第十二单元　第40讲　微生物的培养与利用.doc

课时规范训练（40）1高温淀粉酶在大规模工业生产中是极为重要的酶制剂。研究者从热泉中筛选出了能高效产生高温淀粉酶的嗜热菌。其筛选过程如图所示。(1)进行过程的目的是_嗜热菌培养液；过程所使用的接种方法是_法。(2)从用途上来说，号培养基属于_培养基；配制时仅以_作为唯一碳源；从物理状态上来说，号培养基属于固体培养基，配制时应加入_作为凝固剂。(3)、号培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是_。(4)培养一段时间后，应从号培养基上挑出_的菌落，接种到号培养基上。解析：(1)分析题图可知，过程是梯度稀释；过程是用稀释涂布平板法进行接种。(2)本题实验的目的是筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，从用途上来说，号培养基属于选择培养基；本培养基以淀粉为唯一碳源；从物理状态上来说，号培养基属于固体培养基，配制时应加入琼脂作为凝固剂。(3)培养基配制和灭菌时应先调节pH，然后再进行灭菌；如果先灭菌再调节pH，容易污染培养基。(4)能分解淀粉的嗜热菌在号培养基上生长时可释放淀粉酶，分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈，透明圈越大，淀粉酶的活性越强，所以要从中挑出透明圈大的菌落，接种到号培养基上。答案：(1)稀释稀释涂布平板(2)选择淀粉琼脂(3)先调节pH，后灭菌(4)透明圈大2微生物强化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油黏度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。以下是人们筛选、纯化和扩大培养该类微生物的实验操作。请回答下列问题：(1)土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自_的土壤。(2)为筛选和纯化该类微生物，从功能上分，应选用_培养基。常用的接种方法是_和_。(3)接种后，应密封培养的原因是_，培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取_就可获得高效菌株。(4)扩大培养过程中需要对微生物进行计数。取0.2 mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计三个平板，菌落数分别是200、180、220。则样品中微生物的数量为_个/mL。该统计结果_(填“低于”或“高于”)实际值。解析：(1)在长期被石油污染的土壤中生存下来的微生物，能降解石油，所以取样时，应从含石油多的土壤中采集。(2)从功能上分，应选用特定的选择培养基进行筛选和纯化该类微生物；常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。(3)该类微生物是厌氧微生物，接种后密封培养；培养一段时间后在培养基上可形成降油圈，降油圈越大，说明该处的微生物降解石油的能力越强，所以应选择降油圈大的菌落进行培养以获得高效菌株。(4)计算微生物的数量应取三个平板的平均值，即(200180220)0.21 000(个/mL)，该结果会低于实际值，因为当两个或多个菌落连在一起时，平板上观察到的只是单个菌落数。答案：(1)长期被石油污染(含石油多的)(2)选择平板划线法稀释涂布平板法(3)该类微生物是厌氧型的降油圈大的菌落(4)1 000低于3某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉为细菌培养提供了碳源和氮源。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是_和_。(2)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于_中培养，培养的温度设定在37 。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种_ 作为对照实验。(3)培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的_，这说明湖水样品中有多种细菌。一般来说，菌落数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_(填“高”或“低”)。(4)某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是_，应当怎样操作？_。解析：(1)蛋白胨富含蛋白质，主要为微生物提供氮源；淀粉主要为微生物提供碳源，培养基中还应含有水和无机盐。(2)微生物的培养在恒温培养箱中进行。要使该实验所得结果可靠，还应设置对照实验，即同时在另一平板上接种无菌水作为对照实验，以判断培养基制作是否合格。(3)培养20小时后，不同微生物在平板培养基上会形成形态和颜色不同的菌落。菌落总数越多，说明湖水中的微生物数量越多，即湖水遭受细菌污染的程度越高。(4)培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液浓度过高或培养过程被杂菌污染，可以通过增大稀释倍数或严格无菌操作解决。答案：(1)无机盐水(2)恒温培养箱无菌水(3)菌落高(4)菌液浓度过高(或培养过程中被杂菌污染)增大稀释倍数(或严格无菌操作，原因与操作要对应)4分解尿素的微生物广泛存在于农田等土壤中，某生物实验小组尝试对分解尿素的微生物进行分离与计数。请回答下列问题：(1)分解尿素的微生物含有的酶是_；配制培养基时应以_作为唯一氮源。(2)培养基中添加_作为指示剂，培养后，培养基pH会_(填“升高”或“降低”)，可使指示剂变红色。(3)对尿素溶液进行灭菌的最适方法是_。(4)该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，这样做的目的是_；然后将1 mL样液稀释10 000倍，在3个平板上用涂布法分别涂布0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板的菌落数分别为39、42和45。据此可得出每毫升样液中分解尿素的微生物活菌数为_个。解析：(1)分解尿素的微生物含有的酶是脲酶；配制培养基时应以尿素作为唯一氮源。(2)在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶分解尿素可产生氨，氨会使培养基的pH升高，进而使酚红指示剂变红。(3)对尿素溶液进行灭菌的最适方法是过滤法。(4)在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，其目的是检测培养基平板灭菌是否合格。每毫升样液中分解尿素的微生物活菌数(CV)M(394245)30.110 0004.2106(个)。答案：(1)脲酶尿素(2)酚红升高(3)过滤法(4)检测培养基平板灭菌是否合格4.21065在调查和分离湖水中耐盐细菌的实验中，先将10升湖水水样浓缩至10毫升，然后各取浓缩水样1毫升，涂布到多个培养皿中培养。请回答：(1)可以通过提高培养基中_的浓度，筛选被调查细菌，这种培养基被称为_培养基。(2)要提高实验结果的可靠性，排除培养基未彻底灭菌的可能性，应该设置的对照组是_。为检验(1)中筛选方法的效果，可以设置的对照组是_。(3)在微生物的培养过程中，实验室对培养基灭菌常用的方法是_。为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿_培养。在培养基上产生的单个菌落在生态学中可以被称为_。解析：(1)筛选耐盐细菌，需在培养基中添加高浓度的NaCl，这种人为提供有利于目的菌株生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基被称为选择培养基。(2)要提高实验结果的可靠性，排除培养基未彻底灭菌的可能性，应该设置未接种的培养基作为对照组，若对照组产生菌落，则培养基未彻底灭菌，反之，灭菌合格。为检验(1)中筛选方法的效果，可以设置未加高浓度盐的培养基作为对照组，若对照组上菌落比