带封口，并用打包袋捆扎两道，箱内附产品合格证书和使用说明（包括菌种种性、培养基配方及适用范围）。1.3.2 标签1.3.2.1 产品标签 每支（瓶、袋）菌种要贴有清晰注明以下要素的标签：产品名称；品种名称；生产单位；接种日起；执行标准。1.3.2.2包装标签 每箱菌种要贴有清晰注明以下要素的包装标签：产品名称、品种名称；厂名、厂址、联系电话；出厂日期；保质期、贮存条件；数量；执行标准。1.3.2.3包装储运图示标志 包装储运图应注明以下图标：小心轻放标志；防水、防潮、防冻标志；防晒、防高温标志；防止倒置标志；防止重压标志。1.3.3母种的质量要求1.3.3.1感官要求1.3.3.1.1容器：完整，无损；1.3.3.1.2棉塞或无棉塑料盖：干燥、结晶，松紧适度，能满足透气和滤菌要求；1.3.3.1.3培养基灌入量：为试管总容积的1/41/5；1.3.3.1.4培养基斜面上端距棉塞的距离：4050毫米；1.3.3.1.5接种块大小：一般要求35毫米35毫米；1.3.3.1.6菌丝生长量：长满试管；1.3.3.1.7菌丝体特征：不同食用菌种类其菌丝体在试管斜面上的特征（菌落特征）不同，描述菌落特征包括颜色、长势、边缘是否整齐等；1.3.3.1.8菌丝体表面：一般要求均匀、舒展、平整、无角变、无拮抗现象；1.3.3.1.9菌丝分泌物：不同食用菌要求不同；1.3.3.1.10杂菌菌落：不论何种食用菌，母种都不可有杂菌菌落；1.3.3.1.11子实体原基：除猴头外，所有母种都不允许有原基。1.3.3.1.12气味：有菌种特有的清香味，无酸、臭、霉等异味。1.3.3.2纯度要求1.3.3.2.1纯培养是菌种质量的基本要求，是必须达到的；1.3.3.2.2不论什么食用菌，其母种都应该是纯培养，不能混有细菌、酵母菌、霉菌、螨虫、线重灯任何其他生物。1.3.3.3活力要求1.3.3.3.1衡量母种活力的方法，主要是从菌种的外观进行判断检查；1.3.3.3.2体现母种活力的指标包括感官要求和菌丝生长速度（即长满试管所需的天数）。1.3.4原种的质量要求1.3.4.1感官要求1.3.4.1.1容器：完整，无损；1.3.4.1.2棉塞或无棉塑料盖：干燥、洁净，松紧适度，能满足透气和滤菌要求。1.3.4.1.3培养基上表面距瓶口的距离：505毫米；1.3.4.1.4接种量（每支母种接原种书，接种物大小）：12毫米15毫米；1.3.4.1.5菌丝生长量：长满容器。1.3.4.1.6菌丝体特征：表现出品种的菌丝体颜色、长势、菌丝前沿的特征。1.3.4.1.7表面菌丝体：生长均匀，无角变，无高温抑制线；1.3.4.1.8菌丝分泌物：允许有少量无色或棕黄色水珠；1.3.4.1.9杂菌菌落：无；1.3.4.1.10拮抗现象：无；1.3.4.1.11子实体原基：无或少量原基；1.3.4.1.12气味：特有的清香味，无酸、臭、霉等异味。1.3.4.2纯度要求（同母种）1.3.4.3活力要求1.3.4.3.1衡量原种活力的方法，主要是从菌种的外观和长满瓶（袋）所需的天数进行判断检查；1.3.4.3.2外观判断的内容有：菌丝形态、萌发快慢、萌发菌丝的稀密、生长的整齐程度、菌丝的丰满程度、发菌程度、分泌物、色素、脱壁的有无、菌皮的有无及薄厚等；1.3.4.3.3菌丝稀疏、分泌物（黄水）多、菌丝自溶、原基大量形成、菌皮厚、培养料与瓶壁明显分离等现象都是低活力菌种的表现。1.3.5栽培种的质量要求1.3.5.1感官要求1.3.5.1.1容器：凡用于生产原种的容器，在栽培种生产中都可以使用，另外，也可选用17厘米35厘米耐126高温符合GB9688卫生规定的聚丙烯塑料袋。