中图版选修一 微生物的分离与纯培养 作业 (3).docx

微生物的分离与纯培养一、单选题1下列对发酵过程中灭菌的理解不正确的是（ ）a、防止杂菌污染b、消灭杂菌c、培养基和发酵设备都必须灭菌d、灭菌必须在接种前【答案】b【解析】本题考查灭菌的相关知识。灭菌的目的是防止杂菌污染；灭菌时，要将所有微生物全部消灭；培养基和发酵设备都必须灭菌；灭菌必须在接种前，否则会杀死菌种。故选b2下列关于实验方法或原理的叙述正确的是a实验操作过程中漂洗的目的均为洗掉浮色便于观察b可用洋葱鳞片叶为实验材料提取胡萝卜素和叶黄素c各种实验中均需要设置空白对照组，确保单一变量d生长在麦麸上的黑曲霉或生长在木屑上的木霉均可分解纤维素【答案】d【解析】有丝分裂试验中漂洗的目的是洗去解离液，便于染色，a错误；洋葱鳞片叶中无胡萝卜素和叶黄素，b错误；有单一变量才能起到对照的作用,但不一定是空白的,必须是单一的变量，c错误；麦麸中含有大量纤维素，生长在麦麸上的黑曲霉，能以麦麸中的纤维素为碳源，因此可以产生纤维素酶，d正确。【考点定位】教材实验3抗生素可由微生物产生，具有抑菌作用，能在琼脂培养基中扩散。在筛选产生抗生素的菌种时，先在琼脂培养基平板上划线接种一种从土壤中获得的甲菌，在27 下培养3天，形成菌落。然后接种乙、丙、丁三种致病菌(图a)，继续在同样条件下培养3天，结果如下图b。分析结果，得出的结论是()甲菌产生了抗生素丁菌的生长被丙菌产生的抗生素抑制乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制丙菌产生的抗生素抑制了乙菌的生长a. b. c. d. 【答案】a【解析】由图可得出，乙、丙、丁三种致病菌不会产生抗生素，否则靠近乙、丙、丁的甲菌落不能生长。从图b来看，乙菌的生长被抑制，最可能的原因是甲菌产生了抗生素，此种抗生素只能抑制乙菌的生长，而对丙、丁两种致病菌没有影响。a项正确。【点睛】甲菌落下的乙菌落缺失一段，说明甲菌落产生了抗生素，对乙菌落的生长产生抑制，但对丙、丁无影响。4巴氏消毒法常用于酒、奶等食品的消毒，该消毒法就是加热到7075、保持30 min，或加热到80、保持15 min，能杀死一般杂菌和病原菌。与灭菌的要求相比，巴氏消毒法()a. 不能杀灭芽孢等耐高温的细菌b. 能杀灭芽孢等休眠状态的细菌c. 能杀灭各种细菌，包括芽孢d. 能杀灭各种真菌，包括孢子【答案】a【解析】由于酒、奶等食品中的某些成分在高温下易被破坏，不宜采取高温灭菌法，虽然巴氏消毒法不能杀灭芽孢等耐高温细菌，但由于奶、酒等的污染并不严重，巴氏消毒法还是能达到消毒要求的。综上分析，本题正确答案选a。5鉴别培养基是根据微生物的代谢特点在培养基中加入一些物质配制而成的，这些物质是（）a. 指示剂或化学药品 b. 青霉素或琼脂c. 高浓度食盐 d. 维生素或指示剂【答案】a【解析】鉴别培养基的原理是：在培养基中加入某种试剂或化学物质，依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征，从而鉴别不同种类的微生物，故a正确。6关于细菌分离、培养的叙述中，正确的是a不同种类细菌的生长均需要相同碳源b常用液体培养基分离获得细菌单菌落c用含尿素的培养基可选择分离出能分解利用尿素的细菌d含有机磷农药的培养基可分离出降解有机磷农药的细菌【答案】d【解析】试题分析：不同种类细菌的生长需要不同碳源，a错；常用固体或半固体培养基分离获得细菌单菌落，b错；用只含尿素作为氮源的培养基可选择分离出能分解利用尿素的细菌，c错；含有机磷农药的培养基可分离出降解有机磷农药的细菌，d正确。考点：本题考查微生物培养，意在考查考生能理解所学知识的要点。7下列关于遗传与变异的叙述，正确的是( )a体细胞发生的基因突变是可遗传的变异 b用杂交育种的方法可选育出黄色短杆菌的赖氨酸高产菌株c细胞工程和基因工程技术依据的遗传学原理是基因重组d改良缺乏某种抗病性的水稻品种宜采用单倍体育种方法【答案】a【解析】88在涂布平板操作中，平板冷凝后，要将平板倒置，其原因是a. 方便接种时再拿起来b. 方便在皿底部标记日期等c. 正着放置容易使玻璃皿破碎d. 