正负离子表面活性剂混合体系双水相性质的测定.doc

正负离子表面活性剂混合体系双水相性质的测定应化101班 梁晓摘 要：通过对一定浓度双水相(Two aqueous phase)吸光度的测定, 研究了SDS/ CTAB/ H2O/ Na2SO4混合系统双水相对罗丹明B的萃取(Extraction)作用。结果表明: 溶液配的配比是能否出现双水相的关键所在，温度(Temperature)对混合体系双水相的稳定性有重要影响。关键词：SDS CTAB 双水相(Two aqueous phase) 吸光度(Absorbance) 罗丹明B（Rohdamine） 萃取(Extraction)前言：正负离子表面活性剂混合系统的水溶液在适当条件下能够形成两个互不相溶的水相系统,这种系统称为表面活性剂双水相系统(ATPS) 。近几年双水相系统在理论领域和应用领域中被极大地关注。由于表面活性剂溶液中的胶束结构在不同的条件下组装形式不同, 这使得表面活性剂双水相系统对物质萃取的选择性具有可调节性。利用该系统萃取生物大分子物质如牛血清蛋白(Bovine serum albumin)、胰蛋白酶(Trypsin)等的研究已有报道。正负离子表面活性剂双水相体系是最近几年才被重视并研究的分相体系。本实验通过研究十二烷基硫酸钠( SDS )/十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)/水混合体系在盐存在时的相行为、双水相分相时间以及双水相对大分子物质罗丹明B的萃取作用, 揭示影响物质在正负离子表面活性剂双水相中分配系数的主要因素,进而讨论影响正负离子表面活性剂双水相萃取作用的主要因素。1 实验部分1.1 仪器与试剂电子天平；磁力加热搅拌器；721型分光光度计；厚度规格0.5cm、1.0cm比色皿若干；干燥器；恒温水浴箱；塑料保鲜膜；剪刀；橡皮筋12个；圆柱形玻璃小瓶12个；玻璃棒4根；长吸管一支；注射器2支；100ml烧杯14个；250ml烧杯2个；100ml容量瓶2个；500ml容量瓶1个；5ml移液管2支；10ml移液管2支；刻度尺1把；洗耳球1个。SDS（分析纯，99%）；CTAB（分析纯，99%）；Na2SO4（分析纯，99%）；10- mol/L罗丹明B；蒸馏水。1.2 实验方法1.2.1 仪器准备将12个100ml小烧杯、2支注射器、比色皿洗涤干净后，放入干燥箱中干燥，备用。1.2.2 溶液配制1.2.2.1用电子天平准确称取14.243gNa2SO4固体，于100ml烧杯中加入一定量蒸馏水溶解，将磁子放入，放在磁力加热搅拌器上加热搅拌，使其充分溶解后转移至500mL容量瓶中，加蒸馏水定容、摇匀，得到0.2mol/l的Na2SO4溶液。 1.2.2.2 准确称取5.768gSDS粉末，取配好的0.2mol/l的Na2SO4溶液40-50ml倒入100ml烧杯中，并将烧杯置于磁力加热搅拌器上加热搅拌。缓慢加入SDS，使其溶解。全部溶解后转移至100mL容量瓶中，并将容量瓶置于45 恒温水浴中定容，恒温一段时间等泡沫消失得0.2mol/l的SDS溶液。继续恒温备用。1.2.2.3 准确称取7.290gCTAB粉末，按步骤2配制溶液。1.2.3 配制双水相。1.2.3.1SDS和CTAB均恒温满15min后，用移液管移取2.1mLSDS和7.9mLCTAB于100mL小烧杯中，再滴加5滴罗丹明B。用玻璃棒快速搅匀，立即倒入圆柱形小瓶中，用塑料保鲜膜及橡皮筋封口，记录样品现象。1.2.3.2迅速将圆柱形小瓶放入恒温箱中恒温2h。1.2.3.3按照步骤1、2依下表比例移取溶液，配制其他11组混合液。并放入40恒温箱中恒温。