中图版选修一 蛋白质的提取和分离 作业.docx

蛋白质的提取和分离一、单选题1下列关于dna和血红蛋白的粗提取与分离(鉴定)实验的叙述，正确的是( )a提取dna或血红蛋白都可用猪的成熟红细胞bdna的粗提取与鉴定实验中，两次dna析出的方法相同c实验中都要去除杂质以便得到较纯净的dna或血红蛋白d提取出的血红蛋白溶液在双缩脲试剂中即可观察到紫色【答案】c【解析】猪的成熟红细胞无细胞核，故不能作为提取dna的生物材料；在dna的粗提取与鉴定实验中，第一次dna的析出是利用dna在不同氯化钠溶液中的溶解度不同，第二次是利用dna不溶于酒精的原理；血红蛋白不溶于双缩脲试剂，且血红蛋白为红色，紫色反应不易观察。2下列关于凝胶色谱法的原理及操作不正确的是()a是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法b在洗脱过程中，大分子不能进入凝胶内部而最先流出，而小分子可以进入凝胶内部而流速缓慢，以致最后流出c凝胶内部有很微细的多孔网状结构，其孔隙大小与被分离的物质分子的大小无相应关系d一般情况下，凝胶对要分离的物质没有吸附作用，因此所有要分离的物质都应该被洗脱出来【答案】c【解析】试题分析：凝胶色谱法的是根据相对分子质量大小分离物质的方法，原理是相对分子质量较小的分子容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；相对分子质量较大的分子无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快，所以 凝胶孔隙大小与被分离的物质分子的大小有相应关系，c错误。考点：本题考查凝胶色谱法的原理及操作过程，意在考查考生的知识应用能力。3在利用凝胶电泳法分离蛋白质时，一定要加入缓冲溶液，起到的作用是( )。a使酶的活性最高b使蛋白质的活性最高c维持蛋白质所带电荷d使蛋白质带上电荷【答案】c【解析】加缓冲液的目的是维持蛋白质所带电荷不发生改变而不是使蛋白质带上电荷。4下列关于dna和血红蛋白的提取与分离实验的叙述中，错误的是（ ）a. 可用蒸馏水涨破细胞的方法从猪的红细胞中提取到dna和蛋白质b. 用不同浓度的nacl溶液反复溶解与析出dna可除去部分杂质c. 透析法分离蛋白质的依据是蛋白质不能通过半透膜d. 凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法【答案】a【解析】猪是哺乳动物，哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核和线粒体，不能从其红细胞中提取出dna。5下列操作可以达到目的的是选项操作目的a用醋酸洋红处理花药观察细胞核的位置，确定花药的成熟程度b将装有蛋白质粗制品的透析袋放入透析液中血红蛋白质与其他小分子蛋白分离c在dna粗提取实验中，鸡血中加入蒸馏水稀释，防止血液凝固d将抗原注入小鼠体内获得能大量增殖的效应b细胞【答案】ab【解析】试题分析：在培养花药之前，通常用醋酸洋红处理花药，用已染色的花粉样品制作临时装片，镜检，观察细胞核的位置，以确定花粉发育的时期，即花药的成熟程度，a项正确；透析法是利用半透膜将分子大小不同的蛋白质分开，血红蛋白是大分子的蛋白质，若除去血红蛋白粗制品中的小分子蛋白质，常利用透析的方法，b项正确；在dna粗提取实验中，鸡血中加入蒸馏水目的是使血细胞吸水涨破，c项错误；效应b细胞无增殖能力，d项错误。考点：本题考查植物的组织培养、蛋白质的提取和分离、dna的粗提取与鉴定、单克隆抗体的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。6下列关于蛋白质的提取与分离的叙述正确的是( )a.在凝胶色谱柱内,相对分子质量较大的蛋白质路程较长,但移动速度较快b.从凝胶色谱柱中最后分离出来的是相对分子质量较小的蛋白质c.蛋白质的纯化使用最多的方法是sds聚丙烯酰胺凝胶电泳法d.分离血红蛋白溶液时,离心管的第三层是脂类物质【答案】b【解析】在凝胶色谱柱内,相对分子质量大的蛋白质不能进入凝胶内,路程短,移动速度快;而相对分子质量小的蛋白质会进入凝胶内,路程长,移动速度慢,最后洗脱出来的是相对分子质量较小的蛋白质, a项错误、b项正确;sds聚丙烯酰胺凝胶电泳法是蛋白质纯度鉴定使用最多的方法,c项错误;分离血红蛋白溶液时,离心管中将出现四层,其中第三层就是血红蛋白溶液,d项错误。7 样品的加入和洗脱的操作不正确的是（ ）a. 加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面的下面b. 加样后，打开下端出口，使样品渗入凝胶床内c. 等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口d. 用吸管小心的将1ml透析后的样品加到色谱柱的顶端，不要破坏凝胶面【答案】a【解析】试题分析：加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到与凝胶面平齐关闭出口，故a错误。