使培养基表面的水分挥发以防污染【答案】d【解析】试题分析：在涂布平板操作中，平板冷凝后，要将平板倒置，其原因是使培养基表面的水分更好地挥发，防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染故选：d9存在于盐湖和热泉中的两类细菌都具有的特征是a在极端环境下进行遗传物质的复制b遗传物质是nac在极端环境下都不进行分裂生殖d都没有细胞壁【答案】a【解析】10下列说法不正确的是（ ）a科学家从7080热泉中分离得到耐高温的taqdna聚合酶b制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌c用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是接种了的牛肉膏蛋白胨培养基d同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多【答案】b【解析】热泉7080的高温条件淘汰了绝大多数微生物，而使耐热的taq细菌脱颖而出，其内的dna聚合酶也是耐热的。制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，不能颠倒。对照实验是指除所控因素外其它条件与被对照实验完全对等的实验，判断选择培养基是否起到了选择作用，则接种了的选择培养基是实验组，而接种了的牛肉膏蛋白胨培养基属于对照组。同其他生物环境相比，土壤营养丰富，条件更适宜微生物生长。11下列关于酵母菌和大肠杆菌的叙述，正确的是a在无氧条件下，大肠杆菌能生存，而酵母菌不能生存b酵母菌的遗传物质为dna，而大肠杆菌的遗传物质为rnac酵母菌有多种细胞器，而大肠杆菌只有一种细胞器datp和葡萄糖均能为酵母菌和大肠杆菌的生命活动直接提供能源【答案】c【解析】试题分析：酵母菌为兼性厌氧菌，在在无氧条件下也能生存，a项错误；酵母菌和大肠杆菌的遗传物质均为dna，b项错误；酵母菌为真核生物，组成酵母菌的真核细胞中有多种细胞器，而大肠杆菌是原核生物，组成大肠杆菌的原核细胞中只有核糖体这一种细胞器，c项正确；atp是直接的能源物质，葡萄糖是主要的能源物质，因此atp能为酵母菌和大肠杆菌的生命活动直接提供能源，d项错误。考点：本题考查细胞呼吸、生物的遗传物质、原核细胞和真核细胞的结构、atp和糖类的功能的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。12细菌群体在生长过程出现形态变化甚至畸形是在什么期 a.衰亡期 b.对数期 c.调整期 d.稳定期【答案】a【解析】13无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中错误的是a消毒和灭菌实质上是相同的b外植体消毒的原则是既要杀死材料表面的微生物，又要减少消毒剂对细胞的伤害c为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行d实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触【答案】a【解析】试题分析：消毒是对有生物活性的东西进行的一种杀死微生物的处理方法，如对实验者的双手进行消毒。一般用酒精消毒。灭菌一般是对器皿等没有生物活性的物品进行的消灭所有微生物的处理。如用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌处理。灭菌比消毒更彻底，所以二者实质是不同的，a错误。考点：本题考查消毒、灭菌方面的知识，意在考查学生能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。14下列操作与消毒或灭菌无关的是()a. 接种前用酒精灯火焰灼烧接种环b. 接种前用酒精擦拭双手c. 接种在酒精灯火焰旁完成d. 培养基在冷却到60 时倒平板【答案】d【解析】“接种前用火焰灼烧接种环”属于灭菌，a正确；“接种前用酒精擦拭双手”属于消毒，b正确；因为着酒精灯火焰附近的地方可以被认为是无菌区，所以“接种在酒精灯的火焰旁完成”属于无菌操作技术，c正确；“培养基在50时倒平板”属于培养基的制作，不属于无菌操作技术，d错误。15高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示。下列说法错误的是 a. 过程的目的是稀释b. 过程所使用的接种方法是稀释涂布平板法c. 号、号培养基都属于固体培养基，先灭菌后调节phd. 从号培养基挑出透明圈大的菌落，接种到号培养基上【答案】c【解析】图中过程是稀释嗜热菌培养液的过程，a正确；接种嗜热菌即过程所使用的接种方法是稀释涂布平板法，b正确；分析图示信息可知，号、号培养基都属于固体培养基，培养基配制和灭菌过程中，应注意先调节ph后灭菌，c错误；部分嗜热菌在培养基上生长时可产生淀粉酶，分解培养基中的淀粉后会在菌落周围形成透明圈，透明圈越大，说明产生的淀粉酶越多，因此应挑选透明圈大的菌落接种在号培养基上继续培养，d正确。