表1 SDS/CTAB体积比例表序号123456789101112SDS体积/ml2.12.22.32.42.52.67.07.17.27.37.47.5CTAB体积/ml7.97.87.77.67.57.43.02.92.82.72.62.51.2.3.4观察双水相形成过程，2h后双水相达到平衡，记录下各个小瓶样品现象。1.2.4 测定吸光度1.2.4.1取出1个出现双水相的圆柱形小瓶，用直尺测量上下相高度，记作 h1、h2，然后放入恒温水浴中恒温。1.2.4.2调节分光光度计。打开仪器开关，预热20min。将灵敏度调至1档，波长为553nm，将暗箱盖打开，调节透光率为0。将盛有Na2SO4的比色皿放入暗箱，盖上箱盖，调节透光率为100。再打开箱盖调0，再盖上箱盖调100。反复调节。1.2.4.3用注射器吸取上相溶液，若溶液颜色很浅，直接放入0.5cm比色皿中，测其吸光度；若溶液颜色深，较粘稠，则先称量100mL小烧杯中质量，去皮。再将溶液放入，记下质量m1。加一定量蒸馏水稀释，再记下质量m2。将稀释后溶液倒入比色皿中，测其吸光度 A1。吸光度在0.1-0.4之间即可，若吸光度大于0.4，继续稀释至吸光度在0.1-0.4范围内，记录吸光度值 ，并计算其稀释倍数n1 。1.2.4.4按步骤3测下相吸光度A2及稀释倍数 n2并记录。1.2.4.5将所有出现双水相的体系按照步骤3、4用同一分光光度计测出并记录它们的吸光度及稀释倍数。1.2.4.6关闭电源，整理仪器。1.3 实验现象表2 恒温前后实验现象记录表序号恒温前现象恒温后现象1粉红色混浊粉红色澄清2粉红色混浊粉红色澄清3粉红色混浊粉红色澄清4粉红色悬浊液出现双水相，上层粉红色乳状物，下层白色透明5粉红色悬浊液出现双水相，上层粉红色乳状物，下层白色透明6粉红色悬浊液出现双水相，上层粉红色乳状物，下层白色透明7粉红色膏状不透明同实验前无明显变化8粉红色膏状不透明同实验前无明显变化9粉红色膏状不透明同实验前无明显变化10粉红色膏状不透明同实验前无明显变化11粉红色膏状不透明同实验前无明显变化12粉红色膏状不透明同实验前无明显变化1.4实验数据记录与处理根据A=kbc，其中k为吸光系数，单位L/(gcm),b为液层厚度（通常为比色皿的厚度），单位cm ， c为溶液浓度，单位mol/l求的分配系数DD=Ca/Cb=(n1C1)/(n2C2)=(n1A1)/(n2A2)E=(CaV1)/(CaV1+CbV2)*100%=(n1A1V1)/(n1A1V1+n2A2V2)*100% =(n1A1h1)/(n1A1h1+n2A2h2)*100%编号456V(SDS)/V(CTAB)2.4:7.62.5:7.52.6:7.4有色相高度/cm4.14.13.2无色相高度/cm1.01.32.1取有色相高度最小的测量吸光度，即6号小圆柱瓶。数据记录如下：序号有色相高度/cm无色相高度/cm有色相质量/gNa2SO4溶液质量/g稀释倍数n1有色相吸光度A1无色相吸光度A263.22.10.22945.929325.8470.1820.349数据处理表：序号分配系数D萃取效率E613.47900.95352 实验结果分析及讨论2.1 实验结果在编号1-12的圆柱形小瓶之中，只有CTAB过量的阳离子双水相区中的4、5、6号小瓶内出现双水相，且6号瓶最明显。阴离子双水相区并没有出现双水相现象。测定吸光度时温度不同，测得通体样品的吸光度也不同。经过对分配系数与萃取绿的计算发现，萃取率与分配系数成正比，分配系数越大，萃取率越高。另外，在实验过程中，将混合体系从干燥箱中取出后不久，体系中出现白色乳状物，放回干燥箱后，体系又回复原有的透明均相状态。推之，温度对混合体系的稳定性有重要影响。2.2理论分析图1为SDS/CTAB/H2O 系统含 Na2SO4时的拟三元相图。