各类容器都要使用棉塞，棉塞要使用梳棉，不可使用脱脂棉；也可用能满足滤菌和透气要求的无棉塑料盖代替棉塞。1.3.5.1.2感官要求 与原种基本相同，只是有的种类原基的有无和量稍有改变。1.3.5.1.3纯度和活力要求 与原种完全相同1.4引进的菌种应在3天内进行复壮、提纯、扩繁和保存；2、菌种的生产2.1菌种的生产流程（见下图）2.2母种的制作2.2.1培养基的制备2.2.1.1 母种培养基主要用于菌种分离、扩大、保藏。一般用试管作为容器，所以称为试管斜面培养基。 2.2.1.2培养基的配制母种培养基制备灭菌接种（或分离）培养筛选出菇试验母种转管扩接保存接种灭菌原种培养基制备培养原种接种灭菌栽培种培养基制备培养栽培种菌种生产的工艺流程2.2.1.2.1通用培养基2.2.1.2.1.1马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA培养基） 马铃薯（去皮）200克，葡萄糖20克，琼脂20克，水1000毫升，pH自然。2.2.1.2.1.2综合马铃薯葡萄糖琼脂培养基（CPDA培养基） 马铃薯（去皮）200克，葡萄糖20克，磷酸二氢钾2克，硫酸镁0.5克，琼脂20克，水1000毫升，pH自然。2.2.1.2.1.3马铃薯麦麸综合培养基 马铃薯（去皮）200克，麦麸100克，葡萄糖20克，磷酸二氢钾2克，硫酸镁0.5克，琼脂20克，水1000毫升，pH自然。2.2.1.2.1.4马铃薯蛋白胨综合培养基 马铃薯（去皮）200克，蛋白胨24克，葡萄糖20克，磷酸二氢钾2克，硫酸镁0.5克，琼脂20克，水1000毫升，pH自然。2.2.1.2.1.5马铃薯酵母粉综合培养基 马铃薯（去皮）200克，酵母粉46克，葡萄糖20克，磷酸二氢钾2克，硫酸镁0.5克，琼脂20克，水1000毫升，pH自然。2.2.1.2.2材料选择 有些材料如葡萄糖、磷酸二氢钾其成分和浓度相对稳定，有些天然有机物质如马铃薯、麦麸随不同季节、存放时间、质量优劣其成分有很大差异，影响食用菌菌丝萌发和生长，甚至还可能抑制菌丝生长。因此，使用这些材料时，要新鲜洁净，霉变、虫蛀的材料不可使用，发芽、变青的马铃薯不可使用。2.2.1.2.3准确称量 各种食用菌菌丝生长都要求适宜的养分浓度，并非养分越多越好，因此，配方中各种成分要准确称量。2.2.1.2.4材料处理2.2.1.2.4.1植物性有机物质 马铃薯、米糠、棉籽壳、麦麸、木屑、堆肥、稻草等均需先用清水煮沸30分钟浸提，取其滤液备用；2.2.1.2.4.2 生物制剂 酵母粉、蛋白胨等生物制剂使用前用温水融化，然后加入，不需要加热煮沸；2.2.1.2.4.3 化学试剂 化学试剂类营养物质（选用化学纯级试剂），如葡萄糖、麦芽糖、硫酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁等，均在配制的最后一步加入，加入时不断搅拌使其快速溶化，也不需要加热煮沸。2.2.1.2.5 制作方法（以马铃薯酵母粉综合培养基为例）2.2.1.2.5.1 材料准备 选取没有发芽、变青的马铃薯，洗净去皮，称取200克，切成1厘米左右见方的小块。同时准确称取好其它材料。酵母粉用少量温水溶化；2.2.1.2.5.2 热浸提 将切好的马铃薯小块放入1200毫升左右水中，煮沸后用文火保持30分钟；2.2.1.2.5.3 过滤 煮沸30分钟后用4层纱布过滤；2.2.1.2.5.4 琼脂融化 若使用琼脂粉事先溶于少量温水种，然后倒入培养基浸出液中融化。若使用琼脂条可先剪成2厘米长的小段，用清水漂洗2次以除去杂质。