16下列是对四种微生物的能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的描述，正确的一组是（ ）【答案】c【解析】试题分析：根据题意和图表分析可知：乳酸菌的氮源应该是nh4+；根瘤菌能固氮，但不能自己制造有机物，它的碳源不是co2，其代谢类型是异养需氧型；衣藻能利用光能进行光合作用，但其氮源应该是nh4+；所以abd都不正确，选c。考点：微生物的生长及代谢类型点评：本题难度一般，要求学生识记微生物生长的相关知识，考查学生对微生物生长的能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的理解。17将接种了红色细菌的培养皿置于紫外线下几天，结果培养皿中除长了一个白色菌落外，其余菌落都是红色的，据此，实验者应该（ ）a. 暂不作结论b. 断定是紫外线产生了白色菌落的变异c. 如果不继续用紫外线照射，预期那个白色菌落将转变为红色 d. 断定白色菌落是一种可遗传的变异【答案】a【解析】试题分析：出现白色菌落可能是变异的结果，也可能是杂菌污染的结果，故b、d错；因为变异后遗传物质发生了改变，所以变异一般是可遗传的，不用紫外线照射一般不会变回原来颜色，故c错；正确的做法是暂不作结论 经实验研究后再下结论。故选a考点：本题考查变异和细菌培养的相关知识。点评：本题意在考查考生的理解判断能力，属于中等难度题。18通常用来作为菌种鉴定的重要依据是a. 细菌形态 b. 菌落 c. 细菌大小 d. 细菌结构【答案】b【解析】试题分析：根据不同的菌落的形状、大小和颜色、即凹凸情况不同，通常将菌落的形状、大小、颜色等特征作为鉴定菌种的依据，综上所述，b正确。点睛：了解菌落的相关知识：（1）菌落是指一个细菌或真菌在适宜的培养基上繁殖后形成的肉眼可见的集合体（细菌或真菌集团）。（2）细菌的菌落特征：菌落较小，形状：表面或光滑黏稠，或粗糙干燥，易挑起，多为白色；（3）真菌的菌落特征：菌落较大，比细菌菌落大几倍到几十倍、形状：菌丝细长，菌落疏松，呈绒毛状、蜘蛛网状、棉絮状，无固定大小，多有光泽，不易挑，有时还呈现红色、褐色、绿色、黑色、黄色等颜色（孢子的颜色）。19从土壤中分离获得某种微生物的步骤是（ ）土壤取样梯度稀释选择培养涂布培养筛选菌株a bc d【答案】b【解析】从土壤中分离获得某种微生物，应先从土壤中取样，然后用选择培养基培养，梯度稀释后进行涂布培养，筛选出所需要的菌株。【考点定位】本题主要考查微生物的分离。20下列有关生物学实验的描述中，正确的是a在哺乳动物红细胞制备细胞膜的实验材料制备过程中需用到生理盐水b用健那绿染液染色后观察醋酸菌未见线粒体，质因可能是染色时间过短c平板划线时在笫二区第一条划线未出现菌落,一定是接种环划线时未冷却造成的dt2噬歯体可以作为基因工程实验时的运载体，能寄生在抗虫棉细胞中【答案】a【解析】试题分析：生理盐水保持红细胞的形态，a正确；醋酸菌属于原核生物，没有线粒体结构，b错误；平板划线时在笫二区第一条划线未出现菌落，也可能是没沿上一区划线区域划线，c错误；t2噬歯体属于细菌病毒，只能寄生在细菌中，d错误考点：本题主要考查生物学实验的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。21金黄色葡萄球菌有很强的致病力，常引起骨髓炎等，还可能引起食物中毒，下述实验结束后的做法错误的是（ ）a对接种环进行灼烧处理b带菌培养基须经高压蒸气锅灭菌后才能倒掉c带菌培养基须经加热后才能倒掉d接种后双手须经肥皂洗净，再用75%的酒精棉球擦试【答案】c【解析】试题分析：实验结束后应将金黄色葡萄球菌杀死，以免使人致病，接种环应用灼烧灭菌，培养基要高压蒸汽灭菌后才能倒掉，手须用肥皂洗净，再用75%的酒精棉球擦试。故选c考点：本题考查微生物实验后的相关处理。点评：本题意在考查考生的识记能力，属于容易题。22培养基配制原则不包括：a、目的要明确 b、营养要协调 c、高温高压灭菌 d、ph要适宜【答案】c【解析】23甲、乙、丙是三种微生物，下表、是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在中正常生长繁殖；甲能在中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是粉状硫10 gk2hpo44 gfeso40.5 g蔗糖10 g(nh4)2so40.4 gh2o 100 mlmgso49.25 gcacl20.5 g+-+-+注:“+”表示培养基中加入了这种物质,“-”表示培养基中没有加入这种物质。a. 甲、乙、丙都是异养型微生物b. 甲、乙都是自养型微生物，丙是异养型微生物c. 甲是异养型微生物、乙是固氮微生物、丙是自养型微生物d. 