加样后，打开下端出口，使样品渗入凝胶床内，故b正确。等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口，故c正确。用吸管小心的将1ml透析后的样品加到色谱柱的顶端，不要破坏凝胶面，故d正确。考点：本题考查血红蛋白的提取和分离相关知识，意在考察考生对知识点的识记掌握程度。8脲酶能够将尿素分解为氨和，其活性位点上含有两个镍离子，在大豆、刀豆种子中含量较高，土壤中的某些细菌也能够分泌脲酶。实验室从土壤中分离得到了能够分解尿素的细菌m，并分别研究了培养液中的、和尿素浓度对细菌m脲酶产量的影响（说明：研究某一项时其他条件相同且适宜），结果如下表。下列说法正确的是（ ）a所有脲酶都在核糖体上合成且在内质网上加工使其与镍结合才具有活性b实验表明培养液中和对脲酶的影响为低浓度促进，高浓度抑制c细菌m合成脲酶需要尿素诱导，尿素的最适诱导浓度在04%08%之间d凝胶色谱法分离脲酶时，脲酶比其他小分子蛋白质在凝胶柱中移动更慢【答案】c【解析】根据题意可知，细菌也能分泌脲酶，但细菌细胞内除核糖体外没有内质网等其他细胞器，故细菌分泌的脲酶的过程与内质网无关，a错误；分析表中数据可知，培养液中尿素浓度在08时，培养液中和对脲酶的影响为低浓度促进，高浓度抑制，但培养液中尿素浓度大于08%而小于10%时，没有此规律，b错误；表中数据表明，培养液中尿素的浓度在04%08%之间时，脲酶的产量相对较高，说明细菌m合成脲酶需要尿素诱导，尿素的最适诱导浓度在04%08%之间，c正确；凝胶色谱法分离蛋白质时，相对分子质量较小的小分子蛋白质在凝胶柱中移动更慢，d错误。考点：生物实验数据分析和蛋白质的分离【名师点睛】1分析实验结果的数据记录时，应注意分析实验的自变量与因变量之间的关系，即在遵循单一变量原则的前提下，一次只分析一种自变量与因变量之间的数值规律，找出自变量对因变量的影响。如分析培养液中尿素浓度对脲酶产量的影响是，镍离子和锰离子浓度都是无关变量，只分析尿素浓度变化与脲酶产量之间的数值变化规律，可得出尿素的最适诱导浓度在04%08%之间。2凝胶色谱法分离蛋白质时，小分子蛋白质会进入凝胶颗粒内部，故其移动的路径较长，在凝胶柱中移动更慢；而分子较大的蛋白质不进入凝胶颗粒，只在凝胶颗粒之间移动，故其移动的路径较短，移动速度较快，最先被分离出来。9以下关于血红蛋白提取和分离的过程及原理叙述正确的是a. 红细胞洗涤过程中要加人5倍体积的蒸馏水，重复洗涤3次b. 将血红蛋白溶液放在质量分数为0.9%的nac1溶液中透析12小时c. 凝胶装填在色谱柱内要均匀，不能有气泡存在d. 蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较大的移动速度慢【答案】c【解析】红细胞洗涤过程中要加入5倍体积的生理盐水，缓慢搅拌，低速短时离心，如此并重复洗涤3次，目的是除去杂蛋白，a错误；透析时使用物质的量浓度为20mmol/l的磷酸缓冲液，而不是用0.9%的nacl溶液，b错误；在装填凝胶柱时，不得有气泡存在，气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果，c正确；蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较大的在凝胶外部移动，移动速度快，d错误。10下列关于dna和血红蛋白的提取与分离实验的叙述中，错误的有a提取哺乳动物红细胞中的dna和蛋白质可以采用蒸馏水胀破细胞的方法b采用不同浓度的nacl溶液反复溶解与析出dna的方法可去除蛋白质等杂质c蛋白质纯化过程中采用透析法可去除溶液中的小分子杂质d血红蛋白只能采用凝胶色谱法纯化，dna则可采用电泳、盐析等方法纯化【答案】d【解析】dna和蛋白质存在于细胞内，用动物作材料提取dna和蛋白质，都要用蒸馏水处理，使细胞吸水涨破，释放出其中的蛋白质或dna，a正确；dna在不同浓度的nacl溶液中的溶解度不同，因此可以采用不同浓度的nacl溶液反复溶解与析出dna的方法可去除蛋白质等杂质，b正确；蛋白质纯化过程中，由于小分子杂质可以通过透析袋，大分子蛋白质不能通过透析袋而留在袋内，因此可以采用透析法可去除溶液中的小分子杂质，c正确；凝胶色谱法纯化血红蛋白只是很多纯化方法中的一种，蛋白质的纯化也可以采用电泳、盐析等方法纯化，d错误【考点定位】 蛋白质的提取和分离；dna的粗提取和鉴定【名师点睛】本题是对dna的粗提取和蛋白质分子提取过程的比较、dna和蛋白质分子分子纯化的方法的考查，回忆dna分子的粗提取与鉴定及血红蛋白的提取和分离的过程，然后分析选项进行解答11下列是关于血红蛋白的提取和分离实验中关键步骤，其中正确的是（ ）a蛋白质的提取和分离一般可分为粗分离、样品处理、纯化、纯度鉴定等4步b蛋白质的提取和分离实验可以以猪、牛、羊、蛙等动物的血液为材料分离血红蛋白c对样品的处理过程分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、透析和分离血红蛋白等d对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是sds聚丙烯酰胺凝胶电泳【答案】d【解析】试题分析：蛋白质的提取和分离一般可分为样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定等4步，a项错误；一般用哺乳动物入牛、羊的成熟的红细胞作为实验材料提取和分离血红蛋白，而不用鸡、蛙等动物的血液为材料，b项错误；对样品的处理过程分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液和透析等，c项错误；对蛋白质的纯度鉴定的方法中，使用最多的是sds聚丙烯酰胺凝胶电泳，d项正确。