煮琼脂时要多搅拌，直至完全融化；2.2.1.2.5.5 定容 琼脂完全融化后，将各种材料全部加进液体种，不足时加水定容至1000毫升，搅拌均匀；2.2.1.2.5.6 调节pH值 定容后，用pH试纸测定培养基的pH，pH偏高，可用柠檬酸或醋酸降低；pH偏低，用氢氧化钠、碳酸钠或石灰调高。2.2.1.2.5.7 分装 选用洁净、完整、无损的玻璃试管。调节好pH后就可以进行分装。食用菌常用的玻璃试管是18毫米180毫米和20毫米200毫米两种规格。分装时，试管垂直桌面，注意不要使培养基残留在近试管口的壁上，以免日后污染。一般培养基装量为试管长度的1/51/4。分装完毕后，塞上棉塞。棉塞选用干净的梳棉制作，不能使用脱脂棉。棉塞长度为33.5厘米，塞入试管内1.52厘米，外露部分1.5厘米左右，松紧适度，以收体外露部分棉塞试管不脱落为度。然后7支捆成一捆，用双层牛皮纸将试管口一端包好扎紧。2.2.1.2.5.8灭菌 灭菌是试管培养机制备的重要环节。灭菌彻底与否，关系培养基制备成功和失败。灭菌前，先检查锅内水分是否足量，如水分不足，要先加足水分，然后将分装包扎好后的试管直立放入灭菌锅套桶内，盖上锅盖，拧紧螺丝，关闭放气阀门，开始加热。当压力表指针达到0.05兆帕时，维持在此压力30分钟后关闭热源。当压力表降至0后，打开放气阀门，排出锅内气体，慢慢打开锅盖。2.2.1.2.5.9摆放斜面 打开锅盖后，如果立即摆放斜面，由于温差过大，试管内易产生过多的冷凝水。所以，为防止试管内形成过多的冷凝水，不宜立即摆放斜面。一般情况下，高温季节打开锅盖后自然降温3040分钟，低温季节自然降温20分钟后再摆放斜面。斜面的长度以斜面顶端距棉塞4050毫米为标准。斜面摆好后，在培养基凝固之前，不能再行摆放。2.2.1.2.5.10灭菌效果检查 从制成的试管斜面种，随意抽取20支置于培养箱内，28恒温培养48小时，检查灭菌效果。培养后培养基上无微生物发生，表明灭菌成功，即可使用。没有用完的试管斜面用纸包好，保存在清洁干燥处，以后随时可用。2.2.2接种2.2.2.1接种室和接种箱的消毒处理 在使用前一天，用药物熏蒸消毒处理接种室。熏蒸药物一般选择甲醛+高锰酸钾和气雾消毒剂。甲醛和高锰酸钾的用量为每立方米78毫升甲醛加5克高锰酸钾。使用前，先将门窗关闭，然后将适量的高锰酸钾放在大烧杯和盆内，操作人员戴上口罩倒入相应量的甲醛，快速出室关门。熏蒸12小时后使用和甲醛等量的氨水中和空气中的甲醛后，在进行接种，其使用时间要在35小时进行。气雾消毒剂的使用方法要严格参照使用说明书。2.2.2.2接种室和接种箱的使用规程2.2.2.2.1接种室地面要定期清洁，清洁时必须用拖布拖，不能用扫帚清扫，以防扬尘。2.2.2.2.2消毒前要将需要接种的物品如试管斜面、接种用具等一并放入接种室或接种箱。2.2.2.2.3接种室即使长期不用，也要定期进行消毒处理，以保证接种室的高度无菌状态。2.2.2.2.4接种人员接种前先用肥皂清洗双手和手腕部位，在缓冲室更衣，进入接种室后再用75%酒精棉球擦拭双手和操作台面。2.2.2.2.5接种过程中，无关人员不可随便进出，以免影响接种成功率。2.2.2.2.6接种后要对台面及时清洁。连续使用，则清洁后要重新消毒处理。2.2.2.3接种方法 接种室或接种箱消毒处理后，即可进行接种。接种方法是：左手托母种试管和另一支待接种的试管斜面，菌种在外，试管斜面在内，右手持接种钩，接种钩首先在酒精中浸蘸一下，然后在火焰上方灼烧片刻。在酒精灯火焰上方拔下试管斜面棉塞，夹于右手指间，接种钩冷却后进入母种试管切取35毫米35毫米大小的一块母种，迅速转移至待接试管斜面中央位置，在火焰上方同时塞好母种和新接种试管的棉塞。