甲是固氮微生物、乙是自养型微生物、丙是异养型微生物【答案】d【解析】根据题意可知，甲能在中正常生长繁殖，而乙和丙都不能，而培养基缺氮，说明甲能够自身固氮，属于固氮微生物；乙能在中正常生长繁殖，而甲和丙都不能，培养基中没有有机碳源，说明乙能够合成有机物，属于自养微生物；而丙不能在培养基，说明不能固氮；又不能在培养基中生长，说明不能合成有机物，只能在培养基中生长，说明属于异养微生物，故d正确。24依据不同的划分标准，培养基的类型不同，作用也不同。下表中划分培养基的依据和培养基的类型及作用，正确的匹配是 （ ）（多选）为了筛选土壤中能够降解某除草剂的细菌（目的菌）。有人做了如下图实验：【答案】ad【解析】试题分析：为了筛选土壤中能够降解某除草剂的细菌，从培养基的用途划分是选择培养基，目的是分离所需菌种，a正确；从培养基的物理形态划分是液体培养基，不能加入琼脂，其目的是分离纯化所需菌种。考点：本题考查培养基的分类和用途的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点。25在含乳糖和少量葡萄糖的某培养基中培养大肠杆菌，测得其生长曲线如图所示。下列叙述正确的是（ ）ab、d均为对数期，此时大肠杆菌的增殖方式为出芽生殖bc时期细胞内正在合成利用乳糖的酶，该调节方式为酶活性的调节c该培养基是恒定容积的液体培养基d如果在只含乳糖的培养基中培养大肠杆菌，为缩短调整期，最好以b时期的大肠杆菌为菌种【答案】c【解析】本题以教材中微生物培养的相关知识为背景，考查考生的识记能力和理解能力。大肠杆菌以二分裂方式增殖，故a项错误；c时期的调节方式为酶的合成调节，故b项错误；从题图中不难看出有明显的衰亡期，故c项正确；b时期的大肠杆菌体内只有利用葡萄糖的酶，而没有利用乳糖的酶，如果在只含乳糖的培养基中培养大肠杆菌，为缩短调整期，应该以d时期的大肠杆菌为菌种，故d项错误。26利用酵母菌酿制啤酒，需要先通气，后密封，下列说法不正确的是a酵母菌是兼性厌氧型微生物b先通气酵母菌大量繁殖，其种群的增长曲线为“s”型c密封后酵母菌可进行无氧呼吸产生酒精d密封的时间越长，产生的酒精越多【答案】d【解析】27生物兴趣小组模拟赫尔希和蔡斯做了下图所示的实验，有关分析错误的是（ ）a过程中与35s标记的噬菌体混合培养的是未被标记的大肠杆杆菌bb中含放射性的高低，与过程中搅拌是否充分有关c离心前混合时间过长会导致上清液放射性升高d上述实验过程并不能证明dna是遗传物质【答案】c【解析】用35s只能标记噬菌体的蛋白质外壳，而噬菌体侵染细菌时，其蛋白质外壳留在细菌外，蛋白质外壳较细菌轻，经离心后存在于上清液a中，理论上沉淀物b中不应具有放射性，a正确；搅拌越充分，蛋白质外壳与细菌分离得越彻底，沉淀物b中放射性越低，若蛋白质外壳与细菌彻底分离，则沉淀物b中不含放射性，b正确；若沉淀物b中具有放射性，则与过程中培养时间的长短无关，而是与过程中搅拌是否充分有关，c错误；上述实验并没有用放射性同位素32p标记dna，因此不能证明dna是遗传物质，d正确。【考点定位】噬菌体侵染细菌的实验【名师定睛】噬菌体侵染细菌实验的误差分析（1）32p标记的噬菌体侵染未被标记的细菌培养时间短部分噬菌体还未吸附、侵染至大肠杆菌细胞离心后未吸附至大肠杆菌细胞的噬菌体分布在上清液32p标记的一组上清液中出现放射性。培养时间过长噬菌体在大肠杆菌内大量繁殖大肠杆菌裂解死亡,释放出子代噬菌体离心后噬菌体将分布在上清液32p标记的一组上清液中出现放射性。（2）搅拌后离心,将吸附在大肠杆菌表面的噬菌体蛋白质外壳与大肠杆菌细胞分离搅拌不充分留在大肠杆菌细胞表面的噬菌体蛋白质外壳随大肠杆菌细胞分布在沉淀物中35s标记的一组沉淀物中出现放射性。搅拌过于剧烈大肠杆菌细胞被破坏释放出其中的噬菌体32p标记的一组上清液中出现放射性。28要将无根的烟草幼苗在无菌条件下培养成图示状态，合适且经济的培养基是（ ）a. 1/2ms培养基 b. ms培养基c. ms培养基+naa0.02mg/l d. ms培养基+6-ba2mg/l+naa0.02mg/l【答案】a【解析】试题分析：根据题中要求，要将无根的烟草幼苗在无菌条件下生根，选择1/2ms培养基效果最好，因为植物在生根过程中并不需要太多的营养，而且少量的营养也有利于植物吸收，培养基中的naa更加适宜植物生根，因此这种培养基合适且经济考点：植物组织培养29在从土壤中分离出分解纤维素的微生物的实验中，先进行选择培养，再用刚果红染色法进行分离，先选择培养的目的是（ ）a. 浓缩目标菌种 b. 除去杂菌，获得能分解纤维素的纯种菌c. 杀灭不需要的微生物 d. 在微生物的菌落上获得纤维素分解菌菌种【答案】a【解析】试题分析：在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此选择培养可以起到浓缩目标菌种的作用，但是不能得到单一菌种。