考点：本题考查血红蛋白的提取和分离实验的相关知识，意在考查考生独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用的能力。12下列有关凝胶色谱法的叙述，不正确的是a. 凝胶色谱法的原理是不同大小的分子所经的路径不同而得以分离b. 目前经常使用的凝胶有交联葡聚糖、聚丙烯酰胺和琼脂糖等c. 大分子物质后被洗脱出来，小分子物质先被洗脱出来d. 血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测【答案】c【解析】凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢；相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离，a正确；目前经常使用的凝胶有交联葡聚糖、聚丙烯酰胺和琼脂糖等，b正确；相对分子质量较小的蛋白质由于扩散作用进入凝胶颗粒内部而使其经过的路程较长；相对分子质量较大的蛋白质被阻在凝胶颗粒外面，在颗粒之间迅速通过。因此大分子先被洗脱出来，小分子物质后被洗脱出来，c错误；由于血红蛋白有颜色，所以在凝胶色谱法分离过程中易分辨，可用于凝胶色谱法分离过程的监测，d正确。13下列各项中，一般不影响在凝胶色谱法分离蛋白质中的分离度的是()a层析柱高 b层析柱的直径c缓冲溶液 d样品的分布【答案】b【解析】试题分析：凝胶色谱法的原理是利用凝胶珠这间的孔隙。大分子蛋白进不去那些孔隙，只会从凝胶珠之间迅速通过，优先出柱，而小分子蛋白会进入凝胶珠这间的孔隙，从而延长留柱时间，延后出柱，。因此，只有蛋白质从上到下的流动速率才会影响到分离度，水平扩散不会影响分离度，所以， 层析柱高会影响分离度，而层析柱直径无影响。 缓冲溶液会影响蛋白质的三维结构，也就是蛋白质的直径大小，因此会影响分离度。样品的分布也会，因为分子量过于接近的蛋白混合样品，分离度肯定比较差。考点：本题考查影响在凝胶色谱法分离蛋白质中的分离度的因素，意在考查考生的知识掌握情况。14下列关于红细胞和血红蛋白的叙述，不正确的是a. 哺乳动物成熟的红细胞可用于制备细胞膜和提取血红蛋白的生物材料b. 血红蛋白属于细胞外液的成分，其组成元素有c、h、o、n、fec. 血红蛋白的纯化可用凝胶色谱法，其原理是根据相对分子质量大小分离蛋白质d. 蛙的红细胞可进行无丝分裂，其特征是没有出现纺锤丝和染色体的变化【答案】b【解析】试题分析：哺乳动物成熟的红细胞没有核膜和众多的细胞器，易吸水涨破，可用于制备细胞膜和提取血红蛋白的材料，a正确。血红蛋白是红细胞内的结构蛋白，其组成元素有c、h、o、n、fe，b错误。凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法，c正确。无丝分裂过程中不出现纺锤丝和染色体的变化，d正确。考点：本题考查红细胞的相关知识，意在考查考生识记能力、理解所学知识要点，把握知识间内在联系，构建知识网络结构的能力。15下面说法不正确的是 a.凝胶色谱分离法分离蛋白质时，利用凝胶改变蛋白质分子通过的路径b.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程c.洗涤红细胞时，离心所采用的方法是低速长时间离心d.在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液ph的影响，维持ph基本不变【答案】c【解析】试题分析：凝胶色谱分离法分离蛋白质时，蛋白质的相对分子质量不同，通过的途径不同，故a正确；电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程，故b正确；在洗涤红细胞中，离心速度过高和时间过长，会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀，得不到纯净的红细胞，影响血红蛋白的提取纯度，故c错。缓冲溶液中的物质能与酸性物质和碱性物质发生反应，维持ph不变，故d正确。考点：本题主要考查蛋白质的分离，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。16相对分子质量不同的两种蛋白质在凝胶色谱柱中的行进过程，可表示为图中哪一个（）a. b. c. d. 