在相图中存在两个ATPS区，根据各区表面活性剂配比的差异，分别 称为阴离子双水相区(ATPSa)与阳离子双水相区(ATPSc)。对于ATPSa区，由于阴离子表面活性剂SDS过量， 混合表面活性剂带负电；对于ATPSc 区，阳离子表面活性剂CTAB过量，混合表面活性剂带正电。由于两个ATPS区的双水相组成及微观结构的差异，它们的萃取分离行为是不同的。根据右图罗丹明B的结构式，分子中有亲水基与疏水基。靠疏水基与表面活性剂有序组合体的疏水区的亲和作用，罗丹明B易于被萃取到ATPS的富表面活性剂相中，所以ATPSa 区与ATPSc区双水相对罗丹明B均具有萃取作用。对于SDS/CTAB/H2O/Na2SO4的双水相系统，其pH 在中性范围，罗丹明B在ATPS 中以两性离子形式存在。但由于N上的正电荷受两个基团的屏蔽作用，正电作用减弱，相对地羧基上的负电荷作用增强， 整个罗丹明B 离子表现为带负电，它更易于同阳离子双水相区带正电 的有序组合体结合，所以罗丹明B 在阳离子双水相中的分配系数远远高于在阴离子双水相中分配系数。在阴离子双水相中， 带负电的罗丹明B与带负电的有序组合体间有静电排斥作用，但由于罗丹明B的净负电性很弱，所以这种排斥作用不足以完全克服两者疏水基间的亲和作用，不能使罗丹明B从富表面活性剂相上完全挣脱出来，而只是部分地降低两者之间的结合程度，所以ATPSa 区对罗丹明B仍具有一定的萃取作用，但较ATPSc区较弱。3.结论3.1温度对混合体系的稳定性有重要影响；溶液配制和移取是造成本次实验失败的主要原因。3.2物质带负电，其在阳离子表面活性剂混合双水相体系中的分配系数就大。该结果验证了阴离子双水相系统富表面活性剂相有序组合体带负电;阳离子双水相系统富表面活性剂相有序组合体带正电。3.3萃取率与分配系数成正比，分配系数越大，萃取率越高。参考文献 1 Zhao G X, Xiao J X. Aqueous two-ph as e system of the aqueous mixtures of cat ionic-anionic surf act ants J . C olloid Interf Sci, 1996, 177: 5135172 滕弘霓, 陈莉, 刘洪来, 等. 正负离子表面活性剂双水相性质及微观结构的研究 J . 化学学报, 2001, 59( 3) : 383387 3 Kaler E W, Hurringt on K L, Murthy A K, etal . Phase behavior an d structures of mixtures of anionic and catonic surfact an ts J . J Phys Chem, 1992, 96: 66984 Tong A J , Wu Y, T an S D, et al . Aqueous tw o-phase syst em of cat ionic an d an ionic surfact ant mixture and its application to the extract ion of p orphyrins and metal loporphyrin s J .Anal C himica Act a, 1998, 369: 11165 童爱军, 王珊, 周晓芬, 等. 阴阳离子性表面活性剂双水相萃取色氨酸衍生物和牛血清蛋白 J . 分析化学, 1998, 26 ( 5) : 535537 6 高莹, 郑用熙. 表面活性剂的性质及其应用 J . 化学学报, 1996, 54: 5045107 曾云朋, 张华山, 陈震华. 现代化学试剂手册( 第四分册) M .北京