该培养基中的化学成分不能杀死其它微生物。选择培养时用液体培养基，微生物在培养液中繁殖，不能获得目标菌落。故选a考点：本题考查选择培养的目的。点评：本题意在考查考生的识记能力，属于容易题。30在农田土壤的表层自生固氮菌较多。将用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其他细菌分开，对培养基的要求是（ ）加抗生素 不加抗生素 加氮素 不加氮素加葡萄糖 不加葡萄糖 37恒温箱中培养 2830温度下培养a. b. c. d. 【答案】c【解析】试题分析：自生固氮菌是异养菌，生长繁殖需要有机碳源；自生固氮菌能利用空气中的氮气，培养基中不加氮源，固氮菌能生长繁殖，不能固氮的菌不能生长繁殖；自生固氮菌的生长繁殖的最适宜温度是2830；自生固氮菌对抗生素敏感，培养基中不能加抗生素。所以如果从土壤浸出液中分离出自生固氮菌对培养基的要求是不加抗生素、不加氮素、加葡萄糖、2830恒温箱中培养。考点：微生物的分离和培养二、非选择题31（11分）利用纤维素解决能源问题的关键，是高性能纤维素酶的获取。请完善实验方案，并回答相关问题。实验目的：比较三种微生物所产生的纤维素酶的活性。实验原理：纤维素酶催化纤维素分解为葡萄糖，_，葡萄糖的生成量表示酶活性大小。实验材料：三种微生物（a、b、c）培养物的纤维素酶提取液，提取液中酶蛋白浓度相同。实验步骤：取四支试管，分别编号。在下表各列的一个适当位置，填写相应试剂的体积量，并按表内要求完成相关操作。 管号试剂（ml）1234 蒸馏水1.41.41.4ph7.5的缓冲液0.20.20.20.2纤维素悬浮液0.30.30.30.3微生物a提取液0.1微生物b提取液微生物c提取液0.1总体积2.02.02.02.0将上述四支试管放入37的水浴中，保温1小时。在上述四支试管中分别加入 试剂，摇匀后，进行沸水浴2分钟。（5）观察比较实验组的三支试管与对照组试管的颜色及其深浅。实验结果：微生物a提取物微生物b提取物微生物c提取物颜色深浅程度分析讨论： 上述结果表明：不同来源的纤维素酶，虽然酶蛋白浓度相同，但活性不同。若不考虑酶的最适ph和最适温度的差异，其可能原因是 。你认为上述三种微生物中，最具有应用开发价值的是 。从解决能源问题的角度，开发这种纤维素酶的意义在于 。【答案】实验原理：纤维素酶催化纤维素分解为葡萄糖，葡萄糖与斐林试剂产生砖红沉淀的颜色深浅表示葡萄糖的生成量，葡萄糖的生成量表示酶活性大小。（2分）实验步骤： 如下表（2分） 管号试剂（ml）1234 蒸馏水1.5ph7.5的缓冲液纤维素悬浮液微生物a提取液微生物b提取液0.1微生物c提取液总体积 2ml斐林试剂 (班氏试剂) （1分，要求等量）（2分）分析讨论：不同酶的分子结构不同 （2分） 微生物b（2分） 纤维素酶催化纤维素分解为葡萄糖,葡萄糖可用作制取酒精的原料；用纤维素代替化石燃料（言之有理即给分）（2分）【解析】试题分析：本实验的实验目的是比较三种微生物所产生的纤维素酶的活性。其原理是纤维素酶催化纤维素分解为葡萄糖，葡萄糖与斐林试剂产生砖红沉淀的颜色深浅表示葡萄糖的生成量，葡萄糖的生成量表示酶活性大小。（2）实验设计必须遵守对照原则和单一变量原则；根据题意和图表分析不难填写相应试剂的体积量，具体数值见答案。葡萄糖属于还原性糖，可用斐林试剂或班氏试剂鉴定，要水浴煮沸。分析讨论：由于4号试管中没有加微生物提取液，所以是对照组。由于微生物提取液中有纤维素酶，能催化纤维素分解为葡萄糖，所以实验组试管均呈现砖红色。由于不考虑酶的最适ph和最适温度的差异，不同来源的纤维素酶具有多样性，因此造成活性不同的原因可能是组成不同来源的纤维素酶的氨基酸序列不同。从实验结果分析可知，b试管中颜色最深，说明分解纤维素得到的葡萄糖最多，因此最具有应用开发价值的是微生物b。开发这种纤维素酶的意义在于葡萄糖可用作制取酒精的原料；用纤维素代替化石燃料，从而减少环境污染。考点：本题考查酶的本质与特性、科学的实验方法，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握实验设计的基本原则，设计并完成相关实验解决生产实际中简单生物学问题的能力。32多氯联苯是一种对人体有很大危害的有机物质，呈油状液体，污染土壤后很难清除。研究发现部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用，为消除这种污染，科研人员计划从受污染的土壤中筛选出高效分解多氯联苯的菌株。(1)筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品_，接种到以_为唯一碳源的培养基上，从功能上讲，该培养基属于_。