【答案】b【解析】相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，a错误；相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢,相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，b正确；相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，c错误；相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，且其路程短，移动的速度快，d错误。【点睛】凝胶色谱法分离蛋白质的原理：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离。17有资料显示，在非洲，镰刀型细胞贫血症基因的携带者更能适应当地的环境。有人认为这种人的血红蛋白可能与正常人或镰刀型细胞贫血症病人的有一定差异。为证实这种猜想，需对携带者的血红蛋白进行检测，而检测前需要分离得到这种血红蛋白。试想分离提纯镰刀型细胞贫血症携带者（aa）的血红蛋白时，用不到的药品或仪器是（ ）a琼脂糖 b磷酸缓冲液 c离心机 d二苯胺【答案】d【解析】二苯胺是鉴定、检测dna的化学试剂，与分离提纯血红蛋白无关，所以不需要该药品，选d。【考点定位】血红蛋白的分离与提纯18下列关于电泳的说法中，正确的是（ ）a电泳是指不带电的分子在电场的作用下发生迁移的过程b电泳的过程要在一定的ph下，所以一定要使用缓冲液c葡聚糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳是两种常用的电泳方法d聚丙烯酰胺凝胶电泳中，溶液中加入十二烷基硫酸钠(sds)，电泳的迁移率主要取决于分子所带电荷的多少和相对分子质量的大小【答案】b【解析】试题分析：电泳是指带电的分子在电场的作用下发生迁移的过程，a错误；电泳的过程要在一定的ph下，所以一定要使用缓冲液，b正确；琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳是两种常用的电泳方法，c错误；聚丙烯酰胺凝胶电泳中，溶液中加入十二烷基硫酸钠(sds)，电泳的迁移率主要取决于相对分子质量的大小，d错误。考点：本题考查电泳法分离蛋白质的知识。19有关生物技术的操作过程或应用的叙述，错误的是 ( )a测定泡菜中亚硝酸盐含量时需要标准显色液b利用凝胶色谱柱分离蛋白质时，相对分子质量小的蛋白质早一些从层析柱中洗脱出来c获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵d以尿素作为唯一碳源的培养基用于鉴别细菌【答案】bd【解析】试题分析：测定泡菜中亚硝酸盐含量时需要标准显色液，观察亚硝酸盐溶液颜色的梯度变化，故a正确。利用凝胶色谱柱分离蛋白质时，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部通道，路程较长，移动速度较慢，分离较慢；相对分子质量大的蛋白质无法进入凝胶内部通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快，较快分离，故b错。胚胎分割技术是将动物早期胚胎分割为几等份，利用细胞全能性，移植获得同卵多胎，为无性繁殖，故c正确。以尿素作为唯一氮源的培养基用于筛选分解尿素的细菌，故d错。考点：本题主要考查生物技术的相关内容，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。20在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是a. 防止血红蛋白被氧化b. 血红蛋白是一种两性物质，需要酸中和c. 磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程d. 让血红蛋白处在稳定的ph范围内，维持其结构和功能【答案】d【解析】磷酸缓冲液的作用是维持反应体系的ph不变。在生物体内进行的各种生物化学过程都是在精确的ph下进行的，受到氢离子浓度的严格调控。为了在实验室条件下准确地模拟生物体内的天然环境，就必须保持体外生物化学反应过程有与体内过程完全相同的ph。利用磷酸缓冲液模拟细胞内的ph环境，保证血红蛋白的正常结构和功能，便于分离观察和研究。故选：d。21在蛋白质的提取和分离中，下对样品处理过程的分析正确的是( )。a洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐b洗涤时离心速度过小，时间过短，白细胞等会沉淀，达不到分离的结果c洗涤过程选用质量分数0.1%的nacl溶液(生理盐水)d透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质【答案】d【解析】洗涤红细胞的目的是去除血浆中除血红蛋白以外的杂蛋白；洗涤时离心速度过大，时间过长，白细胞等会沉淀，达不到分离的效果；洗涤过程选用质量分数为0.9%的生理盐水。