如此反复，一支试管母种可转接扩繁3040支试管。接种时如果母种斜面上方较干，要去掉干皮，母种原接种块周围的菌丝也较老，要去掉，只切取菌丝旺盛、粗壮、浓密的部位的菌种。2.2.2.4接种操作注意事项2.2.2.4.1酒精灯火焰高度 酒精灯火焰要足够高。如果酒精灯火焰不够高时，火焰周围的无菌范围相对缩小，不利于无菌操作，也容易造成接种钩灼烧灭菌不彻底，影响接种的成功率。影响酒精灯火焰大小的因素一是酒精浓度，二是灯芯的材料和高度，酒精浓度越高燃烧越好，最好使用95%的工业酒精。灯芯材料太实，塞得又紧时，内吸的酒精少，火力也不旺。所以，灯芯最好使用棉花捻制，并拔出一定的长度。2.2.2.4.2母种试管表面和管口灭菌 作为接种物的母种试管并未在无菌条件下保存，所以，试管表面或多或少存在微生物。因此，接种时要注意试管口和试管表面的灭菌。具体方法是：试管母种使用前，在接种室或接种箱内先用75%酒精擦拭试管表面，拔下棉塞后，将试管口在酒精灯火焰上转动23圈，这样可以有效烧丝试管口存又的微生物，减少造成的污染。2.2.2.4.3接种操作要在火焰上方无菌区域进行 拔塞、取种、接种及塞棉塞这些操作必须在火焰上方无菌区域进行。试管母种和待接种的试管一旦打开棉塞，就不能离开火焰上方无菌区域。2.2.2.4.4接种钩灭菌 接种钩是直接接触菌种的工具,其灭菌是否彻底关系到接种的成败。接种钩灼烧时要烧至材料变红，并注意灼烧的长度以试管长度为度，在火焰上方反复灼烧34次即可。2.2.2.4.5接种钩冷却 接种钩灼烧后要冷却才能使用，不经冷却的接种钩由于温度过高会烫死菌种。冷却一般在无菌的待接试管的上部空间进行，也可在斜面上端冷却。2.2.2.4.6棉塞使用 棉塞在接种时要夹于右手指间，不可方在操作台上。一旦掉在台面上，要先在火焰上过一遍火在塞上。如果掉在地上绝对不能再使用。在无菌室内准备一些备用棉塞（密封后保存），一旦棉塞受潮或掉到地上，可以更换备用棉塞。2.2.2.4.7酒精和酒精灯 消毒用的酒精要定期更换，并保持清洁，否则，极已成为菌种的污染源。酒精灯使用前要检查酒精灯内酒精是否足够用和酒精灯芯，一旦酒精量不足，要及时添加，灯芯不够长度，要及时拔出一些。2.2.2.4.8操作要到位 操作过程中要注意动作轻盈、敏捷、快速、准确，尽可能地减少动作过大和声音。2.2.2.4.9接种后处理 接种后及时清理垃圾，打开门窗，排除接种时酒精燃烧放出的废气。之后，关闭门窗，打开紫外灯进行消毒，以便以后使用。2.2.3培养和检查2.2.3.1将接上菌种的试管，7支为一捆，用报纸或牛皮纸包扎好后置于恒温箱内培养，温度比菌丝生长的适宜温度低12。2.2.3.2培养期间空气相对湿度低于75%，培养环境要避光、通风，避免高温高湿。2.2.3.3培养期间每天都要进行检查，发现不良个体，要及时剔除。试管母种的感官检测主要包括四个方面：2.2.3.3.1有无污染；2.2.3.3.2菌种外观，包括菌丝生长量（是否长满整个斜面）、菌丝体特征（肉眼观察菌丝体的颜色、密集程度、菌丝体是否舒展、旺健及其形态）、菌丝体表面（肉眼观察菌丝体是否生长均匀、平展、有无角变现象）、菌丝分泌物（有无分泌物，如有其颜色和数量）、菌落边缘（边缘生长是否整齐）等。2.2.3.3.3斜面背面观，包括培养基是否干缩，颜色是否均匀、有无暗斑和明显的色素。2.2.3.3.4气味，是否具有特有的香味，有无异味。2.2.4试管母种特征2.2.4.1优良特征2.2.4.1.1菌丝生长整齐 同一品种，同一来源的母种，经接种扩繁后，不论扩繁量有多大，只要营养和培养条件相同，试管与试管支件，菌丝的生长外观没有明显的差异。生长外观包括长速、色泽、菌落的厚薄