(2)对初步提取到的菌株要进行_，一般操作方法有两种，右图表示_法。(3)将l ml酵母菌溶液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 ml稀释液经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57、58，据此可得出每升溶液中酵母菌活菌数为_。【答案】 稀释（溶解） 多氯联苯 选择培养基 纯化 平板划线 5.7107个/l【解析】试题分析：从受污染的土壤中筛选出高效分解多氯联苯的菌株应用选择性培养基，其中以多氯联苯为唯一碳源。微生物的分离纯化方法有平板划线法和稀释涂布平板法。（1）筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品稀释，接种到以多氯联苯为唯一碳源的培养基上。在该培养基上只有能分解多氯联苯的菌株才能生长，因此从功能上讲，该培养基属于选择培养基。（2）对初步提取到的菌株要分离纯化，有两种操作方法：平板划线法和稀释涂布平板法，图示有接种环，说明纯化方法是平板划线法。（3）由题意可知，每升水样中的活菌数为（56+57+58）30.1100103=5.7107个。33生物选修1:生物技术实践lb液体培养基和lb固体培养基是微生物实验室中较常用的一种培养基，其配方为10g蛋白胨、10g/l酵母提取物、5g/l氯化钠等，主要用于培养细菌、扩增菌种数量。某研究组开展了氧气对微生物生长、繁殖的影响实验，请回答下列问题：（1）要配制供微生物生长、繁殖的培养基，其中一般都含有_和无机盐等。有些微生物对某些特殊营养物质及_等条件有特殊要求。（2）将各类微生物用_从斜面培养基接种于灭菌过的lb液体培养基中，进行扩大化培养。（3）将含有lb固体培养基（lb液体培养基中加15g琼脂粉，刚配好，尚未凝固）的锥形瓶放入_中进行灭菌。灭菌完成后将锥形瓶取出，待温度下降到60（不烫手的温度）时，用_擦拭桌面和双手，在超净工作台中的_旁将锥形瓶中的lb培养基分装到一系列试管，并做标记。（4）当试管温度下降到40 （培养基还是液态）时，用灭菌过的移液器吸取0.1ml的各类微生物悬液加入相应试管中并封口，双手快速搓动试管，使菌种均匀分布于培养基内后迅速将封口的试管放置在_条件下使培养基凝固。（5）将上述试管放置于常温条件下培养48小时后观察实验结果，下图中可表示制作果酒的菌种的分布图的是_。【答案】 水、碳源、氮源 ph、氧气 接种环 高压蒸汽灭菌锅 酒精 酒精灯火焰 低温 b【解析】试题分析：微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对ph、特殊营养物质以及氧气的要求。对异养微生物来说，含c、n的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用。无菌技术的主要内容：对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。（1）要配制供微生物生长、繁殖的培养基，其中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等有些微生物对某些特殊营养物质及ph、氧气等条件有特殊要求。（2）斜面培养基接种用接种环接种，对微生物进行扩大化培养。（3）培养基一般采用高压蒸汽灭菌法灭菌灭菌完成后将锥形瓶取出，待温度下降到60时，用酒精擦拭桌面和双手，在超净工作台中的酒精灯火焰旁将锥形瓶中的lb培养基分装到一系列试管，以防止杂菌污染。（4）培养基凝固需要放置在低温条件下。（5）参与果酒制作的菌种是酵母菌，其新陈代谢类型是异养兼性厌氧型，因此图中表示果酒制作菌种的图是b。【点睛】解答本题的关键是分析题（5）的图，通过不同试管中微生物存在的位置，判断其可能代表的代谢类型。34以下是从自然菌群中筛选理想菌种的主要步骤，请回答：采集菌样富集培养纯种分离性能测定菌种保藏（1）在寻找目的菌株时，要根据它对 的要求，到相应的环境中去寻找，因此筛选嗜盐菌应从 中分离、纯化。（2）富集培养是在将样品稀释涂布到鉴別品种的培养基之前，可以通过 增加目的菌株的浓度，目的是 。（3）下图所示的操作是培养基配制过程中的 ，该操作的正确使用顺序是： （用图中的序号和箭头表示）,步骤需要培养基冷却到 才能操作步骤操作的目的是 。（4）对获取的菌种通常是在 条件下进行短时间保藏，也可以利用 的方法短期保存。【答案】（1）生存环境 高盐环境（2）选择培养 （2分）确保能够从样品中分离到所需要的微生物（2分）（3）倒平板 （2分）50左右（2分）（4）低温（4） 甘油管藏【解析】（1）在寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。