22下列试剂可用于血红蛋白释放的是（ ）0.9%的生理盐水甲苯磷酸缓冲液蒸馏水柠檬酸钠a b c d【答案】d【解析】试题分析：0.9%的生理盐水是洗涤红细胞是应用的试剂，不能用于血红蛋白释放；甲苯的作用是溶解细胞膜的磷脂，加速血红蛋白的释放；磷酸缓冲液用于粗分离蛋白质，不能用于释放血红蛋白；蒸馏水作用是使红细胞吸水胀破，释放其中的血红蛋白；柠檬酸钠的作用是采血时，防止血液凝固，不能用于血红蛋白的释放，故选：d。考点：本题主要考查血红蛋白的提取和分离过程中相关试剂的应用的区别记忆相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。23可以利用哺乳动物成熟的红细胞为实验材料进行的实验有a分离各种细胞器 bdna的粗提取c分离并纯化血红蛋白 d进行细胞培养【答案】c【解析】试题分析：哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核和众多的细胞器，不能用来分离各种细胞器，a项错误；哺乳动物成熟的红细胞没有dna，不能用于dna的粗提取，b项错误；哺乳动物成熟的红细胞含有血红蛋白，可以用来分离并纯化血红蛋白，c项正确；哺乳动物成熟的红细胞没有分裂能力，不能制成细胞悬浮液进行细胞培养，d项错误。考点：本题考查哺乳动物成熟的红细胞的组成成分和结构、细胞增殖的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，运用所学知识做出准确判断的能力。24红细胞含有大量血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。下列对血红蛋白提取和分离的叙述，错误的是a血红蛋白的提取和分离一般按照“样品处理粗提取纯化纯度鉴定处理”b纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液c粗分离时透析的目的是去除相对分子质量较小的杂质d可经sds聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定【答案】b【解析】试题分析：血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：样品处理粗提取纯化纯度鉴定处理，a正确；纯化过程中要用缓冲液充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液，b错误；血红蛋白溶液的粗分离采用的方法是透析，即将凝集的血红蛋白溶液放在透析袋中进行透析，去掉分子量较小的杂质，c正确；通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后可经sds聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定，d正确。考点：本题是对血红蛋白的提取和分离的实验操作的考查。25有关凝胶色谱法和电泳法的说法正确的是( )a.它们都是分离蛋白质的重要方法b.它们的原理相同c.使用凝胶色谱法需要用缓冲溶液而电泳不需要d.以上说法都正确【答案】a【解析】试题分析：凝胶色谱法和电泳法都是分离蛋白质的重要方法，a正确；凝胶色谱法和电泳法的原理不同，凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的，而电泳法的原理：待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、性状不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离，b错误；凝胶色谱法和电泳法都要用缓冲溶液来调节溶液的酸碱度，c错误；由a、b和c选项可知，b和c都错误，d错误。考点：本题考查蛋白质的提取和分离，解答本题的关键是理解和掌握凝胶色谱法和电泳法的原理，再结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查。二、非选择题26请回答下列有关细胞和分子生物学技术的问题：（1）dna粗提取的实验原理是：dna在不同浓度的nacl溶液中的溶解度不同，在 mol/l的nacl溶液中的最低；鉴定dna所用的试剂是 ，沸水浴加热呈 色；实验中使用酒精的目的是 ；实验过程中两次用到蒸馏水，第一次目的是使成熟的鸡血红细胞涨破释放出dna，第二次目的是 。（2）pcr技术的中文全称是 ，在操作过程中需要添加引物，它的化学本质是 。反应过程中控制不同温度的意义是不同的： 90以上时 ，双链dna解聚为单链；50左右时 ，引物与两条单链dna结合； 72左右时延伸，taq dna聚合酶有最大活性，使dna新链沿着 方向延伸。（3）血红蛋白的提取和分离试验中，分离纯化常用的方法有凝胶色谱法和电泳法，前者的原理是 ，后者的原理是 ，在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是 。【答案】（1）0.14 二苯胺 蓝 除去溶于酒精的蛋白质 稀释nacl溶液（2）多聚酶链式反应 dna或rna 变性 复制 5端向3端（3）根据相对分子质量的大小分离蛋白质 （2分）各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同（2分）让血红蛋白处在稳定的ph范围内，维持其结构和功能【解析】试题分析：（1）dna粗提取的实验原理是：dna在不同浓度的nacl溶液中的溶解度不同，在0.14mol/l的nacl溶液中的最低；鉴定dna所用的试剂是二苯胺试剂，沸水浴加热呈蓝色；实验中使用酒精的目的是除去溶于酒精的蛋白质；实验过程中两次用到蒸馏水，第一次目的是使成熟的鸡血红细胞涨破释放出dna，第二次目的是稀释nacl溶液。（2）pcr技术的中文全称是多聚酶链式反应，引物其实是一段核苷酸序列，它的本质是dna或rna，反应过程中控制不同温度的意义是不同的： 90以上时变性，50左右时复制，72左右时延伸，taq dna聚合酶有最大活性，使dna新链沿着5端向3端方向延伸。（3）血红蛋白的提取和分离试验中，凝胶色谱法的原理是根据相对分子质量的大小分离蛋白质，电泳法的原理各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同，在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是让血红蛋白处在稳定的ph范围内，维持其结构和功能。考点：本题考查dna的粗提取和鉴定实验、pcr技术及血红蛋白的提取和分离实验，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构的能力。27如图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置,请回答下列问题:(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有 功能。我们通常选用猪、牛、羊等动物的血液进行实验,实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,取血回来,马上进行离心,收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是 。(2)甲装置中,b是血红蛋白溶液,则a是 ;乙装置中,c溶液的作用是 。(3)甲装置用于 ,目的是 。用乙装置分离蛋白质的方法叫 ,是根据 分离蛋白质的有效方法。在操作中加样(下图)的正确顺序是 。(4)最后经sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行 。【答案】(1)运输 防止血液凝固(2)磷酸缓冲液 洗脱血红蛋白(3)透析(粗分离) 去除样品中相对分子质量较小的杂质 凝胶色谱法 相对分子质量的大小 、(4)纯度鉴定【解析】(1)血红蛋白能携带氧气,体现了蛋白质具有运输功能。实验前取新鲜的血液,要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠,柠檬酸钠具有防止血液凝固的作用。(2)甲装置中,b是血红蛋白溶液,则a是磷酸缓冲液;乙装置中,c溶液的作用是洗脱血红蛋白。(3)甲装置用于透析(粗分离),目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质。用乙装置分离蛋白质的方法叫凝胶色谱法,是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。(4)经sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。28常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖，但自然界中的某些酵母可以分解木糖产生酒精，但对酒精的耐受能力较差，科学家们利用人工诱变的技术获得了能利用木糖且对酒精耐受力强的酿酒酵母突变型，请回答下列问题：（1）获得上述突变型酿酒酵母的方法是：人工诱变后，使用_的液体培养基进行选择培养。（2）获得上述突变型酿酒酵母后，需要进行分离纯化，操作步骤如图：制备以上过程所需的培养基时需要倒平板操作，平板冷凝后需要倒置的原因是_，图乙是图甲过程a纯化培养的结果，接种时划线的顺序是_，图丙是图甲过程c纯化培养的结果，推测接种时主要的操作失误是_。（3）为测定突变型酿酒酵母的活性，用适宜浓度的海藻酸钠溶液将活化的酵母细胞固定化后发酵无菌麦芽汁制酒，实验中当海藻酸钠浓度较低时，细胞活力较低原因是_。若发酵条件符合操作要求。10天后检查发酵液发现麦芽汁几乎无酒味，发酵失败最可能的原因是_。（4）在血红蛋白的提取和分离实验中，从红细胞中释放出血红蛋白常用的方法是_，纯化蛋白质常用的方法是_ 。