嗜盐菌能耐盐，因此可以去高盐环境中分离、纯化出嗜盐菌。（2）富集培养是在将样品稀释涂布到鉴別品种的培养基之前，可以通过选择培养，增加目的菌株的浓度。这样可以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。（3）如图所示的操作是倒平板过程，倒平板操作的步骤：将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞；右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰；用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖；等待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上，这样可以防止皿盖上的水分滴到培养基上造成培养基的污染，因此过程为。（4）对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，在固体斜面培养基上菌落长成后，放入冰箱低温保藏。对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。【考点定位】微生物的分离和培养35回答下列（一）、（二）小题：（一）镉是工业废水中常见的污染物，对人休的伤害极大，我国环保法列为一类污染物。一些微牛物可以分泌多聚糖，糖蛋白，脂多糖，可溶性氨基酸等胞外聚介物质，这些聚合物具有络合或沉淀金属离子，从而起到净化工业废水中重金属盐的功能。某同学准备依据下图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选镉降解高效菌株。请回答下列问题：（1）_是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。（2）镉降解菌富集培养基含有蛋白胨、镉、葡萄糖、水等物质，则其在进行灭菌时应控制压力在_。分离时应取不同浓度的稀释液_ml涂也到平板上。（3）下图为平板划线法分离纯化细菌，整个实验过程需要将接种环灼烧灭菌_次。a.2 b.3 c.4 d.5（4）采用光电比色测定法检测降解后的废水中镉留量。在制备标准曲线实验过程，下表中15号比色管的镉浓度应分别为_。管号123456镉浓度（mg/ml)1最后分别以_为横、纵坐标绘制曲线。（二）生物技术己经渗入到了我们生活的方方面面。请回答下列有关动物细胞培养的相关问题：（1）动物细胞培养的原理是_，需要将培养瓶放入_培养。（2）培养过程中需要用胰蛋白酶消化组织中的_。（3）传代培养得到的细朐系往往具有_核型。关于细胞系和细胞株下列说法错误的是（_）a.原代培养得到的细胞也可以是细胞系b.细胞株是特殊的细胞系c.连续细胞系都获得了不死性d.连续细胞系不一定都发生了转化（4）细胞克隆又称为克隆培养法，它的最主要用途之一就是从普通细胞系中分离出_突变会田胞系。【答案】 单菌落的分离 500g/cm2 0.1 c 0、0.2、0.4、0.6、0.8 镉浓度、光密度值 细胞增值 c02培养箱 胶原纤维 异倍体 d 缺乏特殊基因【解析】试题分析：微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对ph、特殊营养物质以及氧气的要求对异养微生物来说，含c、n的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用。微生物常见的接种的方法：平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。（一）（1）单菌落的分离是消除污染杂菌的通用方法。（2）镉降解菌富集培养基含有蛋白胨、镉、葡萄糖、水等物质，则其在进行灭菌时应控制压力在500g/cm2。分离时应取不同浓度的稀释液0.1ml涂到平板上。（3）根据图中平板划线法中划线的方向和起始端可知，整个实验过程中划了三次线，而每一次划线前后都需要灭菌，所以一共需要灭菌4次，故选c。（4）以镉浓度为自变量，光密度值为因变量绘制曲线图，其中表格中各组的镉浓度应该等浓度梯度，为0、0.2、0.4、0.6、0.8。（二）（1）动物细胞培养的原理是细胞增值，需要将培养瓶放入c02培养箱培养。（2）动物细胞培养过程中需要用胰蛋白酶处理，消化组织中的胶原纤维，使得组织细胞分散开来。（3）传代培养得到的细朐系往往具有异倍体核型。原代培养得到的细胞也可以是细胞系，a正确；细胞株是特殊的细胞系，b正确；连续细胞系都获得了不死性，c正确；连续细胞系肯定都发生了转化，d错误。（4）细胞克隆又称为克隆培养法，它的最主要用途之一就是从普通细胞系中分离出缺乏特殊基因突变会田胞系。36同学们参观某白酒厂造酒过程，看到一堆一堆的高粱被撒上某菌种后加水使其湿润，并每过两小时用木掀翻转一次，两天后将其放入一密闭容器中保温十多天。最后进行蒸馏得到白酒。（1）造酒过程所用菌种是_。（2）早期翻转的目的是_，以保障菌体的_。而密闭后菌体主要进行_以产生_。（3）在实验室为了得到该菌种的纯种，所用培养基必须经过_以防止其他微生物污染。（4）为筛选出某菌种，所用培养基有利于目的菌生长，而抑制其他菌的生长，这叫_培养基。若往培养基中增添青霉素则有利于_细菌的生长。【答案】 酵母菌 通氧 有氧呼吸 无氧呼吸 酒精 高压蒸汽灭菌 选择 对青霉素有耐药性【解析】试题分析：熟记并理解果酒的制作、微生物的实验室培养与分离等相关基础知识、形成清晰的知识网络。在此基础上结合题意作答。(1) 造酒过程所用菌种是酵母菌。 (2)酵母菌是兼碱性厌氧菌，发酵的早期需通入无菌的空气（氧气），让酵母菌进行有氧呼吸并快速繁殖，以增加酵母菌的数量，当氧气消耗完后进行无氧呼吸产生酒精。因此早期翻转的目的是通氧，以保障菌体的有氧呼吸。而密闭后菌体主要进行无氧呼吸以产生酒精。(3) 通常采用 高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌。(4)有利于目的菌生长、而抑制其他菌生长的培养基叫选择培养基。若往培养基中增添青霉素则有利于对青霉素有耐药性细菌的生长。37生活饮用水已经过沉淀、过滤、加氯消毒等处理，含微生物很少，但当其水源水不洁或处理达不到要求时，仍然会含相当量的微生物甚至含有致病性微生物。供水管道破损及二次供水等环节也可能导致生活饮用水的污染。因此生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。我国生活饮用水水质标准（gb574985）中规定生活饮用水中细菌总数不得大于100个/ml，总大肠菌群不得大于3个/l。（1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为_。（2）用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组？_。为什么？_。（3）如分别取0.1 ml已稀释102倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为161、155、158、170，则每升原水样中大肠杆菌数为_。（4）纯化大肠杆菌时使用的培养基一般用_法灭菌，_（可/不可）用加入抗生素的方法防止杂菌感染。（5）如果要测定水中的病毒种类，可以用_技术使其遗传物质扩增，然后用_技术进行鉴定。【答案】 稀释涂布平板法 需要 因为需要判断培养基是否被污染 1.61108 高压蒸汽灭菌 不可 pcr dna分子杂交【解析】试题分析：（1）先将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量的方法是稀释涂布平板法。（2）因为要判断培养基是否被污染，需要设置不加稀释水样的对照组。（3）每升原水样中大肠杆菌数为1000x102/0.1x(161+155+158+170)/4= 1.61108个。（4）微生物培养时，培养基一般用高压蒸汽灭菌；细菌对抗生素敏感，培养基中若加入抗生素会在杀灭杂菌的同时，也会导致大肠杆菌死亡。（5）病毒的遗传物质是dna或rna,体外扩增遗传物质常用pcr技术；鉴定dna时可用dna分子杂交，通过是否形成杂交带来确认。考点：本题考查微生物培养与计数及病毒检测等相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。38（4分）自然界中的往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。步骤：制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。用稀释涂布平板法接种样品。适宜温度下培养。结果分析：（1）测定的大肠杆菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中得到以下几种统计结果，正确可信的是 。a、一个平板，统计的菌落数是23b、两个平板，统计的菌落数是22和26，取平均值24c、三个平板，统计的菌落数分别是21、5和52，取平均值26d、四个平板，统计的菌落数分别是21、30、24和25，