【答案】 木糖为碳源且添加一定浓度酒精的 防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染 涂布不均匀 海藻酸钠浓度较低时包埋不紧密，酶分子容易漏出，数量不足 将海藻酸钠熔化时未冷却就将活化的酵母菌液倒入 将红细胞放在蒸馏水和甲苯溶液中吸水胀破 凝胶色谱法(或电泳、透析法、离心沉降法)【解析】试题分析：由题意知：“酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精，但是对酒精的耐受能力差”，因此可以利用选择培养基筛选酿酒酵母突变型。（1）根据题意可知，“科学家们利用人工诱变的技术获得了能利用木糖且对酒精耐受力强的酿酒酵母突变型”，因此获得上述突变型酿酒酵母可以在人工诱变后，使用木糖为碳源且添加一定浓度酒精的液体培养基进行选择培养。（2）待平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是防止培养皿盖的冷凝水落入培养基造成污染。在培养基上接种时划线的顺序依次是每一区的划线应从前一区划线的末端位置开始划线，从而能将菌种逐区减少，所以划线顺序是；培养后菌落分布不均匀可能是接种时涂布不均匀造成的。（3）酵母细胞的固定化的实验中，当海藻酸钠浓度较低时，包埋不紧密，酶分子容易漏出，数量不足，导致细胞活力较低。若发酵条件符合操作要求10天后检查发酵液发现麦芽汁几乎无酒味，发酵失败最可能的原因是将海藻酸钠熔化时未冷却就将活化的酵母菌液倒入。（4）在血红蛋白的提取和分离实验中，从红细胞中释放出血红蛋白常用的方法是将红细胞放在蒸馏水和甲苯溶液中吸水胀破，纯化蛋白质常用的方法是凝胶色谱法（或电泳、透析法、离心沉降法）。29下列是有关血红蛋白的提取与分离的问题，请回答：（1）凝胶色谱法，是根据 分离蛋白质的有效方法。所用的凝胶实际上是一些 。（2）实验前取新鲜的血液，切记要预先加入柠檬酸钠，加入柠檬酸钠的目的是 。蛋白质的提取和分离实验中，首先要用 （填写溶液名称）洗涤红细胞，其目的是去除 。（3）在 的作用下，红细胞破裂，释放出血红蛋白。用 法可分离出血红蛋白。（4）取血红蛋白溶液装入透析袋，再将透析袋放入ph为70的 中，透析12h透析的目的是 。透析的原理是 。（5）人们用鸡的红细胞提取dna，用人的红细胞提取血红蛋白，其原因是 。【答案】（1）相对分子质量大小 微小的多孔球体 （2）防止血液凝固 生理盐水 杂蛋白 （3）蒸馏水和甲苯 （高速）离心 （4）（磷酸）缓冲液 去除分子质量较小的杂质 透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内（合理得分）（5）鸡红细胞具有细胞核，含有dna，适合用于提取dna；人红细胞无细胞核，且血红蛋白含量丰富，适合用于提取血红蛋白（2分）【解析】（1）凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法。所用的凝胶实际上是一些微小的多孔球体。相对分子质量较大的蛋白质经过凝胶颗粒的外部，移动距离短，移动速度快，先洗脱下来。（2）柠檬酸钠可以防止血液凝固；首先要用生理盐水洗涤红细胞，其目的是去除可能吸附的血浆中的蛋白质。（3）向红细胞中加入蒸馏水和甲苯，蒸馏水会使红细胞破裂，甲苯可以溶解细胞膜，经高速离心后可分离出血红蛋白。（4）透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内。取血红蛋白溶液装入透析袋，再将透析袋放入ph为70的缓冲液中，以维持血红蛋白的结构和功能。（5）鸡红细胞具有细胞核，含有dna，适合用于提取dna；人红细胞无细胞核，且血红蛋白含量丰富，适合用于提取血红蛋白。【考点定位】本题考查血红蛋白提取实验的选材与步骤。30蛋白质分子的大小、形状、结构不同，所带电荷的性质和多少不同，以及在盐溶液中溶解度不同，可以利用以上的不同对不同种类的蛋白质进行分离纯化，请回答以下问题：（1）分子大小：对于分子大小方面有一定差别的蛋白质可采用密度梯度离心、_、_等方法将它们分开。（2）形状：对两种相同质量的蛋白质而言，_形蛋白质具有较小的有效半径，在通过膜、凝胶过滤或电泳凝胶中的小孔运动时，遇到的摩擦力小，从而也能达到分离蛋白质的目的。（3）溶解度：蛋白质具有盐溶和_现象，根据蛋白质在不同浓度的盐溶液中_不同，通过控制_可分离析出蛋白质；蛋白质在不同浓度的有机溶剂中的溶解度有很大不同，从基本不溶（10 g/ml）直至极易溶解（300 g/ml）不等，故可分离蛋白质。（4）电荷：蛋白质净电荷取决于_，利用待分离样品中各种分子带电性质，可用_的方法将其分离；或者改变蛋白质混合物溶液中的盐离子浓度、ph和（阴、阳）离子交换填料，不同蛋白质对不同的离子交换填料的吸附容量不同，蛋白质因_而分离。（5）稳定性：多数蛋白质加热到94 时会因变性而沉淀，利用这一性质，可容易地将一种经这样加热后_的蛋白质从大部分其他蛋白质中分离开；也可用蛋白酶处理上清液，消化杂蛋白，留下某些_的蛋白质。【答案】 透析 电泳 球 盐析 溶解度 盐浓度 氨基酸残基所带的正负电荷的总和 电泳 吸附容量不同或不被吸附 仍具有活性的可溶性 抗蛋白酶【解析】试题分析：蛋白质的提取与分离的原理是根据蛋白质的理化性质，即：蛋白质的形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等的千差万别，由此提取和分离各种蛋白质。胶色谱法的原理：分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢。蛋白质的提取与分离的步骤为：（1）样品处理：红细胞的洗涤，血红蛋白的释放；（2）粗分离：分离血红蛋白溶液，透析；（3）纯化：调节缓冲液面加入蛋白质样品调节缓冲液面洗脱收集分装蛋白质；（4）纯度鉴定-sds聚丙烯酰胺凝胶电泳。（1）对于分子大小方面有一定差别的蛋白质可采用密度梯度离心、透析、电泳等方法将它们分开。（2）对两种相同质量的蛋白质而言，球形蛋白质具有较小的有效半径，在通过膜、凝胶过滤或电泳凝胶中的小孔运动时，遇到的摩擦力小，从而也能达到分离蛋白质的目的。（3）蛋白质具有盐溶和盐析现象，根据蛋白质在不同浓度的盐溶液中溶解度不同，通过控制盐浓度可分离析出蛋白质。（4）蛋白质的净电荷取决于氨基酸残基所带的正负电荷的总和，利用待分离样品中各种分子带电性质，可用电泳的方法将其分离；或者改变蛋白质混合物溶液中的盐离子浓度、ph和(阴、阳)离子交换填料，不同蛋白质对不同的离子交换填料的吸附容量不同，蛋白质因吸附容量不同或不被吸附而分离。（5）高温会使得大多数蛋白质变性，所以利用高温将仍具有活性的可溶性的蛋白质与其他蛋白质分离开来；蛋白酶可以将蛋白质水解，某些抗蛋白酶的蛋白质则包被水解而分离出来。31（10分）红细胞中含有大量的血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的，血红蛋白的主要功能是携带o2右co2，可选用猪、牛、羊或其他哺乳动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题：（1）血红蛋白提取和分离的程序可分为四步： 、 、 和 。（2）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是 。以上所述的过程即是 ，它包括 、 、分离血红收溶液和透析。（3）然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经sds聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定。样品纯化的目的是 。（4）电泳法利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及 、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。【答案】（1）样品处理 粗分离 纯化 纯度鉴定（2）防止血液凝固 样品处理 红细胞的洗涤 血红蛋白的释放 （3）通过凝胶色谱法将相对分子量大的杂蛋白除去（4）分子的大小【解析】血红蛋白提取和分离的程序可分为四步,分别是：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。在实验中加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固；样品处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红收溶液和透析四步。样品纯化的目的是通过凝胶色谱法将相对分子量大的杂蛋白除去，进而使sds聚丙烯酰胺凝胶电泳法中迁移速率只取决于分子大小。电泳法利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。考点：本题考查血红蛋白的相关知识，意在考查考生能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用的能力。32生物选修1：生物技术实践 生物界是个无穷宝库，人类从中获得了大量有用的物质。请回答下列有关问题。（1）利用谷氨酸棒状杆菌生产食用味精。欲纯化谷氨酸棒状杆菌并计数，将菌液接种到固体培养基上的方法是_。谷氨酸棒状杆菌的计数结果比实际值偏低，其原因是_。（2）动物血清中含白蛋白、球蛋白等多种蛋白质，从中依据相对分子质量大小分离出某种球蛋白最常用的方法是_。（3）辣椒素是辣椒中的辣味物质，可用于食品保健等领域。该物质不溶于水而易溶于有机溶剂，可以用_的方法提取，其提取效率主要取决于_。（4）植物芳香油天然珍贵，应用历史久远。提取玫瑰精油宜采用的方法是_，原因是玫瑰精油易挥发、难溶于水、化学性质稳定。在最后分离的油层中加入无水硫酸钠的目的是_，一般采用_法除去固体硫酸钠。【答案】 稀释涂布平板法 2个或多个谷氨酸棒状杆菌形成一个菌落 凝胶色谱法 萃取 萃取剂的性质和使用量 水蒸气蒸馏法 除去少量的水 过滤【解析】【试题分析】本题主要考查了从生物中获取